棉花转录因子基因GhMS3的克隆及其启动子功能的鉴定

【目的】从棉花无短绒突变体GZnn中分离棉纤维发育相关的转录因子,并对其转录激活功能和表达模式进行初步分析。【方法】通过RACE(rapid amplification of the cDNA ends)和染色体步行(genome walking)技术,获得GhMS3的cDNA序列及基因组DNA序列。利用生物信息学方法对获得的DNA序列及推定的氨基酸序列进行分析,采用酵母单杂交系统验证GhMS3蛋白的转录激活功能,运用GUS组织化学染色法在转基因烟草中分析该基因的表达模式。【结果】获得GhMS3的基因组DNA以及上游1174bp的启动子序列。氨基酸序列比对发现GhMS3是R2R3 MYB转录因子。酵母试验表明,GhMS3蛋白具体外转录激活功能,C端体外转录激活功能较强,在PGhMS3:GUS转基因烟草中,GUS主要在表皮毛、根毛以及细胞分裂旺盛区域表达。【结论】从棉花无短绒突变体GZnn中分离到的R2R3 MYB转录因子GhMS3,具有组织特异性表达模式并且其编码蛋白具有体外转录激活功能,是否参与植物表皮细胞分化有待于进一步研究。

3种樟属植物对皿式培养牛樟芝菌丝生长的影响

【目的】研究3种樟属植物对皿式培养牛樟芝(Antrodia camphorata)菌丝生长的影响,为牛樟芝的人工培养提供科学依据。【方法】以实验室保存的牛樟芝为研究材料,首先在基因组水平对其进行分子鉴定,然后在皿式培养基中分别添加一系列浓度的牛樟、香樟和樟树木屑的热水提取物、乙醇提取物,比较牛樟芝菌丝的扩散直径和菌丝状态,分析3种樟属植物对牛樟芝菌丝生长的影响。【结果】(1)经鉴定本研究用的牛樟芝为模式菌株BCRC35396,GeneBank登录号为AY378094。(2)香樟的热水提取物最能促进牛樟芝菌丝的扩散,牛樟次之,樟树最弱;综合考虑菌落的生长状态,樟树的添加是最优的,牛樟次之,香樟最差。(3)3种樟属植物乙醇提取物添加至培养基后,樟树最能促进牛樟芝菌丝的扩散,牛樟和香樟作用效果类似,次于樟树;添加樟树乙醇提取物后菌落生长状态最优,牛樟次之,香樟最差。【结论】本研究认为在牛樟芝皿式培养时可以添加牛樟或樟树木屑提取物来促进牛樟芝菌丝体的生长。该研究为牛樟芝的皿式培养提供理论基础和技术支撑。

台湾牛樟总RNA提取方法的建立

以牛樟Cinnamomum kanehirae根、茎、叶为材料,在RNAprep Pure Plant Kit（Polysaccharides＆Polyphenolics-rich）方法的基础上进行改良,建立台湾牛樟总RNA的提取方法。经琼脂糖凝胶电泳、Nanodrop和Aglient2100检测发现,牛樟根、茎、叶所得RNA的28S和18S比值介于1.7~2.1之间,RNA完整性较好,浓度均在50 ng·μL-1以上,RIN值均大于7。该方法提取的RNA纯度、浓度和完整性均合格,可满足后续分子生物学实验要求。

