狂犬病毒疫苗株CTN-1八代次N和G基因序列测定及分析

目的测定八个代次CTN-1疫苗株核蛋白（N）和糖蛋白（G）基因序列，并与代表性疫苗株和街毒株进行比较。方法用RT-PCR反应扩增八代次CTN-1的N和G基因，获得cDNA，进行序列测定。结果八个代次CTN-1的N和G基因序列与其它疫苗株比较，核苷酸的同源性分别为82．7％～84．5％和86．6％～88．5％，氨基酸同源性分别为88．9％～92．5％和95．3％～98．2％；与在我国分离的街毒株相比，核苷酸的同源性分别为84．2％～95．0％和80．4％～94．3％，氨基酸同源性分别为92．1％～99．6％和88．7％～98．5％。CTN-1株八个代次之间的核苷酸序列几乎完全相同。结论CTN-1株在传代过程中N和G基因变异小，与中国流行的代表性街毒株的同源性高于其它疫苗株。

中国12株狂犬病街毒株G基因序列测定与分析

目的了解中国狂犬病毒的流行情况以及街毒株与中国人用、兽用狂犬病疫苗株在G基因核苷酸和氨基酸水平的差异,为有效控制狂犬病疫情提供初步科学依据。方法对12株街毒株G基因进行了全基因测序,与其它36株中国狂犬病街毒株,以及中国的疫苗株和其它国家毒株的G基因序列进行了综合分析。结果序列分析表明来源于中国的50株狂犬病毒均为基因Ⅰ型狂犬病毒;其中具有代表性的6株病毒与我国现在使用的各种疫苗株在G基因的核苷酸和氨基酸水平上均存在不同程度的差异,与我国人用疫苗株CTN同源性较高;进化分析表明,我国主要流行狂犬病毒与泰国、印度尼西亚、马来西亚等东南亚狂犬病毒株处于同一分支。中国毒株之间G基因核苷酸同源性分别≥82.3%;氨基酸同源性分别≥92.1%;中国街毒株与疫苗株相比较核苷酸的同源性为79.3%～94.2%,氨基酸的同源性为87.8%～97.9%。结论我国的狂犬病毒为基因Ⅰ型狂犬病毒,可以明确分为6个进化群。无论在核苷酸还是氨基酸水平上,中国多数街毒株与疫苗株CTN之间的同源性要高于与其它疫苗株。

中国6株狂犬病病毒街毒株全基因组测序与分析

实验研究中对分离于中国的6株狂犬病病毒街毒株进行了全基因组测序,对基因组的5个结构基因(N、P、M、G和L)的核苷酸和推断的氨基酸序列以及非编码区序列进行了分析与比较,并与来自GenBank的40株毒株从全基因组水平进行了分子进化分析。所测6株中国狂犬病病毒街毒株的全基因组核苷酸序列长度介于11 907 nt(CQ92)和11 924 nt(SH06和gg4)之间,基因组结构相同,用全基因组和不同的结构基因构建的进化树拓扑结构相似,基因组3′和5′末端高度保守而且末端11个核苷酸互补配对,5个结构基因的保守性依次是N>L>M>G>P,核苷酸同源性的最小值依次分别是81.9%、81.7%、80.7%、78.3%和76.7%。

CTN株疫苗对中国狂犬病病毒街毒代表株的保护性

目的研究人用狂犬病病毒CTN株疫苗对中国狂犬病病毒街毒代表株的保护性,为评估该疫苗的适用性提供依据。方法用CTN株疫苗免疫昆明小鼠,用3株具有代表性的街毒株CQ92、HN06、J和标准攻击毒株CVS经脑内和肌肉攻击,以未免疫小鼠进行脑内和肌肉攻击为对照,观察CTN株疫苗的保护效果。结果原倍和5倍稀释的疫苗免疫的小鼠经3株街毒肌肉攻击后,均得到100%的保护,与对照组比较,差异均有极显著意义;经3株街毒脑内攻击后,原倍疫苗免疫的小鼠均得到100%的保护,5倍稀释的疫苗免疫的小鼠对3株街毒CQ92、HN06、J的保护率分别为85%、75%和77.8%,与对照组比较,差异均有极显著意义。结论CTN株疫苗总体上能有效预防我国目前狂犬病的流行。

简述疫苗安全性管理

疫苗接种是保护公众健康最有效的措施之一,疫苗可有效降低传染病的发病率和死亡率。与疫苗的有效性评估不同,疫苗的安全性不能直接测定,只能通过有限的疫苗不良事件的相关情况来推断。对疫苗安全性监测的科学理论,全球关注的个案研究,以及注册前有关疫苗的临床试验安全性的相关事宜进行了简介。

