呼吸重症监护室耐甲氧西林金黄色葡萄球菌分子流行病学调查

目的调查呼吸重症监护室(RICU)病房耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)来源、分子分型及药敏,并提供治疗建议。方法选取成都医学院第一附属医院RICU病房2017年1月至2020年12月从43例病人痰标本、肺泡灌洗液、血液、尿液标本等分离出的52株MRSA,统计标本来源。采用琼脂稀释法进行药敏试验;采用多位点序列分型(MLST)及SCCmec方法对其进行分型。结果超过50%MRSA分离菌株来源于呼吸系统标本,其次为血液、胸腔引流液、皮肤软组织、尿液、腹腔引流液。药敏实验显示MRSA对苯唑西林、头孢唑林完全耐药,对红霉素的耐药率高达84.62%,对克林霉素、四环素、左氧氟沙星的耐药率分别为48.08%、28.85%及32.69%。对莫西沙星、甲氧苄啶/磺胺甲噁唑、庆大霉素耐药率相对较低,分别为17.31%、13.46%及15.38%,对利奈唑胺、替加环素、替考拉宁及万古霉素均未出现耐药。52株MRSA共有13个MLST型,主要为ST59(21株)及ST5(14株);共鉴定出5种SCCmec型,主要为Ⅳ型(36株)及Ⅲ型(10株)。结论 RICU病房MRSA主要来源于呼吸系统,对常用抗生素的耐药率高,可根据分型检测结果及耐药性分布特征,指导治疗策略选择。

抗菌药物联合中药单体对泛耐药鲍曼不动杆菌生物被膜的影响

目的研究4种抗菌药物(亚胺培南、美罗培南、多黏菌素B和替加环素)和3种中药单体(黄芩苷、盐酸小檗碱和槲皮素二水物)对泛耐药鲍曼不动杆菌(XDRAB)生物被膜形成能力的影响,并探讨以上组合用药对XDRAB的协同抗生物被膜效应。方法收集2018—2019年成都医学院第一附属医院的不同科室的临床标本分离的9株XDRAB,采用比浊法测定4种抗菌药物、3种中药单体在1 MIC、1/2 MIC、1/4 MIC、1/8 MIC、1/16 MIC对9株XDRAB 24 h内的生长情况;结晶紫棋盘染色法检测工作浓度下亚胺培南、美罗培南、替加环素、多黏菌素B、黄芩苷、盐酸小檗碱和槲皮素二水物单用对生物被膜的抑制作用和组合联用的协同抗生物被膜效应。结果亚胺培南(4μg/mL)、美罗培南(2μg/mL)、多黏菌素B(0.25μg/mL)、替加环素(0.0625μg/mL)、黄芩苷(128μg/mL)、盐酸小檗碱(32μg/mL)、槲皮素二水物(64μg/mL)的浓度时24 h内不抑制细菌的生长,以此浓度为基础倍比稀释,设置高、中、低三个浓度梯度;与模型对照组相比,4种抗菌药物、3种中药单体、在高浓度下单用、联用均可以明显抑制XDRAB生物被膜的形成(P<0.05),联合用药效果均优于单独用药(P<0.05),表现为不同程度的协同抗生物被膜作用,其中替加环素与黄芩苷的9个浓度组合均能够显著抑制XDRAB生物被膜的形成,0.015625μg/mL替加环素与32μg/mL黄芩苷与的浓度组合下,药物剂量最小。结论4种抗菌药物亚胺培南、美罗培南、多黏菌素B、替加环素,3种中药单体黄芩苷、槲皮素二水物、盐酸小檗碱单用及联用时对XDRAB的生物被膜形成均具有不同程度的抑制作用,联合用药均表现为不同程度的协同抗生物被膜效应。

泛耐药鲍曼不动杆菌生物被膜形成能力与同源性分析

目的研究泛耐药鲍曼不动杆菌(XDRAB)的同源性及其生物被膜的形成能力,为临床防控感染提供依据。方法收集成都医学院第一附属医院2018年1月—2020年7月XDRAB 37株,采用微量肉汤稀释法测定16种抗菌药物对37株XDRAB的最低抑菌浓度(MIC),结晶紫染色法检测生物被膜的形成能力,运用多位点序列分型方法(MLST)和肠杆细菌基因间重复共有序列聚合酶链反应(ERIC-PCR)对37株XDRAB进行分型检测。结果 37株XDRAB仅对多粘菌素类、替加环素敏感,其余抗菌药物均耐药。生物被膜形成能力与阴性对照组比较,81%以上XDRAB均形成生物被膜。MLST分型结果:37株XDRAB均属于国际克隆组IC2的克隆复合体(CC92),其中34株为ST208,其次为ST195和ST368。ERIC-PCR分型结果:37株XDRAB分为两种类型,其中Ⅰ型22株,Ⅱ型15株。结论临床分离的XDRAB生物被膜形成能力强,CC92为XDRAB院内感染流行的主要克隆复合体,MLST与ERIC-PCR可作为XDRAB同源性分析的有效方法。

