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棘孢木霉Myb27转录因子基因特性分析、原核表达及产物纯化
1
作者
韩静
安一博
+2 位作者
季世达
田桢
刘志华
《吉林农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第1期49-57,共9页
以棘孢木霉CGMCC11653菌株菌丝体总RNA反转录的cDNA为模板,克隆全长717 bp转录因子Myb27基因编码序列,其编码238氨基酸组成的多肽。用生物信息学软件预测蛋白的理化性质、结构域并进行亚细胞定位、氨基酸多序列比对和进化关系分析,结果...
以棘孢木霉CGMCC11653菌株菌丝体总RNA反转录的cDNA为模板,克隆全长717 bp转录因子Myb27基因编码序列,其编码238氨基酸组成的多肽。用生物信息学软件预测蛋白的理化性质、结构域并进行亚细胞定位、氨基酸多序列比对和进化关系分析,结果表明:其相对分子质量为27000,属于Myb-like DNAbinding结构域的蛋白,亚细胞定位在细胞核中。链格孢菌毒素诱导条件下Myb27的表达有显著变化,可能参与棘孢木霉抗链格孢菌毒素胁迫应答反应的正向调控。构建原核表达载体pMAL-Emyb27,转化大肠杆菌ER2523获得转化子ER2523-Emyb27,其成功诱导的最适条件为0.1 mmol/L IPTG 37℃连续诱导培养3 h;用PBS+10 mmol/L麦芽糖洗脱层析柱可得到与MBP标签融合的单一可溶性69500重组rMyb27蛋白。可见Myb27转录因子调控抗病基因的表达所结合的顺式作用元件提供体外重组蛋白,为调控棘孢木霉抗杨树叶枯病链格孢菌毒素胁迫的机理提供理论依据。
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关键词
棘孢木霉
转录因子
链格孢菌
毒素胁迫
特性分析
原核表达
原文传递
新疆野苹果根围木霉分离鉴定及生防特性研究
被引量:
3
2
作者
方圆
季世达
+2 位作者
王玉成
周畅
刘志华
《西部林业科学》
CAS
北大核心
2019年第6期105-113,共9页
为了给防治新疆野苹果病害提供生防性能优良的木霉菌株,利用孟加拉红平板分离法进行新疆巩留县野苹果根围木霉菌株分离,通过形态特征和ITS rDNA序列比对进行菌种鉴定,利用平板对峙试验检测分离木霉抑菌能力,用NBT染色和根部观察检验木...
为了给防治新疆野苹果病害提供生防性能优良的木霉菌株,利用孟加拉红平板分离法进行新疆巩留县野苹果根围木霉菌株分离,通过形态特征和ITS rDNA序列比对进行菌种鉴定,利用平板对峙试验检测分离木霉抑菌能力,用NBT染色和根部观察检验木霉诱导后新疆野苹果幼苗叶片活性氧含量、抗病和促生能力。结果表明:分离鉴定出俄罗斯木霉22株,渐绿木霉13株,哈茨木霉4株。从长势和产孢量等特性上看,俄罗斯木霉T7和哈茨木霉T2为新疆野苹果根围优势生防木霉菌种。哈茨木霉T2对尖孢镰刀菌的抑菌率为75.47%,对链格孢菌的抑菌率为78.17%。俄罗斯木霉T7对尖孢镰刀菌的抑菌率为79.66%,对链格孢菌的抑菌率为91.53%;NBT染色发现木霉处理后野苹果苗叶片活性氧含量降低,叶片染色颜色更浅。总之,木霉能有效抑制病原菌生长,能有效减少新疆野苹果幼苗中活性氧含量,促进和保护根系生长。本研究为防治新疆野苹果病害防治提供生防性能优良的木霉菌株,为苹果病害的生物防治提供可以借鉴的方法。
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关键词
新疆野苹果
木霉菌
抗病原菌
促生长
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职称材料
棘孢木霉天冬氨酸蛋白酶家族基因特性研究
被引量:
1
3
作者
王欣玉
王金杰
+3 位作者
范海娟
窦恺
季世达
刘志华
《中国农学通报》
2018年第27期102-110,共9页
本研究旨对棘孢木霉基因组20个天冬氨酸蛋白酶家族基因(Asp)特性进行分析。分别进行了保守区及家族预测、氨基酸多序列比较及功能区预测、进化关系分析及其在不同培养条件下棘孢木霉中的差异表达分析。20个Asp均属Asp蛋白酶家族(PF0002...
