苏云金芽孢杆菌与蜡状芽孢杆菌亲缘关系研究

目的探讨苏云金芽孢杆菌(Bt)与蜡状芽孢杆菌(Bc)的亲缘关系,为Bt鉴定、安全性评价及降低其致病风险等提供科学依据。方法采用肠杆菌基因间重复一致序列-PCR(ERIC-PCR)技术,对6株苏云金芽孢杆菌和3株蜡状芽孢杆菌及对照菌株的基因组DNA进行扩增,对其指纹图谱进行分析;回收并克隆重复性好的苏云金芽孢杆菌基因组DNA扩增片段,以其为探针,分别与供试菌株基因组DNA进行杂交。结果与蜡状芽孢杆菌相比,苏云金芽孢杆菌菌株间基因组DNA指纹图谱较一致;所有供试苏云金芽孢杆菌菌株均扩增产生一条250 bp左右的片段;苏云金芽孢杆菌与蜡状芽孢杆菌均可扩增产生600 bp左右的共有DNA片段。此外,以苏云金芽孢杆菌500 bp片段为探针与苏云金芽孢杆菌基因组DNA杂交有很好的特异性。结论肠杆菌基因间重复一致序列-PCR指纹图谱可以正确反映苏云金芽孢杆菌与蜡状芽孢杆菌亲缘关系;500 bp片段可以作为苏云金芽孢杆菌鉴定探针。

NRSE/RE-1 dsRNA诱导小鼠胚胎干细胞分化为NSE阳性的神经元样细胞

应用电打孔的方法将化学合成的NRSE/RE-1d sRNA转染小鼠胚胎干细胞,在去除LIF的条件下,直接接种培养,观察其分化情况,并对分化结果进行相关检测.结果显示分化细胞呈明显的神经样改变,免疫荧光显示NSE阳性率为(82.3±8.1)%.说明通过转染NRSE/RE-1d sRNA能有效地诱导小鼠胚胎干细胞向神经元细胞分化.

骨髓间充质干细胞移植促进大鼠损伤脊髓的功能恢复

目的研究骨髓间充质干细胞(MSCs)移植对大鼠脊髓损伤的作用。方法将大鼠MSCs移植到大鼠脊髓损伤处,移植后评估大鼠行为学改变,免疫组织化学染色法观察BrdU标记的MSCs在脊髓损伤处存活情况,辣根过氧化物酶(HRP)逆行示踪,观察脊髓损伤处神经通路的重构建,皮层体感诱发电位(CSEP)测定脊髓损伤处神经通路传导功能的恢复。结果术后移植组评分均高于损伤组,移植组大鼠脊髓损伤区远端检测到BrdU阳性细胞,脊髓损伤近侧端检测到HRP阳性细胞,CSEP波形恢复但波幅减低,潜伏时延长。结论MSCs可在损伤区存活并分化为神经元,在损伤局部形成神经元通路,使损伤脊髓的远端和近端建立联系,神经纤维传导功能部分恢复。

激励制度与员工投入、工作满意度的关系研究——以制造业基层员工为例

笔者以制造业基层员工为例研究企业激励制度与员工投入、工作满意度的关系,根据制造业基层员工的实际情况设计出员工投入、工作满意度的问卷,并对制造业的基层员工发放调查问卷,收回有效问卷463份。根据调查问卷统计结果进行全面深入分析,并提出改善制造企业激励机制的一些建议。

