基于PI3K/AKT通路研究升降通癃方对前列腺增生细胞的影响

目的:研究升降通癃方通过调节磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/丝氧酸-苏氨酸蛋白激酶(AKT)信号通路对前列腺增生细胞增殖和凋亡的影响。方法:培养人前列腺增生细胞(BPH-1),随机分为对照组、升降通癃方低、中、高浓度组、阳性组五组,分别给予各组需要的药物处理24 h后,通过四唑盐比色法(CCK8法)检测药物对BPH-1细胞增殖的影响;用细胞划痕实验测定BPH-1的水平迁移能力;通过流式细胞术(FCM)检测升降通癃方对BPH-1细胞细胞凋亡的影响;通过蛋白质印迹法(Western blot)检测药物对细胞中半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)、Bcl-2关联X蛋白(Bax)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、丝氧酸-苏氨酸蛋白激酶(AKT)、重组人α晶状体球蛋白B(Cryab)蛋白表达的影响。结果:加入升降通癃方后,BPH-1的迁移能力明显受到抑制,升降通癃方高、中、低浓度组比较差异有统计学意义(均P<0.05);FCM检测结果显示,升降通癃方组低、中、高浓度组的细胞凋亡率明显高于对照组,差异具有统计学意义(均P<0.05)。Western blot检测结果显示,升降通癃方处理24 h后,Caspase-3和Bax在BPH-1细胞中表达较高,Bcl-2、PI3K、AKT、Cryab在BPH-1细胞中表达较低,细胞凋亡率升高。结论:升降通癃方能在一定程度上抑制前列腺增生细胞的增殖、迁移并促进其凋亡,其作用机制可能是升降通癃方通过降低Cryab蛋白表达,负性调控PI3K/AKT信号通路而完成的。

升降通癃方中空栓对前列腺增生大鼠模型的影响

目的探讨升降通隆方中空栓对前列腺增生大鼠模型的影响。方法将70只雄性SD大鼠随机分为假手术对照组、模型组、非那雄胺阳性组、升降通癃方中空栓高、中、低剂量组、升降通隆方溶液灌胃组,每组10只,除假手术组外,其余各组均经去势后皮下注射丙酸睾丸酮复制良性前列腺增生(benign prostatic hyperplasia,BPH)大鼠模型,连续给药28天。计算前列腺指数,观察苏木精-伊红染色法(hematoxylin-eosin staining,HE)染色前列腺组织形态变化,采用酶联免疫法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)测定血清和前列腺中睾酮(testosterone,T)、雌二醇(estradiol,E2)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的水平。结果模型组较假手术组大鼠前列腺湿质量、指数明显上升(P<0.05),光镜下前列腺上皮细胞有显著的增生褶皱,模型复制成功;与模型组比,阳性组与高剂量组大鼠前列腺湿质量与指数均明显下降(P<0.05),中剂量组与灌胃组大鼠前列腺指数下降(P<0.05),各给药组大鼠前列腺和血清中T水平明显上升(P<0.05),E2与VEGF水平明显下降(P<0.05);与低剂量组比,高剂量组大鼠前列腺湿质量与指数均明显下降(P<0.05),高剂量组与中剂量组大鼠前列腺T水平明显上升(P<0.05),E2水平明显下降(P<0.05),高剂量组大鼠血清中T水平和VEGF水平明显上升(P<0.05);与灌胃组比,中剂量组大鼠前列腺湿质量与指数差异不明显(P>0.05),大鼠前列腺和血清中T与VEGF的水平差异影响不明显(P>0.05),中剂量组大鼠前列腺E2的水平明显下降(P<0.05)。结论升降通隆方中空栓纳肛直肠给药对去势大鼠前列腺增生具有良好的疗效,具有一定药效效应,升降通隆方中空栓高剂量药效更佳,且较灌胃给药治疗良性前列腺增生大鼠的药效相近,甚至更佳。

黄汗病验案1则

黄汗病是指因营卫不畅,或外感湿热之邪郁蒸所致,临床以汗出色黄、染衣等为特征的汗病[1]。本病以“汗出,色正黄,如柏汁”的临床特征而得名,其作为病名,首见于张仲景所著的《金匮要略·水气病脉证并治第十四》:“黄汗,其脉沉迟,身发热,胸满,四肢头面肿,久不愈,必致痈脓”[2]。现代医学认为,本病应是一种汗腺的炎症,是由一类带黄色或能产生黄色素的细菌侵入汗腺所致,也可见于肝胆疾病、溶血性疾病、感染性疾病以及某些药物反应(如利福平、核黄素等),目前尚无特效疗法[3],临床上可选用阿托品、颠茄合剂等抗胆碱药物以抑制汗腺泌汗,或选用药物局部擦拭或外敷,短期内可能获效[4]。

基于PI3K/Akt信号通路研究升降通癃方中空栓对前列腺增生大鼠的影响

目的:通过观察升降通癃方中空栓对前列腺增生大鼠前列腺中双氢睾酮(DHT)的水平、及前列腺中磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路相关蛋白的影响,探究升降通癃方中空栓治疗前列腺增生大鼠的机制。方法:从60只SD雄性大鼠中随机选取10只为假手术组,其余大鼠经去势后连续4周皮下注射丙酸睾丸酮造前列腺增生大鼠模型,采用随机数字表法随机分为模型组、非那雄胺(0.45 mg·kg^(-1))组、升降通癃方中空栓高、中、低剂量(3.98、1.99、0.99 g·kg^(-1))组,每组10只。去势7 d后,假手术组及模型组选用空白中空栓、非那雄胺组及升降通癃方中空栓组选用相应中空栓,连续肛塞直肠给药28 d。杀检大鼠,分离并称量前列腺组织,观察药物对各组大鼠前列腺指数的影响,苏木素-伊红(HE)染色前列腺组织进行病理观察,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测DHT的水平,并采用蛋白免疫印迹法检测前列腺组织PI3K/Akt信号通路蛋白及B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、胱天蛋白酶-3(Caspase-3)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、αB-晶状体蛋白(CRYAB)蛋白表达水平。结果:与假手术组比较,模型组大鼠前列腺指数显著升高,光镜下模型组大鼠前列腺明显增生,DHT水平明显升高,CRYAB、Bcl-2、PI3K及Akt蛋白表达水平上升,Caspase-3及Bax蛋白表达水平下降(P<0.05,P<0.01)。与模型组比较,升降通癃方中空栓高剂量组大鼠前列腺指数下降(P<0.05),升降通癃方中空栓各剂量组大鼠前列腺中DHT水平、CRYAB、Bcl-2、PI3K及Akt蛋白表达水平下降,Caspase-3及Bax蛋白表达水平上升(P<0.05,P<0.01)。结论:升降通癃方中空栓可通过降低CRYAB蛋白表达,负性调控PI3K/Akt信号通路,下调DHT水平,Bcl-2、PI3K及Akt蛋白表达水平,上调Caspase-3及Bax蛋白表达水平,抑制细胞增殖和促进细胞凋亡,从而发挥对BPH的治疗作用;高剂量升降通癃方中空栓改善大鼠前列腺增生效果显著。