灰树花生理成熟期到出菇期生理生化初探

为较全面地了解灰树花生理后熟期及其以后的生理生化变化,进行温度差、pH值、菌料单位面积压力、含水量、失质量、羧甲基纤维素酶活性、滤纸纤维素酶活性、淀粉酶活性、半纤维素酶活性、胞外水溶性糖含量、胞外水溶性蛋白含量的研究。结果表明,不同指标变化趋势不完全相同,同一指标不同时期变化也不完全相同。菌料单位面积压力在生理成熟期不断升高到一定水平,在出菇期的原基形成时明显升高,达到最大值后不断降低;羧甲基纤维素酶活性在生理成熟期降低到稳定值,在出菇期明显升高,原基形成后不断降低;胞外可溶性蛋白含量在生理成熟期不断升高到一定水平,在出菇期菌丝恢复时降低,后又升高到稳定水平。pH值和漆酶相关酶与原基形成有一定正相关,这对灰树花原基形成研究具有积极意义,同时为灰树花栽培过程中的生理成熟期及出菇管理提供理论依据。

大豆Kti基因ihpRNA种子特异性表达载体的构建及转化

大豆Kunitz型胰蛋白酶抑制剂(trypsin inhibitor,Kti)是大豆品质的主要营养抑制因子之一,培育低Kti含量的大豆品种是提升大豆品质的关键。本研究采用RT-PCR技术克隆得到大豆Kti基因的核心保守序列,并构建成种子特异性表达的、具有Kti基因反向重复结构的RNAi载体,利用农杆菌介导法侵染大豆品种吉林30子叶节,通过潮霉素筛选和PCR检测,获得4株转基因阳性植株。RT-PCR检测表明,构建的种子特异性RNAi载体可以在转基因植株的种子中特异表达,且Kti基因表达量均有降低;通过胰蛋白酶抑制剂活性检测发现,转基因大豆籽粒中胰蛋白酶抑制剂活性平均降低了77.5%。为进一步评价RNAi技术对大豆Kti基因的表达调控效果奠定良好基础。

野生大革耳的生物学特性及驯化栽培

以采自黑龙江胜山国家级自然保护区野生大革耳(Pleurotus giganteus)为试材,通过正交实验对其生物学特性和驯化栽培进行了初步研究。结果表明:大革耳菌丝的最适生长条件为pH 7.0,最适生长温度为25℃,最适碳源为糊精,最适氮源为蛋白胨,这为大革耳的进一步开发利用提供了支持。

松软毡被孔菌生物学特性及驯化栽培

松软毡被孔菌是一种可产漆酶的多孔菌,漆酶可用于废水处理、降解有毒物质等,因此对采自黑龙江胜山国家级自然保护区的松软毡被孔菌进行生物学特性的研究,可为漆酶的开发、生产提供基础数据。根据野外采集的标本和出菇子实体形态学特性的分析和分子生物学(ITS,rDNA)比较研究,通过形态学观察和分子工具辅助鉴定,确定为松软毡被孔菌。同时对其适宜碳源、氮源、pH和温度进行初步研究,研究表明适合松软毡被孔菌生长适宜条件:碳源为葡萄糖、唯一氮源为酵母浸粉、温度为30℃、pH值为8.0。松软毡被孔菌可在人工培养基上(培养料配方:78%阔叶树木屑,20%麸皮,1%石膏,1%蔗糖)形成子实体。本研究结果为漆酶的开发研究、药理活性研究提供理论依据。

毡毛栓孔菌生物学特性及驯化栽培初探

为优化中国种质资源对采自辽宁省建昌县白狼山国家级自然保护区的毡毛栓孔菌(Trametes velutina)子实体进行菌种分离得到纯菌种作为实验材料,采用十字划线法研究不同碳源、氮源、pH值和温度在培养皿培养条件下对毡毛栓孔菌菌丝生长的影响,对以上4个因素进行单因素试验,从中选出3个最优的水平进行正交试验,制作液体种测定酶活性,并成功进行驯化栽培。结果表明:试验范围内毡毛栓孔菌的最适生长温度为30℃;灭菌后最适pH值为5;最适碳源为葡萄糖;最适氮源为酵母浸粉。随后通过正交试验得出4个因素对毡毛栓孔菌的影响程度为:温度>碳源>(pH=氮源),且正交试验得到的毡毛栓孔菌菌丝最适生长条件与各单因素试验结果一致。毡毛栓孔菌漆酶活性最高达74.01 U/L、锰过氧化物酶活性最高达14.79 U/L。驯化栽培试验中培养料配方为:阔叶树木屑78%、麦麸20%、石灰粉1%、石膏1%、调节含水量在60%左右。在85%~90%空气湿度、一定散射光、20℃~22℃下培养15 d现菇蕾,20 d后出现原基,加大空气湿度至95%~96%并保持温度培养30~35 d后子实体成熟。

香菇^(60)Co-γ辐照突变菌株的筛选

以香菇栽培菌株"庆20"作为诱变材料,分别利用0.4、0.6、0.8kGy 3种辐射剂量,剂量率为10Gy·min^(-1)的^(60)Co-γ射线对香菇菌株进行物理诱变,以不辐射处理为对照,研究了不同辐射剂量对香菇菌株诱变率和致死率的影响,将诱变菌株与对照菌株进行拮抗试验和SSR分子鉴定,并对突变菌株对纤维素和半纤维素的利用能力进行筛选,以期筛选出能更好的利用秸秆作为栽培基质的香菇栽培菌株。结果表明:辐射剂量为0.4kGy时,所有菌株致死率为0,0.6kGy时致死率为46.7%,0.8kGy时致死率达到100%。经过拮抗试验和SSR分子标记的筛选,得到6株符合要求突变菌株。