骨髓间充质干细胞在脑缺血模型大鼠脑组织中的迁徙、定居及组织修复作用

目的观察骨髓间充质干细胞(MSCs)移植后,在缺血性脑损伤大鼠脑组织中的迁徙、定居及组织修复作用。方法体外分离、纯化及培养MSCs。线栓法制备Wester大鼠脑缺血模型,经颈动脉移植DAPI标记的MSCs,通过激光共聚焦显微镜,分别在24h、5d及10d观察MSCs在脑组织内的迁徙及定居。采用三苯四氮唑活组织脑片染色方法,观察MSCs治疗对脑组织损伤的修复作用。结果MSCs经颈动脉移植后,在24h即出现在脑损伤区域血管内,第5天在血管周围组织内开始弥散,第10天在损伤区域可见广泛弥散。MSCs治疗20d后,脑片染色显示坏死区域减少。结论动脉移植MSCs后,MSCs首先出现在大鼠缺血性脑损伤区域血管内,然后在周围组织弥散,并可能参与损伤区血管及组织的修复。

缺血后处理对短暂性脑缺血后蛋白质氧化损伤的影响

目的探讨后处理对短暂性脑缺血后脑损伤及氧化应激性蛋白质损伤的影响。方法大鼠MCAO局灶脑缺血再灌注模型,分为假手术组,缺血组及后处理组。缺血后处理方法为缺血结束后恢复脑血流30 s再阻断30 s为1个循环,共3个循环。采用TTC染色计算梗死脑组织的体积。差速离心法分离线粒体。荧光测定法检测线粒体内过氧化氢含量。分光光度计法检测蛋白质氧化产物羰基化合物含量。结果缺血后处理显著降低了局灶脑缺血后脑梗死的体积;线粒体内过氧化氢的含量显著降低;蛋白质氧化产物羰基化合物的含量显著降低。结论缺血后处理能够通过降低氧化应激性蛋白质损伤保护缺血再灌注所致的脑损伤。

蛋白酶体抑制剂Bortezomib对人脑胶质瘤增殖抑制及诱导凋亡作用

目的探讨Bortezomib对体外SHG-44胶质瘤细胞株形态的影响及诱导凋亡作用。方法Bortezomib体外处理培养的SHG-44胶质瘤细胞后,采用MTT法检测细胞增殖、HE染色光镜观察、Hochest33342染色荧光显微镜观察以及锇铀铅染色透射电镜观察胶质瘤细胞的形态变化,流式细胞术分析细胞凋亡率及细胞周期。结果MTT显示Bortezomib抑制SHG-44胶质瘤的增殖与浓度和时间呈相关性;6.0μmol/L Bortezomib处理SHG-44胶质瘤细胞24 h后,光镜、荧光显微镜、透射电镜下均可见凋亡形态学改变。流式细胞术分析细胞凋亡率为(20.31±2.84)%(P<0.01);细胞周期变化显示S期细胞减少到(17.65±6.38)%(P<0.01),细胞周期被阻滞于G0/G1期和G2/M期,分别为(68.51±5.62)%(P<0.01)和(14.75±2.48)%(P<0.01)。结论Bortezomib抑制C6胶质瘤细胞的增殖并诱导其凋亡。

大鼠骨髓间充质干细胞体外诱导分化为神经元样细胞的初步研究

目的探讨体外培养、扩增骨髓间充质干细胞(MSCs)的方法,诱导MSCs向神经元样细胞定向分化。方法取大鼠骨髓,采用贴壁培养筛选法分离MSCs,进行培养扩增,观察其生物学特性;用IBMX诱导MSCs向神经元样细胞分化,并通过细胞免疫化学法鉴定分化细胞。结果大鼠MSCs可通过贴壁法成功分离,并可在体外大量扩增,经IBMX诱导,MSCs可向神经元样细胞分化,出现胞体和突起,细胞免疫化学染色神经元特异性烯醇化酶和巢蛋白呈阳性。结论MSCs易分离和培养,体外培养条件下生长良好,可连续传代,诱导剂作用下可分化出神经元样细胞。