低氮下拟南芥叶酰聚谷氨酸合成酶突变体atdfb根发育研究

利用叶酰聚谷氨酸合成酶功能缺失突变体atdfb解析叶酸在拟南芥根发育过程中的生物学功能。纯合T-DNA插入功能缺失突变体atdfb在土壤培养条件下生长3周,与野生型表型无明显差异。在氮源充足的1/2MS培养基上,atdfb的主根显著短于野生型,互补植株的主根长度恢复到野生型水平,说明主根缩短的表型是由AtDFB基因功能缺失造成的。在1/2MS培养基生长11 d的突变体主根长度只有野生型的23%。在低氮条件下,突变体的生长发育几乎停滞,培养11 d的突变体主根长度只有野生型的4%;5-甲酰四氢叶酸(5-F-THF)可以恢复低氮条件下atdfb-3的表型,其主根长度、根毛长度及静止中心的细胞排列均得到恢复。进一步分析发现,低氮条件下培养少于3 d的atdfb-3补充充足的5-F-THF,3 d后能像野生型一样适应低氮环境。由此说明叶酸对拟南芥根部发育及对低氮环境的适应是必需的。

牛樟EST-SSR标记的开发及遗传多态性分析

本研究通过测序牛樟叶片cDNA获得17 046条Uni-EST,从中检测出1 316个SSR位点,平均每25.7 kb EST含1个SSR位点。功能注释发现1242条SSR-EST中有690条可被划分为3大功能类、18个功能亚类。牛樟EST-SSR二核苷酸重复类型出现频率最高,三核苷酸次之。184类重复基序中AG/CT出现频率最高(32.4%),其次为AAG/CTT(9.3%)。从1 242条SSR-EST设计SSR引物537对,随机选取150对检测牛樟的多态性及在香樟、大叶樟和沉水樟中的可转移性。结果表明,有44对引物在牛樟中得到特异性扩增,其中17对具有多态性,检测出的等位基因数2~7个,平均3.02个。牛樟SSR标记在香樟、沉水樟和大叶樟的可转移率分别为97.7%、97.7%和95.3%。聚类分析表明,在遗传相似系数为0.76处,14个樟属植物能被划分为5类,聚类结果与植物学分类结果基本吻合。

中医外治法治疗小儿便秘的临床研究近况

参照近10年相关文献资料,对治疗小儿便秘的中医外治法进行了梳理分析,总结了临床常用的外治法有推拿、针刺疗法、穴位敷贴、中药灌肠、特色疗法及综合疗法,并分析了各自的优势及有效性,以期为临床治疗小儿便秘提供借鉴。

青海省鼠疫菌营养需求及营养突变研究

收集１９６０～１９９２年间不同地区，不同宿主及媒介分离的鼠疫菌４６２株进行营养需求及突变的研究，利用Ｌａｗｔｏｎ氏最小培养基进行初筛，所有菌株均能生长。在限定培养基上，应用影印与定量法同步在２８℃下进行培养，结果有９５％的菌株需要苯丙氨酸（Ｐｈｅ－）、甲硫氨酸（Ｍｅｔ－）和半胱氨酸（Ｃｙｓ－）。少数菌株出现了营养突变，形成四种营养依赖型：缬氨酸依赖（Ｖａｌ－）、异亮氨酸依赖（Ｉｌｅ－）、甘氨酸依赖（Ｇｌｙ－）和缬、甘氨酸联合依赖（Ｖａｌ－Ｇｌｙ－）；四种低营养型：苯丙氨酸不依赖（Ｐｈｅ＋）。甲硫氨酸不依赖（Ｍｅ＋）、半胱氨酸不依赖（Ｃｙｓ＋）和甲硫、半胱氨酸联合不依赖（Ｍｅｔ＋Ｃｙｓ＋）。同时发现，各种营养表型与菌株的宿主种类、生化特性、质粒的存在于否和毒力因子关系方面均无显著关系，只有Ｐｇｍ－菌株约５０％为营养依赖型。不同地区分离的菌株对氨基酸的需求不同，全省３０余个疫源具有１４种营养类型，因此鼠疫菌的营养需求在地理分布上存在差异。这些结果表明，鼠疫菌对氨基酸的营养需求是其长期存在于特定的生态环境所形成的个独立系统，是长期进化的结果，其营养表型可能与毒力的表达无直接的联系。

