骨髓间充质干细胞向神经元的诱导分化

目的 :探讨大鼠骨髓间充质干细胞 ( rat mesenchymal stem cells,r MSCs)体外诱导分化成神经元的能力。方法 :用 0 .2 5、0 .5、1 .0 mmol· L-1IBMX诱导传代的 r MSCs,待细胞分化后进行形态学观察 ,并用免疫细胞化学方法进行细胞鉴定。结果 :0 .5 mmol· L-1IBMX诱导细胞效果最好 ,2 d即可见有神经元样细胞出现 ,6d神经元样细胞占细胞总数的 ( 2 3.2± 2 .3) %,NSE染色阳性。未分化细胞表达 nestin,诱导 3d,阳性细胞增多 ,6d减少。结论 :体外 r MSC能扩增、传代 。

向神经细胞分化的骨髓间充质干细胞在中枢神经系统疾病治疗中的应用

近年来发现 ,骨髓间充质干细胞 ( MSCs)不但能分化成骨、软骨、脂肪等中胚层起源的细胞 ,而且能分化成神经元和神经胶质细胞等外胚层起源的细胞。许多学者将 MSCs移植进一些中枢神经系统疾病动物模型中 ,如 :遗传性脱髓鞘性神经病、脑卒中、脑外伤等 ,获得一些疗效 ,为中枢神经系统 ( CNS)疾病的治疗探索一条新途径。这些研究表明 MSCs是细胞治疗和基因治疗 CNS疾病的种子细胞之一 。

干细胞培养物对重度豚鼠皮肤缺损疗效观察

[目的 ]探讨采用培养干细胞移植治疗重度皮肤缺损。 [方法 ]将豚鼠随机分为干细胞治疗组 ,培养液对照组和空白对照组。取骨髓组织干细胞 ,经特殊培养方法培养后 ,用于重度缺损的异体豚鼠皮肤创面上 ,以平均愈合时间和平均愈合速度为指标 ,观察各组动物损伤皮肤的修复情况。 [结果 ]干细胞培养物组皮肤修复速度为 (4 0 .4 2± 2 .1 4 )mm2 /d ,平均愈合时间为 (1 2 .4 5± 2 .1 8)d ,明显高于对照组 ,且组织结构完整、瘢痕小。经统计学处理干细胞组与对照组相比差异显著 (P <0 0 5 )。 [结论 ]利用同种异体动物干细胞培养物进行皮肤损伤的治疗有明显的效果 ,为创伤修复。

氯化镉对大鼠肾上腺嗜铬瘤细胞PC12增殖与分化的影响

目的研究不同浓度氯化镉对鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(PC12)增值和神经生长因子(NGF)诱导下PC12细胞分化的影响。方法①采用MTT比色微量分析,观察不同浓度的氯化镉对PC12细胞增值影响。②采用形态学方法,观察不同浓度的氯化镉对NGF诱导的PC12细胞分化的影响。结果不同浓度的镉对PC12细胞的增值有明显的抑制作用,存在剂量效应关系。不同浓度的氯化镉、不同作用时间对NGF诱导的PC12细胞分化无明显影响。结论氯化镉对PC12细胞的增值有抑制作用,而对NGF诱导的PC12细胞的分化无显著的影响。

分泌型rhGM-CSF/IL-2融合蛋白表达载体的构建

目的 将GM-CSF基因与IL-2基因通过一中间接头G-G-G-S-G-G-S-G连接到一起,并在E.coli中分泌表达具有更高GM-CSF和IL-2生物活性的融合蛋白分子。方法 在引物设计中,通过选择密码子,在Linker的中前部设计了一个BamHI酶切位点,GM-CSF的下游引物和IL-2的上游引物均起始于该位点。然后通过PCR、酶切、连接等一系列分子克隆的方法,构建融合蛋白的克隆及表达载体。结果 经EcoRI/SaII双酶切鉴定,克隆载体pUC19GM-CSF/L/IL-2及表达载体pBVGMCSF/L/IL-2中均插入了正确的外源片段。结论 克隆及表达载体的成功构建,为进一步表达融合蛋白及活性研究打下了基础。