神经元限制性沉默因子与大鼠骨髓间充质干细胞向神经元诱导分化的关系

目的分析神经元限制性沉默因子(NRSF)以及NRSF调控的基因在β-巯基乙醇诱导大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)向神经元分化过程中表达的变化,探讨NRSF在大鼠MSCs向神经元分化的作用及MSCs向神经元分化的机制。方法采用β-巯基乙醇、无血清的DMEM培养液和二甲基亚砜诱导大鼠MSCs分化成神经元,再通过实时定量PCR分析NRSF以及NRSF调控的基因在诱导前后表达的变化。结果应用β-巯基乙醇、无血清DMEM培养液和二甲基亚砜的诱导方案可以将MSCs诱导分化成神经元样细胞,诱导后的细胞神经元标记物神经元特异性烯醇化酶呈阳性,实时定量PCR检测NRSF基因表达显著下调,NRSF的靶基因神经营养酪氨酸激酶三型受体、突触相关蛋白25、L1细胞黏附分子、神经元钙结合蛋白受体表达有不同程度的上调。结论MSCs的神经元分化与NRSF下调及其调控的神经元分化相关基因表达上调有关。NRSF很可能是MSCs向神经元方向分化的关键基因,抑制NRSF表达可能是促进MSCs向神经元分化的关键步骤。

钢筋混凝土悬臂梁的构造问题

针对目前的设计和施工现状，对纵向钢筋的构造和弯曲钢筋的合理设置两个问题进行详细分析。并介绍了悬臂梁中采用弯起钢筋存在的缺陷。

框架-剪力墙结构的设计

介绍框架-剪力墙结构设计中的一般原则、楼面体系的选用、框架梁柱布置等问题。另外，还介绍了框架柱和框架梁的设计内容。

数控卧式车床自动换刀技术的研制

介绍了在普通数控卧式车床上安装刀库，并实现自动上下刀的关键技术。阐述了普通数控车床自动换刀技术的开发背景及设计中的关键技术，所研制的技术已成功用于生产。

尾静脉移植高表达Aqp1基因的骨髓间充质干细胞对股骨骨折大鼠骨愈合的影响

目的探讨尾静脉移植高表达水通道蛋白1(Aqp1)基因的骨髓间充质干细胞(MSCs)对股骨骨折大鼠骨愈合的影响。方法利用慢病毒系统建立稳定高表达Aqp1基因的MSCs(简称Aqp1-MSCs),采用Dun趋化小室系统实时验证MSCs、Aqp1-MSCs迁移速率。建立SD大鼠股骨骨折模型,并随机分为观察组和对照组各10只,建模2天分别由尾静脉移植Aqp1-MSCs及MSCs。移植后4周行X线检查,观察骨折愈合情况;取骨折股骨标本,采用micro-CT扫描后进行皮质骨3D重建,检测重建皮质骨的新骨生成比(BV/TV)及骨密度(BMD);应用四点断裂实验分析愈合后股骨的力学参数,即骨折部位承受最大力、能量与韧性。结果 Aqp1-MSCs与MSCs均具有定向趋向性,Aqp1-MSCs及MSCs迁移速率分别为(5.18±0.29)、(2.44±0.21)μm/10 min(P<0.05)。观察组和对照组BV/TV分别为0.18±0.01、0.15±0.02(P>0.05),BMD分别为(587.20±16.53)、(511.60±27.89)mg HA/ccm(P<0.05)。两组骨折部位承受的最大力和能量比较差异均无统计学意义(P均>0.05),观察组组织韧性高于对照组(P<0.05)。结论尾静脉移植Aqp1-MSCs可促进股骨骨折大鼠骨愈合;通过Aqp1诱导MSCs迁移可能是其作用机制。

鞍钢1780热轧生产线漩流井结构与声环境设计的改进

针对鞍钢 1780热轧生产线漩流井结构与声环境设计的缺陷进行了改进 ,有效治理了现场的噪声污染。

智能图书馆座位管理系统设计

设计了一种应对图书馆座位管理混乱的智能座位管理系统,这种软件与智能座椅相结合的管理模式可以有效解决座位占用问题,提高座位资源的可用性,大大改善人工管理的缺点。

水利水电工程施工过程中的设备物资管理解析

我国经济的发展离不开水利水电这两大工程的支持,尤其是在我国经济转型的关键时期,水利工程与水电工程更是发挥了非常重要的作用。因此,我国的有关部门愈发重视水利水电工程的施工与建设。在进行水利水电工程施工的过程中,关于设备物资的管理工作不仅在很大程度上影响了施工的建设成本,而且对于提高施工效率也起到了一定的作用。为了有效控制成本、加强质量管理,就需要对施工所需要的设备物资实行科学、合理的管理,从而更好地为工程建设提供服务。

