制造企业数字化转型能力成熟度等级划分研究

制造企业数字化能力成熟度等级划分是判断数字化转型能力成熟度重要环节。为确定当前制造企业数字化转型能力成熟度评价覆盖维度,采用文献搜查法、专家调查法分析并提出一套适合当前制造企业数字化转型能力成熟度指标体系,根据具体指标对制造企业的数字化转型能力成熟度等级划分进行研究。

中医温针灸联合Bobath康复疗法对脑卒中患者步态稳定性的影响

目的:探究中医温针灸联合Bobath康复疗法对脑卒中患者步态稳定性的影响。方法:回顾性分析福州市经济技术开发区医院2018年1月-2020年6月期间收治的80例脑卒中患者的临床资料。以治疗方案的不同作为分组依据,将仅应用Bobath康复疗法治疗的40例患者作为参照组,在参照组基础上加用温针灸治疗的40例患者作为研究组。记录两组踝关节内翻角度、Berg平衡量表评分与Holden步行功能分级变化情况。结果:治疗后,两组足内翻角度均低于治疗前,Berg平衡量表评分高于治疗前,且研究组足内翻角度低于、Berg平衡量表评分高于参照组(P<0.05)。治疗后,两组0级、Ⅰ级、Ⅱ级与Ⅲ级例数的差异无统计学意义(P>0.05),研究组Ⅳ级、Ⅴ级例数多于参照组(P<0.05)。结论:脑卒中患者接受中医温针灸联合Bobath康复疗法治疗可改善踝关节内翻角度,并提高平衡能力与步态稳定性。

牛分枝杆菌Mb0869c抑制外源性细胞凋亡的研究

为探究与人受体相互作用蛋白激酶1 (RIPK1)存在互作的牛分枝杆菌(M.bovis) Mb0869c蛋白对细胞凋亡的作用机制,本研究通过PCR从M.bovis DNA中扩增Mb0869c基因片段后构建重组质粒p MN437-Mb0869c并经PCR和测序鉴定正确后,利用电转化法将重组质粒电转入耻垢分枝杆菌(MS)中,并经western blot鉴定Mb0869c蛋白的表达情况。结果显示,重组菌株中出现约55 ku的特异性条带,表明获得了表达Mb0869c的重组菌MS_Mb0869c。将MS_Mb0869c株和对照菌株MS_Vec分别感染人单核巨噬细胞(THP-1),通过PI和AnnexinⅤ/FITC染色,经流式细胞仪检测细胞的凋亡情况,结果显示,MS_Mb0869c感染细胞的凋亡率显著低于MS_Vec感染组,这表明Mb0869c可以抑制MS诱导的细胞凋亡。将上述获得的Mb0869c基因片段克隆于p LVX-IRES-Puro-3×Flag中,构建的重组质粒经测序鉴定正确后,转染HEK293T细胞中,利用嘌呤霉素筛选表达Mb0869c的细胞并经western blot鉴定。结果显示,构建的HEK293T细胞中出现约55 ku的特异性条带,且随着细胞传代次数的增加,蛋白表达量未减少,这表明稳定表达Mb0869c的细胞系HEK293T/Mb0869c正确构建。利用不同浓度的肿瘤坏死因子α (TNF-α)和IAP抑制剂(SM164)作用于HEK293T细胞,通过检测细胞内ATP的含量确定细胞凋亡发生情况。结果显示,100 ng/mL TNF-α和25 nmol/L SM164在作用细胞24 h后,诱导细胞凋亡的效果最佳。以该浓度分别作用于HEK293T/Mb0869c和对照组HEK293T/Con细胞24 h后,统计细胞的存活率。结果显示前者的存活率极显著高于后者(P<0.01),表明Mb0869c能够抑制细胞凋亡。通过PCR扩增人RIPK1的3个结构域片段,并分别克隆至p CMV-Myc中构建真核表达重组质粒并经菌落PCR和测序鉴定正确后分别转染HEK293T/Mb0869c细胞,通过免疫共沉淀法(Co-IP)检测RIPK1结构域与Mb0869c的互作。结果显示Mb0869c和RIPK1的激酶结构域(KD)和中间结构域(ID)存在相互作用。上述结果表明,Mb0869c蛋白在M.bovis抑制细胞凋亡中具有重要的作用,且这种抑制作用是通过RIPK1实现的。本研究为M.bovis蛋白通过RIPK1调节细胞凋亡作用机制的研究提供实验依据。