皮肤磨削美容584例10年临床疗效观察

磨削术是一种新的皮肤外科技术,在临床治疗中常有美容的效果,其原理是用金属齿轮在皮损表面进行机械性摩擦,将高突不平的皮损磨平。该方法的适应证和深浅度掌握好是成功的重要环节。

过表达叶酰聚谷氨酸合成酶对低氮胁迫下叶酸突变体的影响

为了解低氮胁迫下质体定位的叶酰聚谷氨酸合成酶（DFB）对同工酶（DFC）功能缺失作用,通过在拟南芥dfc突变体中过表达DFB,分析低氮条件下过表达DFB拟南芥的主根长度、相关基因转录水平及叶酸含量的变化。结果显示：在低氮环境和dfc背景下,过表达DFB的拟南芥主根长恢复至野生型拟南芥的65%～131%,叶酸和氮代谢相关基因的RT-PCR电泳条带亮度与野生型拟南芥相似,5-甲酰四氢叶酸含量增加至野生型拟南芥的90%～116%。表明,在低氮胁迫条件下DFB在一定程度上能对DFC的缺失起到弥补作用。

358例睑袋矫治术临床体会

睑袋影响跟部和整个容貌之美,随着人们生活质量的提高,要求矫治睑袋的美容就医者也越来越多。作者对358例美容就医者,根据不同睑型采取不同处理方法,取得了较好的临床效果,现在体会总结如下：

快速简单组织定位甘蔗RSD致病菌Lxx的原位PCR方法

提出对甘蔗冰冻切片中甘蔗宿根矮化病(RSD)致病菌Lxx(Leisonia xyli subsp. xyli)进行定位的原位多聚酶链式反应(in situ PCR)方法,为Lxx与甘蔗互作致病机理研究提供有效的实验手段.以染RSD甘蔗品种Badila及其健康株为材料取样制作冰冻切片,切片经溶菌酶消化后,利用病原菌Lxx 16S^23S rDNA内部转录间隔区(ITS)特异性引物进行原位PCR扩增,并对随机参入扩增片段的与地高辛-11-dUTP进行免疫组化,建立甘蔗样品冰冻切片中直接原位PCR方法.结果表明:直接原位PCR对RSD蔗株茎样品切片显色为阳性,阳性信号出现于甘蔗茎部的木质部、韧皮部,而健康蔗株茎样品无信号,方法特异性较好.

拟南芥质体定位的叶酰谷氨酸合成酶基因在低氮条件下的功能分析

叶酰聚谷氨酸合成酶(folylpolyglutamate synthetase,FPGS)在细胞的不同位置负责将多个谷氨酸残基逐个加在单谷氨酸四氢叶酸(tetrahydrofolate,THF)的γ-羧基上,从而形成有活性的多尾形式四氢叶酸。AtDFB是定位在质体中的FPGS,利用AtDFB基因的T-DNA插入突变体Atdfb-3,通过比较野生型拟南芥及突变体在不同氮源条件下的生长状态以了解AtDFB基因的生物学功能。结果表明,低氮条件下AtDFB基因功能的缺失导致Atdfb-3突变体主根的急剧缩短,叶酸含量的明显下降;而在Atdfb-3突变体中过表达AtDFB基因后,在低氮条件下的表型恢复至野生型拟南芥水平,并且叶酸含量有所提高。综上所述,AtDFB基因在拟南芥叶酸合成代谢途径中发挥着重要作用,可能影响低氮环境下植物主根的发育。

酱卤肉卫生检测78份结果分析

为了解我区酱卤肉的卫生状况,保障人民群众食用安全,2012年11月—12月我区疾控中心和工商局共采集酱卤肉制品78份进行检测,现将检测结果分析报告如下。1材料与方法1.1材料来源依据GB4789.1-2010散装食品或现场制作食品采样方法,区疾控中心和工商局在市场、超市无菌、随机采集散装酱卤肉制品78份,每份样品250 g,并进行现场记录,填写采样单,当日送实验室检测。

襄阳区二级医院物体表面消毒质量结果分析

随着新型农村合作医疗试点在医院的逐步推开,基层医院,特别是二级医院的就诊人数在不断增加.为保障患者的利益,预防院内感染的发生,使群众真正得到新型农村合作医疗的实惠,依据〈消毒管理办法〉,从2008年起我区加大对二级医院消毒管理与监测工作,通过连续几年的跟踪监测,医院的消毒效果逐年提高,现将物体表面消毒质量检测结果报告如下.