桥小脑角区神经内镜下解剖学研究及临床应用

目的通过神经内镜下桥小脑区的解剖,为内镜辅助下该区域病变的手术治疗提供解剖学支持,并探讨其临床应用价值。方法在8具福尔马林固定的成人尸头标本和4具新鲜成人尸头标本上,交替使用神经内镜和手术用显微镜,在模拟手术的条件下进行桥小脑角区的窥镜下解剖学研究,并实际应用于临床。结果内镜经小脑外侧间隙可顺利到达桥小脑角区和脑干前方,可清晰显示V～XI颅神经及其附近走行的血管,手术中可明显改善深部术野的照明效果和显微解剖结构的识别,减少对小脑和脑干的牵拉,提高手术的安全性,减少并发症的发生。结论神经内镜在颅内实质性肿瘤的切除术中的应用可弥补手术显微镜的不足,对显微外科手术起到重要的辅助作用。

腰大池持续引流治疗老年丘脑出血破入脑室患者的疗效

脑出血是老年人常见的疾患,丘脑出血发病率仅次于基底节出血,发病率较高,且极易破入脑室。由于脑室内积血阻塞了脑室系统的正常运行,形成梗阻性脑积水,脑室开始急剧膨胀,颅内压迅速升高致使脑部各器官及功能受损和衰竭〔1,2〕。内科的保守治疗死亡率近100%,老年人体质较弱,多宜采用脑室外引流治疗。脑室外引流管不宜长时间留置,术后应配合腰穿以促进血肿清除。1资料与方法：.

3D-ASL与DSC-PWI在短暂性脑缺血患者中的应用

目的对比研究动脉质子自旋标记(ASL)与动态磁敏感对比增强灌注成像(DSC-PWI)在评价短暂性脑缺血(TIA)患者脑部微循环中的应用。方法在DWI正常而短暂性脑缺血发作患者23例,均采用GE 3.0T MR行头部ASL和DSC-PWI检查,定性观察两种技术在TIA中的灌注表现。而在DSC-PWI中,分别CBF、CBV、MTT及TTP与ASL行阳性率对比,观察PWI中各项指标与ASL的CBF相关性。结果 23例患者中,ASL显示灌注不足18例,灌注过度2例,灌注正常3例;DSC-PWI显示灌注不足16例,灌注过度2例,灌注正常5例;两种方法结果一致15例,符合率为65.2%。而在DSC-PWI中,与CBF、CBV相比,ASL具有统计学差异(P<0.05);与MTT,TTP阳性率无明显统计学差异(P>0.05),但阳性率偏高。结论无创性ASL在检测TIA脑血流量灌注异常时与DSC-PWI具有同样的效果,敏感性偏高。

脑缺血性疾病的蛋白质组学研究进展

脑血管病是导致人类死亡的三大病因之一,而其中缺血性脑血管病约占75%~80%,其发病机制涉及多方面复杂因素;蛋白质组学作为新兴学科从整体角度,系统地研究动态变化的蛋白质组成分构成及其活动规律,为探索该病机制开辟了新途径。本文旨在综述蛋白质组学概念和主要研究技术,以及脑缺血个体体液、脑缺血个体脑组织、体外模拟缺血的细胞模型三方面的脑缺血性疾病蛋白质组学研究现状,为进一步开展该病蛋白质水平研究奠定基础。

应用周围神经松解术治疗糖尿病周围神经病

目的 探讨周围神经松解术治疗糖尿病周围神经病的疗效。方法 对87例临床表现为双下肢对称性疼痛、麻木及感觉异常的糖尿病周围神经病患者应用腓总神经、腓深神经及胫后神经三处周围神经松解术进行治疗，并随访3-14个月。结果 术后患者下肢麻木症状明显缓解60．9％，缓解29．9％，无变化9．2％。术后下肢疼痛症状明显缓解39．1％，缓解55．2％，无变化5．7％。术后随访表明疗效稳定，症状无反复。结论 应用周围神经松解术，可有效帮助糖尿病周围神经病患者恢复肢体感觉，缓解疼痛、麻木等症状。

急性脑梗死血栓溶解疗法的实验研究

目的 通过动物实验研究探讨一种有效的溶栓治疗急性脑梗死。方法 对三组犬分别给予静脉溶栓 (IV)、动脉溶栓 (IA)及静脉 +动脉联合溶栓 (IV +IA) ,并与对照组对照 ,并获取相关的DSA资料、病理标本。结果 动物实验 (IV组 ) 1例部分再通 ,(IA组 ) 4例部分再通 ,IV +IA组 3例部分再通 ,3例完全再通 ,再通犬梗死灶面积明显小于对照组 (P <0 0 0 1 ) ,IV +IA组明显小于IA组及IV组 (P <0 0 0 1 )。结论 本动物模型建立方法成功率高 ,梗死灶稳定 ,重复性好 ;IV +IA溶栓优于其他方式。