中药单体与抗菌药物联合应用对抗泛耐药鲍曼不动杆菌的作用

目的超级细菌-泛耐药鲍曼不动杆菌(PDR-AB)造成的公共卫生安全问题是当前全世界共同面临的挑战。本文研究中药单体槲皮素二水物、盐酸小檗碱、黄芩苷对PDR-AB生物被膜形成能力及粘附作用的影响,探讨中药单体与四种抗菌药物(亚胺培南、美罗培南、替加环素、多粘菌素)联合应用对抗PDR-AB的协同效应。方法应用微量肉汤稀释法检测三种中药单体对9株临床PDR-AB的最低抑菌浓度(MIC),采用96孔细胞培养板和导尿管模型并结合结晶紫染色法检测三种中药单体对PDR-AB生物被膜形成能力的影响,构建导尿管模型并结合平板菌落计数法测定三种中药单体对PDR-AB黏附能力的影响,应用微量棋盘稀释法检测三种中药单体分别与四种抗菌药物联合应用的协同效应。结果①三种中药单体对PDR-AB MIC分别为512,512,1024 mg·L^-1。②三种中药单体分别在64,32,128 mg·L^-1的亚抑菌浓度下抑制PDR-AB的生物被膜的形成以及对医用材料导尿管的粘附。③槲皮素二水物、盐酸小檗碱、黄芩苷三种中药单体分别与亚胺培南联用时78%,89%,78%表现为协同作用,亚胺培南的MIC值从64 mg·L^-1下调到8 mg·L^-1;与美罗培南联用时89%,89%,56%表现为协同作用,MIC值从32 mg·L^-1下调到4 mg·L^-1;与替加环素联用时56%,22%,100%表现为协同作用,MIC值从1 mg·L^-1下调到0.25 mg·L^-1;与多粘菌素B联用时100%表现为拮抗作用,22%表现为协同作用,33%为拮抗作用。结论在亚抑菌浓度下三种中药单体均能抑制PDR-AB生物被膜的形成能力以及对医用材料的黏附,而且三种中药单体与亚胺培南、美罗培南、替加环素联用后对PDR-AB的抗菌活性有不同程度的协同作用,尤其是黄芩苷与替加环素联用时表现出显著的抗菌协同效应,这对PDR-AB感染的防治提供新的治疗思路。

抗生物被膜感染药物研究进展

细菌生物被膜是指粘附在细胞或有机物质表面并被自身产生的胞外基质包裹所形成的聚合微生物群落,可以抵抗抗菌药物和宿主免疫系统的杀伤,是导致慢性感染的重要原因。本文对细菌生物被膜的形成与抗生物被膜感染药物研究进展进行综述,以期为临床的抗感染治疗提供参考。

中药单体与抗菌药物联合应用对抗泛耐药鲍曼不动杆菌的作用研究

目的:研究中药单体槲皮素二水物、盐酸小檗碱、黄芩苷3种中药单体对泛耐药鲍曼不动杆菌(XDRAB)生物被膜形成能力及粘附作用的影响,并探讨以上3种中药单体分别与4种特殊使用级抗菌药物(亚胺培南、美罗培南、替加环素、多粘菌素)联合应用对抗XDRAB的协同效应。方法:应用微量肉汤稀释法检测槲皮素二水物、盐酸小檗碱、黄芩苷3种中药单体和15种抗菌药物对9株XDRAB的最低抑菌浓度(MIC),结晶紫染色法和平板菌落计数法检测3种中药单体对XDRAB生物被膜形成能力和粘附能力的影响,微量棋盘稀释法检测中药单体槲皮素二水物、盐酸小檗碱、黄芩苷分别与亚胺培南、美罗培南、替加环素、多粘菌素B联合应用的协同抗菌效应。结果:槲皮素二水物、盐酸小檗碱、黄芩苷对XDRAB的MIC分别为512μg/ml、256μg/ml、1024μg/ml,除多粘菌素B和替加环素以外,9株XDRAB对13种抗菌药物均耐药;槲皮素二水物、盐酸小檗碱、黄芩苷分别在64μg/ml、32μg/ml、128μg/ml的浓度下抑制XDRAB生物被膜的形成以及对导尿管的粘附。与模型对照组相比,3种中药单体分别与亚胺培南、美罗培南、替加环素联用时,中药单体与抗菌药物的MIC均下降,表现为不同程度的协同作用。结论:槲皮素二水物、盐酸小檗碱、黄芩苷3种中药单体不仅能抑制XDRAB生物被膜的形成能以及对医用材料的粘附,而且与分别与亚胺培南、美罗培南、替加环素联用后对XDRAB的抗菌活性有不同程度的协同作用。