浅议学生主动探索意识与能力的培养

知识是教不尽的,工具拿在手里,必须不断地用心地使用才能够练成技能。怎样在语文阅读教学中培养小学生的主动探索意识和能力,让学生在探索中主动获取新知?下面是我在课堂教学中的几点做法。

襄阳区2006年—2009年食(饮)具消毒监测结果分析

随着生活节奏的加快,家庭外就餐人数的逐渐增多,食（饮）具消毒监测控制肠道传染病的传播与流行工作愈来愈重要。我中心自2006年始,依据《食品安全法》及《中华人民共和国国家标准》,加强了襄阳区食（饮）具消毒监测工作,并取得了一定成效。现将2006年—2009年食（饮）具消毒监测结果分析如下。

一起学生细菌性痢疾爆发的病原检测

2006年6月12日我站接到乡镇卫生院报告，该镇某中学数十名学生发生腹泻。我们进行了现场流行病学调查和实验室检验。患者主要临床表现为腹痛、腹泻、恶心、里急后重、排脓血样便。经分离培养，从2名患者脓血便中分离出两株福氏志贺菌1型痢疾杆菌，生化鉴定、血清学分型及药敏试验结果如下。

学龄前儿童家长预防接种知识认知水平及影响因素分析

目的探讨学龄前儿童家长预防接种知识认知水平及影响因素分析。方法选择2018年4月至2019年7月于本院预防接种疫苗的学龄前儿童86例,家长172例作为研究对象,通过问卷调查的方式统计家长的预防接种知识认知水平程度,并对家长性别、民族、文化程度及家庭年收入与预防接种知识认知水平进行单因素卡方检验和多因素Logistic回归分析。结果对于接种基本知识、疫苗疾病与相关知识、预防接种注意事项、预防接种不良事件及诊断处理的认知水平差所占比例高于认知水平高和中所占比例,差异有统计学意义(P<0.05);对预防接种影响进行单因素卡方检验,家长预防接种知识认知水平高的父母民族方面与家长预防接种知识认知水平中或差相比,差异无统计学意义(P>0.05);家长预防接种知识认知水平高的监护人性别、文化程度、家庭年收入方面与家长预防接种知识认知水平中或差相比,差异有统计学意义(P<0.05);采用logistic多因素分析,监护人性别(男)、文化程度(专科)及家庭年收入(≤50万)是预防接种知识认知水平的影响因素(OR>1,P<0.05)。结论针对调查结果,需对学龄前儿童父亲、文化程度较低、收入较低的人群进行预防接种知识的重点教育,以提高儿童的预防接种率。

机场航站楼商业客户管理特点与招商机制分析

一、机场商贸的发展趋势目前,非航空收入已经成为机场的主要收入来源。国际航空运输协会的调研显示,旅客有需要并且愿意在机场获取购物、餐饮服务,机场商业设施以及服务提供30%—50%的收入。在多样化的需求和收入增长的推动下,全球许多大型机场已经由"航空港"发展成为"航空商业中心"。

华南三省(自治区)部分西番莲种植区花叶病病原检测及EAPV多聚蛋白基因序列分析

西番莲(Passiflora edulis Sims.)是热带亚热带地区重要经济作物,我国福建、广东、广西、海南等地广泛种植[1]。调查发现,我国南方多地西番莲花叶病为害严重,症状表现为叶片花叶、黄化、斑驳、畸形,甚至整株褪绿,严重影响西番莲的产量和品质。