纳洛酮对颅脑损伤术后意识恢复的疗效研究

目的:探讨纳洛酮对颅脑外伤术后意识障碍的临床治疗效果。方法:以40例颅脑外伤术后意识障碍患者为研究对象,随机均分为治疗组和对照组。对照组采取常规术后治疗,观察组在常规治疗基础上采用纳洛酮治疗。比较两组临床疗效。结果:观察组显效率(55.28%)和总有效率(85.76%)高于对照组的显效率(43.33%)和总有效率(67.58%),差异具有统计学意义(P<0.05)。观察组患者经治疗后苏醒16例,对照组苏醒10例,观察组苏醒时间短于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:采用纳洛酮治疗颅脑外伤术后意识障碍效果显著,值得临床推广。

逆转座子LINE-1在脑胶质瘤中异常活化的临床意义

目的检测逆转座子LINE-1在脑胶质瘤中的表达水平,探讨其异常激活与肿瘤病理特征和患者生存预后的关联;方法收集30例脑胶质瘤组织,利用qPCR检测逆转座子LINE-1ORF1的表达水平,并分析LINE-1表达水平与肿瘤病理分类的关系,利用Kaplan-Meirer生存曲线分析LINE-1异常活化与患者生存预后的关系;结果与癌旁组织相比,脑胶质瘤组织中LINE-1的表达水平显著升高,同时在WHO分级Ⅲ-Ⅳ级肿瘤组织LINE-1的表达量明显高于Ⅰ-Ⅱ级,Ki-67高表达的脑胶质瘤组织LINE-1也有着更高的表达(P<0.05),与LINE-1低表达的脑胶质瘤患者相比,LINE-1高表达的脑胶质瘤患者生存期显著缩短。结论逆转座子LINE-1在脑胶质瘤中存在异常活化,有潜力成为不良预后的分子标志物。

缺血后处理对大鼠缺血再灌注后海马CA1区神经元内蛋白伴侣的影响

目的探讨缺血后处理对短暂脑缺血后海马CA1区神经元内蛋白伴侣的影响。方法采用大鼠全脑缺血模型。Wistar大鼠分为缺血组及缺血后处理组,每组按照再灌注时间进一步分为12 h恢复组、24 h恢复组、48 h恢复组及72 h恢复组。采用HE染色光镜观察脑缺血后神经元死亡;差速离心结合蛋白印迹分析短暂脑缺血后蛋白伴侣hsp70和hsp40在细胞内数量的变化。结果 HE染色显示缺血后处理显著降低了脑缺血再灌注后海马CA1区神经元死亡;蛋白印迹分析显示,缺血后处理显著提高了hsp70的表达,同时还降低了缺血再灌注所致的hsp40的减少。结论缺血后处理能够显著减少脑缺血后海马CA1区神经元内hsp70和hsp40的含量,进而抑制蛋白聚集物的形成,降低了缺血再灌注后海马CA1区神经元死亡。

骨髓间充质干细胞在造血重建中的作用

目的探讨骨髓间充质干细胞(bonemarrow mesenchymal stem cells,BM-MSC)在造血损伤修复中的作用。方法将同系小鼠股骨、骨壳、注入骨髓条的塑料管及经20Gyγ-射线照射的股骨分别植入同一小鼠腹部皮下,观察1、2、3、4w各移植物造血重建情况。观察髓腔内微循环结构与机能、组织学、分化不同阶段的造血细胞数目与机能等变化,以及骨皮质体外间充质干细胞(MSC)培养与扩增规律。结果乏造血干细胞(HSC)的骨皮质异位移植完全可以造血重建,在移植后4w,移植物已形成完整的封闭的具有正常造血组织的股骨,其重建的程序、速度与具有大量HSC的完整股骨移植的重建基本一致。而经射线破坏和注入塑料管内的骨髓条完全失去造血重建功能。结论骨皮质可能是骨髓MSC的源泉,BM-MSC是造血重建的不可缺少的因素。