平衡针灸治疗原发性高血压的临床效果和安全性评价

目的研究探讨平衡针灸治疗原发性高血压的临床效果和安全性。方法选择2015年1月至2018年1月福州市马尾区医院60例原发性高血压患者,按照随机数字表法进行随机分组,对照组、观察组各30例,对照组、观察组分别实施常规药物治疗、常规药物治疗+平衡针灸治疗,两组就临床疗效、血压水平、血脂水平、不良反应发生率作比较。结果 (1)临床总有效率观察组93.33%较对照组更高(P<0.05)。(2)两组治疗后的SBP、DBP、TC、TG均较治疗前降低(P<0.05),而治疗后观察组的SBP、DBP、TC、TG均低于对照组(P<0.05)。(3)不良反应发生率在组间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论平衡针灸用于原发性高血压治疗中可提高患者的血压控制效果,降低其血脂水平,具有良好的临床疗效,且不良反应少,具有良好的安全性。

结核分枝杆菌诱导IFN-β产生在免疫调控中的作用

结核分枝杆菌是导致结核病的病原体,也是影响全球数百万人健康的病原体之一。机体中多种模式识别受体(pattern recognition receptor,PRR)可识别入侵的结核分枝杆菌,如DNA和RNA传感器,从而激活天然免疫系统并诱导干扰素-β(interferon-β,IFN-β)产生。虽然IFN-β是先天抗病毒应答的主要效应因子,但其在结核分枝杆菌感染中的作用仍具有争议。结核分枝杆菌感染诱导的IFN-β产生可以促进细菌生长,并增强细菌在宿主中的存活率,但用IFN-β处理细胞后再感染结核分枝杆菌,则可增强抗菌作用,保护宿主。因此,本综述将重点关注可识别结核分枝杆菌并诱导的IFN-β产生的PRR及其下游信号通路,并着重探讨IFN-β在介导结核分枝杆菌调控免疫功能中的作用,尤其是IFN-β与IL-1β之间的相互抑制性调节,旨在为进一步揭示结核分枝杆菌致病机制及结核病治疗药物研发提供新思路。

稳定表达牛分枝杆菌PPE13的THP-1细胞株的建立

为了深入研究牛分枝杆菌PPE13在病原-宿主相互作用中的具体机制,本研究利用慢病毒表达系统构建了PPE13稳定表达的THP-1细胞系。首先,采用分子克隆技术,以牛分枝杆菌基因组DNA为模板扩增出ppe13目的片段,构建含有ppe13片段的重组慢病毒表达质粒,将该质粒和慢病毒包装质粒转染至239T细胞中,72 h后收集病毒。然后,将获得的病毒感染THP-1细胞中,经1μg/mL嘌呤霉素筛选获得稳定表达PPE13的细胞株THP-1/PPE13。最后,使用ELISA方法检测稳定表达细胞系中TNF-α、IL-1β和IL-6分泌的情况,以验证细胞系中PPE13的生物学活性。结果显示,相较于对照细胞THP-1/Con,THP-1/PPE13中TNF-α、IL-1β和IL-6的分泌水平均显著升高。该细胞系的建立为深入研究PPE13调控细胞信号通路的功能提供了实验基础。