雷帕霉素对衰老细胞生物节律关键基因的调控作用观察

目的观察雷帕霉素对衰老细胞生物节律关键基因的调控作用。方法通过传代诱导人皮肤成纤维细胞复制性衰老,获得衰老的人皮肤成纤维细胞。加入50%的马血清刺激诱导细胞同步化,将细胞分为观察组和对照组,分别加入100 mmol/L的雷帕霉素和DMSO培养24 h。采用荧光定量PCR法检测生物节律关键基因芳烃受体核转位蛋白3(BMAL1)、节律周期蛋白2(PER2)、蓝光受体蛋白1(CRY1)、孤儿核受体α(Rev-erbα)、孤核受体α(Rorα)mRNA表达,利用JTK-CYCLE软件分析各基因的节律周期,Western blotting法检测BMAL1、PER2、CRY1蛋白表达。结果观察组PER2、CRY1、Rev-erbα、RorαmRNA表达高于对照组(P均<0.05)。对照组BMAL1、CRY1、Rev-erbα、Rorα基因的节律周期为24 h,PER2基因的节律周期为28 h。观察组BMAL1、CRY1、Rorα基因的节律周期为24 h,Rev-erbα基因的节律周期为27.5 h,PER2的节律周期为24 h。观察组CRY1蛋白表达高于对照组(P<0.05),PER2蛋白表达低于对照组(P<0.05),两组BMAL1 mRNA及蛋白表达比较无统计学差异。结论雷帕霉素可以提高衰老的人皮肤成纤维细胞生物节律关键基因BMAL1、PER2、CRY1、Rev-erbα、RorαmRNA的表达,缩短PER2的节律周期,对紊乱的节律钟功能具有调控作用。

报业活动策划成功六要素

近年来，随着媒体竞争的加剧，国内各级各类报业集团开始意识到传统经营方式已很难维系生存和跨越发展的需要，同时也意识到，活动策划已经成为报业广告经营的灵魂，一个好的策划活动往往能带来巨大的社会效益和经济效益。“活动营销”于是以市场化的运作理念、多样化的产出模式及创新的营销手段，进入报业经营者的视界，并被广泛运用于经营实践。

建立协作体的新闻资源共享机制

目的及意义长三角、珠三角的媒体繁荣与经济繁荣交相辉映,而环渤海区域媒体间联系少、沟通少,在环渤海经济繁荣的背景下,在媒体竞争日趋激烈的情况下,媒体潜力开发不到位,对媒体经营者是巨大的损失。因此,如何通过新闻资源共享,加强合作,提升报纸影响力,是环渤海媒体面临的新的重大课题。

RTK技术在1:1000地形图测绘中的应用

纵观人类发展史。最近20年,卫星定位取得惊人的发展1980年子午仪卫星的多普勒观测值的精度,广播星历为3-m。精密星历为1m,采用差分技术后相对精度为0.5m,同地面三角测量相比,多普勒测量获得了更情确、更可靠、更经济的成果。今天,采用GPS技术,在进行短边观测1小时,精度可达1cm,1地形测图技术的发展及优点地形图的测量,随着技术的发展,经历了由光学定位展点白纸测图;由全站仪定位传输到计算机自动成图的过程。