高压水除鳞系统中蓄势器对水击防护的特性分析

针对高压水除鳞系统水击现象,基于特征线法,建立了高压水除鳞系统水击计算的通用数学模型。通过实例,对系统中蓄势器在不同位置对水击的防护特性进行了模拟仿真计算,得到了有无加装蓄势器以及蓄势器安装在不同位置时对水击防护的差异性。分析结果表明:安装蓄势器,并不一定能完全达到防护水击的理想效果。蓄势器的安装位置越靠近管道上游处,则对水击的防护特性越差;相反,越靠近下游处,则对水击的防护特性越好,这将对系统的工程设计具有极其重要的指导意义。

过程检测与控制情境教学实训系统研发与实践

"过程检测与控制情境教学实训系统"的研发是基于现场实际工作任务和工作过程,颠覆了传统的教学模式,在校内实施教学做一体,适应高职院校生产过程自动化技术专业核心课程教学内容改革、教学模式创新的需要。从实践结果上看,提高学生自主学习、团结协作的能力。

动物致伤专家共识

动物致伤是危害人类健康的常见公共卫生问题,对动物致伤的正确处置主要与狂犬病的预防密切相关,本专家共识概述了动物致伤的流行病学、微生物学、临床表现、伤口感染特征、辅助检查、治疗、预防性抗生素应用、狂犬病和破伤风预防、咬伤感染的处置、经验性抗生素治疗、不常见的动物咬伤、随访治疗、并发症及预防。

GⅡ.17型诺如病毒多克隆抗体的制备及应用

目的制备兔抗GⅡ.17型诺如病毒(GⅡ.17norovirus,GⅡ.17 NoV)病毒样颗粒(virus-like particles,VLPs)多克隆抗体(兔抗GⅡ.17 NoV VLPs多克隆抗体),用其建立组织血型抗原(histo-blood group antigen,HBGA)-GⅡ.17 NoV VLPs阻断试验,并对其进行初步应用。方法制备并纯化GⅡ.17 NoV VLPs,采用SDS-PAGE、电镜观察和粒径检测方法对其进行鉴定。将其免疫家兔制备兔抗GⅡ.17 NoV VLPs多克隆抗体,经Western blot对其进行鉴定,并用ELISA检测其效价及特异性。筛选与GⅡ.17 NoV VLPs结合力强的唾液HBGA受体类型,优化GⅡ.17NoV VLPs质量浓度及多克隆抗体稀释度,用兔抗GⅡ.17 NoV VLPs多克隆抗体建立HBGA-GⅡ.17 NoV VLPs阻断试验,并进行特异性验证及初步应用。结果 GⅡ.17 NoV VLPs经检测纯度为95%,且颗粒形态完整,粒径均一。制备的多克隆抗体在Western blot可见特异性条带,效价可达1∶25 600 000,并对其他基因型(GⅠ.2、GⅠ.7、GⅡ.3、GⅡ.4、GⅡ.7)VLPs的交叉反应较弱。GⅡ.17 NoV VLPs和A、B、O和AB 4种血型的唾液HBGA均能结合,差异无统计学意义(P>0.05);以GⅡ.17 NoV VLPs质量浓度为0.25μg/m L,多克隆抗体的稀释度为1∶160 000建立了HBGA-GⅡ.17 NoV VLPs阻断试验,并应用该方法对不同剂量GⅡ.17 NoV VLPs免疫的小鼠血清进行了半数阻断滴度检测。结论成功制备了高效价兔抗GⅡ.17 NoV VLPs多克隆抗体,建立了HBGA-GⅡ.17NoV VLPs阻断试验,且该方法特异性良好,可用于GⅡ.17 NoV VLPs免疫效果的评价。

兔抗肠道病毒71型截短VP1抗体的制备及鉴定

目的制备兔抗肠道病毒71型（EV71）截短VP1多克隆抗体,为EV71基础研究奠定基础。方法 RT-PCR扩增EV71VP1-N160基因（480 bp）,以p GEX-6p-1为表达载体,构建重组表达质粒p GEX-6p-1-VP1-N160,转化大肠埃希菌BL21（DE3）,IPTG诱导表达GST-VP1-N160融合蛋白,并对其进行纯化。以纯化的GST-VP1-N160融合蛋白作为免疫原,经背部皮下免疫新西兰大耳白兔,制备多克隆抗体,ELISA检测多克隆抗体效价,间接免疫荧光法和免疫印迹检测抗体特异性。结果经双酶切鉴定,表明重组表达质粒p GEX-6p-1-VP1-N160构建正确;GST-VP1-N160融合蛋白相对分子质量为35 000~55 000,主要为不可溶性包涵体形式,其在大肠杆菌中高效表达;纯化后目的蛋白纯度约为95%,蛋白质量浓度1.9 mg/m L;免疫家兔后,免疫血清效价可达1012,抗VP1-N160多克隆抗体可以识别EV71原核表达的重组蛋白及天然病毒抗原中的VP1,特异性好。结论成功制备了抗EV71截短VP1多克隆抗体。