针灸治疗心肾不交型失眠症的临床随机对照研究

目的:探讨针灸治疗心肾不交型失眠症的效果。方法:本研究诊断标准参考《中国精神障碍分类和诊断标准》,60例心肾不交型失眠症患者纳入本组研究,收集病例时间为2016年3月到2018年3月,随机分组,各组为30例,对照组单纯服用黄连阿胶汤治疗。观察组在对照组黄连阿胶汤的前提下,联合采用针灸法进行治疗,比较两组患者的中医症候改善效果、匹兹堡睡眠指数 (PSQI)、生活质量、焦虑量表评分(HAMA)、抑郁量表评分(HAMD)。结果:(1)观察组中医症候改善有效率(93.33%)明显更高,与对照组中医症候改善有效率(66.67%)比较,P<0.05。(2)和治疗前对比,观察组治疗后1周、2周、4周匹兹堡睡眠指数明显降低,P<0.05;和对照组治疗后对比,观察组治疗后1周(13.83±3.51)、2周(10.32±1.83)、4周(3.82±0.58)匹兹堡睡眠指数更低,P<0.05。(3)观察组治疗后生活质量评分明显高于对照组,P<0.05;观察组治疗后生活质量评分明显高于治疗前,P<0.05。(4)和治疗前对比,观察组治疗后1周、2周、4周焦虑量表评分明显降低,P<0.05;和对照组治疗后对比,观察组治疗后1周(22.56±3.32)、2周(18.15±1.82)、4周(5.82±0.12)焦虑量表评分更低,P<0.05。(5)和治疗前对比,观察组治疗后1周、2周、4周抑郁量表评分明显降低,P<0.05;和对照组治疗后对比,观察组治疗后1周(21.65±4.65)、2周(15.51±1.99)、4周(6.99±0.32)抑郁量表评分更低,P<0.05。结论:针灸治疗心肾不交型失眠症能够更有效地改善患者的失眠状态,有利于改善生活质量。

利用酵母双杂交系统筛选与人RIPK1互作的牛分枝杆菌蛋白

为探索牛分枝杆菌通过RIPK1来调节细胞凋亡的作用机制,本试验利用分子克隆技术构建诱饵质粒pGBKT7-RIPK1,并通过PEG/LiAc转化法将该质粒转入酵母菌中,经Western blot验证RIPK1在酵母菌中的表达情况后,使用该重组酵母菌筛选牛分枝杆菌基因组文库;筛选所得阳性克隆经互补验证、测序分析以及免疫共沉淀法,最终确定可与RIPK1互相作用的牛分枝杆菌蛋白。结果表明,成功构建诱饵质粒pGBKT7-RIPK1,该诱饵质粒可在酵母菌中表达RIPK1蛋白;用该酵母菌筛选牛分枝杆菌基因组文库共获得16个阳性克隆;这些阳性克隆经互补验证、测序和BLAST对比后共发现翻译正确的7个牛分枝杆菌蛋白;分别构建RIPK1和牛分枝杆菌候选蛋白的真核表达载体,经免疫共沉淀验证后发现可与RIPK1互作的3个牛分枝杆菌蛋白,分别为Mb0869c、Mb0383c和Mb2314,本研究为进一步研究牛分枝杆菌通过RIPK1调节细胞凋亡的作用机制提供数据支持。

可诱导表达结核分枝杆菌ESAT-6的THP-1细胞系的建立

利用Tet-On-3G系统构建可诱导表达ESAT-6的THP-1细胞系,研究结核分枝杆菌毒力蛋白ESAT-6在宿主细胞内的生物学功能。首先,利用聚合酶链反应(PCR)扩增ESAT-6片段和红色荧光蛋白mCherry片段,并与pLVX-TRE3G载体连接,构建pTRE3G-mCherry-ESAT-6。将其与调控质粒pLVX-Tet3G共同转染HEK293T细胞,Dox诱导后检测ESAT-6表达情况。然后,将质粒pTRE3G-mCherry-ESAT-6和pLVX-Tet3G分别与包装质粒psPAX2和pMD2.0G共转染HEK293T细胞,以获得慢病毒颗粒LV-TRE3G-ESAT-6和LVX-Tet3G。接着,将2种病毒感染THP-1细胞,通过Puromycin和G418进行筛选诱导表达ESAT-6的阳性细胞克隆,命名为THP-1/ESAT-6。利用Western blot检测THP-1细胞中ESAT-6的表达情况。结果表明,筛选获得了携带ESAT-6的THP-1诱导表达细胞系,并且ESAT-6表达量与Dox剂量和诱导时间呈正相关。最后,对细胞系中表达的ESAT-6进行生物活性检测,结果表明ESAT-6能够促进细胞的死亡和IL-1β的分泌。该细胞系的建立为深入研究ESAT-6调控细胞信号通路的功能提供了基础。