GATA6促进骨髓间充质干细胞成骨分化

目的:阐明锌指蛋白GATA6(GATA Binding Protein 6,GATA6)在骨髓间充质干细胞成骨分化作用。方法:利用基于慢病毒感染的方法建立高表达与敲低GATA6稳定的骨髓间充质干细胞系,并利用成骨诱导液进行成骨诱导,以茜素红S染色。用蛋白杂交方法检测RUNX2(Runt-related transcription factor 2,RUNX2)蛋白表达量,并利用免疫共沉淀的技术检测GATA6与RUNX2的相互作用。结果:数据表明GATA6高表达促进了骨髓间充质干细胞的成骨分化,并上调RUNX2蛋白表达量。在敲低GATA6后,RUNX2的表达量亦随之降低。免疫共沉淀检测进一步发现,GATA6与RUNX2具有相互作用。另外,GATA6在骨质疏松大鼠来源的骨髓间充质干细胞的表达量下降。结论:GATA6促进骨髓间充质干细胞成骨分化,为理解成骨作用机制提供了理论基础。

鱼骨汤氽鱼丸

原料：2000克以上的鲤鱼或草鱼一条；新鲜蔬菜（红萝卜、菠菜或生菜均可），生姜、葱、盐、料酒、淀粉、味素等辅料适量。

白藜芦醇抑制小鼠肥胖的功效及相关机制探讨

目的:研究白藜芦醇抑制高脂引起的肥胖的作用机制。方法:将18只C57小鼠随机分为3组,分别为对照组、高脂以及高脂+白藜芦醇小鼠模型,给小鼠喂养一定剂量白藜芦醇(100 mg/kg/d),喂养12周。提取小鼠皮下脂肪细胞,分化成熟,加入白藜芦醇,采用q RT-PCR以及Western blot等方法检测HO-1以及棕色脂肪标志基因的表达。通过q RT-PCR检测小鼠脂肪组织炎症因子、UCP-1以及HO-1的表达。结果:白藜芦醇在体内可以明显抑制高脂引起的肥胖,糖耐量异常,同时促进棕色脂肪标志基因UCP-1,PGC-1以及PRDM16的表达。白藜芦醇还可抑制肥胖小鼠脂肪组织炎症因子的增加以及抗炎蛋白HO-1的表达。在体外分化的成熟的皮下脂肪细胞中,白藜芦醇同样可以促进棕色脂肪标志基因UCP-1,PGC-1以及PRDM16的表达。白藜芦醇通过促进抗炎蛋白HO-1的表达抑制高脂引起的脂肪炎症反应。结论:白藜芦醇可以通过促进白色脂肪棕色化以及抑制慢性低度炎症抑制高脂引起的肥胖、糖耐量异常以及改善胰岛素敏感性。

亚麻酸对肝癌细胞HepG2节律的调控研究

目的:探讨多不饱和脂肪酸亚麻酸对肝癌细胞HepG2节律钟的影响。方法:通过50%的马血清刺激诱导HepG2细胞同步化,利用亚麻酸处理同步化后的HepG2细胞。进一步利用荧光定量PCR和western-blot检测节律钟关键基因的变化。结果:HepG2细胞经过亚麻酸处理后节律钟关键基因芳烃受体核转位蛋白3(brain and muscle Arnt-like protein-1,BMAL1)和蓝光受体蛋白1(Cryptochrome 1,CRY1)在转录水平的表达水平有所降低。与此一致的是,在蛋白质水平CRY1和BMAL1的表达同样受到亚麻酸的抑制。同时发现,CRY1的转录水平的节律周期有明显的缩短。进一步研究发现,亚麻酸对HepG2细胞的脂肪酸合成关键基因脂肪酸合酶(Fatty acid synthase,FASN)和硬脂酰辅酶A脱氢酶(Stearoyl-CoA desaturase 1,SCD1),以及免疫促炎因子白细胞介素-6(Interleukelin-6,IL-6)和白细胞介素-8(Interleukelin-8,IL-8)的mRNA的表达具有明显的抑制效应。结论:亚麻酸影响了肝癌HepG2细胞水平的节律基因的表达水平以及缩短了节律基因的周期,并且对于HepG2细胞的脂肪酸合成以及免疫促炎因子有明显的抑制效应。