李斌教授湿疹理论的应用

目的:通过中医辨证,中西医结合治疗急慢性湿疹患者,关注治疗效果,分析治疗经过。方法:注重辨证论治,审证求因,运用凉血潜镇法治疗湿疹69例。结论:中医药治疗湿疹效果肯定。体会:通过中医辨证,以凉血潜镇法治疗急性、亚急性、慢性湿疹在减轻病况,提高患者生活质量方面效果肯定,配合生活调适、效果更佳。

狂犬病疫苗免疫后中和抗体持续时间

世界卫生组织建议狂犬病疫苗的最低抗原含量应≥2.5IU疗刊,接种第1剂疫苗14d后可提供足够的狂犬病病毒中和抗体滴度(≥0.5IU/mL)。临床医生经常被问及暴露前或暴露后免疫狂犬病疫苗诱导的免疫持续多长时间。这篇论文基于先前的研究表明,世界卫生组织认可的现代组织培养狂犬病疫苗能够带来持久的免疫记忆,疫苗诱导的免疫保护通常会维持3~5年,但部分人狂犬病病毒中和抗体可维持10年以上。健康人在初次接种狂犬病疫苗多年后进行加强免疫,会快速产生中和抗体反应,并且不需要使用免疫球蛋白。

1000MW机组邻机加热系统经济性分析

本文就1000MW机组热态冲洗方案推荐采用邻机四段抽汽和再热冷段加热给水至190℃的热态冲洗方案。与采用常规热态清洗方案相比,临机加热方案增加投资160万元,每次冷态启动节省运行费用31.31万元,本文按两台机组按每年冷态启动一次计算,设置临炉加热所需初投资2.55年即可回收成本,经济效益显著。

玉屏风散临床应用体会

目的:通过中医辨证中草药论治以气虚不固为主要病机的患者,比较治疗效果,总结心得体会。方法:随机使用中草药辨证论治者共145例,单以中成药玉屏风颗粒治疗者计38例。结论:中草药及中成药组治疗效果均肯定,但前者效果明显优于后者。体会:通过中医辨证论治,而后以玉屏风散加减运用中草药治疗,无论在减轻患者痛苦,还是在改善患者身体机能方面效果肯定,配合生活调养起效更佳。

“十日观察法”的依据与应用

如果动物(犬、猫和家养雪貂)在10d的观察期内,仍然保持健康,或经可靠的实验室使用正确的诊断技术证实动物为狂犬病阴性,则可以终止暴露后处置。在咬伤发生后,除非经认证实验室检测证实动物为狂犬病阴性或者经过训练有素的专家确认动物健康,否则不要终止暴露后处理。

狂犬病患者的潜伏期

临床医生经常被问及狂犬病的潜伏期是多长时间。暴露后,处于潜伏期的患者没有症状,也没有诊断手段。狂犬病的潜伏期在人类中变化很大,通常为1~3个月,在极端情况下从大约5~6d到几年不等。症状出现后,短则几天,长则两周之后,患者会由于心肺功能停止而死亡。如果没有实施重症监护,患者通常会在第一次出现症状的7~10d内因心脏或呼吸衰竭死亡。

浅析儿童咳嗽的中草药治疗

目的:通过中医辨证中草药论治与单以西药或配合中成药治疗以咳嗽为主症的患儿,比较治疗效果,总结心得体会。方法:随机使用中草药辩证论治者为治疗组共45例,单以西药或与中成药联合治疗为对照组计20例。结论:治疗组治疗效果近远期均明显优于对照组。体会:通过中医辨证,而后加减运用中草药治疗,无论在减轻患者痛苦,还是在改善患儿身体机能方面效果肯定,配合生活调养起效更佳。

洪善贻教授运用平胃散治疗痰湿中阻型脾胃病的经验

洪善贻主任中医师是第三批全国老中医药专家学术经验继承指导老师,擅长调治脾胃病.笔者有幸随诊左右,现将洪老以平胃散为基础方施治痰湿中阻型脾胃病经验总结如下: 1 痰湿中阻型脾胃病之病机病证 宁波地处浙江东南沿海,气候温暖潮湿;当地居民偏爱食用海鲜;加之现代人生活节奏加快,作息时间紊乱、饮食失调,都易导致脾胃失健,湿浊内生.