本研究旨对棘孢木霉基因组20个天冬氨酸蛋白酶家族基因(Asp)特性进行分析。分别进行了保守区及家族预测、氨基酸多序列比较及功能区预测、进化关系分析及其在不同培养条件下棘孢木霉中的差异表达分析。20个Asp均属Asp蛋白酶家族(PF00026),均为酸性(p I<7)。有18个Asps含有信号肽。多序列比对发现Asps含有2个特征性催化指纹"DTGS/A"和"DT/SGS/Y/T/A/N",根据第二个"DTGT"、"DSGT"、"DTGA/N"和"DSGY/T/S"特征性催化指纹,将20个Asps分为4个分支。进一步在C-hungry胁迫下,10个Asps基因上调,Asp54.2上调最高为3222。在N-hungry胁迫下,8个Asps基因上调,Asp50.9上调最高为33100。山新杨(Tas-Pd Pap)叶粉诱导后,13个Asps基因上调,Asp50.9上调最高为21078。说明棘孢木霉促杨树生长及与病原菌拮抗过程中,Asp起了非常重要的作用。
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关键词
生物防治
棘孢木霉
天冬氨酸蛋白酶
生物信息学分析
差异表达
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职称材料
新疆野果林木霉分离鉴定、抑菌作用及固态发酵配方优化
被引量:
5
4
作者
田桢
曹传旺
+2 位作者
季世达
刘斌
刘志华
《微生物学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第12期4696-4709,共14页
【背景】新疆野苹果病害发生严重,而木霉(Trichoderma spp.)是重要的植物病害生防菌,因此可利用其对新疆野苹果病害进行防治。【目的】分离鉴定新疆野果林木霉菌株,分析其对新疆野苹果2种病原菌的抑菌能力,为新疆野苹果专用木霉菌肥的...
【背景】新疆野苹果病害发生严重,而木霉(Trichoderma spp.)是重要的植物病害生防菌,因此可利用其对新疆野苹果病害进行防治。【目的】分离鉴定新疆野果林木霉菌株,分析其对新疆野苹果2种病原菌的抑菌能力,为新疆野苹果专用木霉菌肥的制备提供菌种资源。【方法】利用平板稀释法对新疆野果林4种草本植物根围木霉菌进行分离,通过形态学与分子生物学方法进行菌种鉴定,平板对峙试验检测其抑菌能力并优化木霉菌株的固态发酵配方。【结果】共分离得到2种木霉菌共42株,分别为34株棘孢木霉(T.asperellum)和8株深绿木霉(T.atroviride);棘孢木霉TasT01对苹果炭疽病菌(Colletotrichum gloeosporioides,Cgl)和苹果斑点落叶病病原菌(Alternaria alternariaf.sp.mali,Aal)的抑菌率分别为58.60%和57.14%;深绿木霉TatT35对Cgl和Aal的抑菌率分别为43.86%和36.90%。进一步显微镜观察发现,TasT01可通过菌丝缠绕的方式抑制2种病原菌的生长。TatT35菌株固态发酵配方为稻壳90%、麦麸10%、(NH_(4))_(2)SO_(4)0.5%时,孢子浓度达1.0×10^(8)个/g。【结论】TasT01和TatT35对新疆野苹果2种病原菌都有很好的抑制效果,固态发酵配方优化后可以提高孢子浓度,该研究结果为新疆野苹果真菌病害的生物防治提供了可借鉴的方法。
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关键词
木霉菌
新疆野苹果
分离
鉴定
抑菌能力
固态发酵
原文传递
题名
棘孢木霉Myb27转录因子基因特性分析、原核表达及产物纯化
1
作者
韩静
安一博
季世达
田桢
刘志华
机构
东北林业大学林学院
东北林业大学林木遗传育种国家重点实验室
沈阳农业大学林学院
出处
《吉林农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第1期49-57,共9页
基金
国家自然科学基金项目(31870627)
沈阳农业大学引进人才专项基金项目(XLYC2002044)。
文摘
以棘孢木霉CGMCC11653菌株菌丝体总RNA反转录的cDNA为模板,克隆全长717 bp转录因子Myb27基因编码序列,其编码238氨基酸组成的多肽。用生物信息学软件预测蛋白的理化性质、结构域并进行亚细胞定位、氨基酸多序列比对和进化关系分析,结果表明:其相对分子质量为27000,属于Myb-like DNAbinding结构域的蛋白,亚细胞定位在细胞核中。链格孢菌毒素诱导条件下Myb27的表达有显著变化,可能参与棘孢木霉抗链格孢菌毒素胁迫应答反应的正向调控。构建原核表达载体pMAL-Emyb27,转化大肠杆菌ER2523获得转化子ER2523-Emyb27,其成功诱导的最适条件为0.1 mmol/L IPTG 37℃连续诱导培养3 h;用PBS+10 mmol/L麦芽糖洗脱层析柱可得到与MBP标签融合的单一可溶性69500重组rMyb27蛋白。可见Myb27转录因子调控抗病基因的表达所结合的顺式作用元件提供体外重组蛋白,为调控棘孢木霉抗杨树叶枯病链格孢菌毒素胁迫的机理提供理论依据。
关键词
棘孢木霉
转录因子
链格孢菌
毒素胁迫
特性分析
原核表达
Keywords
Trichoderma asperellum
transcription factor
Alternaria alternata
toxin stress
characteristic analysis
prokaryotic expression
分类号
S763.1 [农业科学—森林保护学]
原文传递
题名
新疆野苹果根围木霉分离鉴定及生防特性研究
被引量:
3
2
作者
方圆
季世达
王玉成
周畅
刘志华
机构
东北林业大学林学院
林木遗传育种国家重点实验室
中国科学院新疆生态与地理研究所
出处
《西部林业科学》
CAS
北大核心
2019年第6期105-113,共9页
基金
国家重点研发计划(“十三五”)“天山北坡退化野果林生态保育与健康调控技术(2016YFC0501505)”
文摘
为了给防治新疆野苹果病害提供生防性能优良的木霉菌株,利用孟加拉红平板分离法进行新疆巩留县野苹果根围木霉菌株分离,通过形态特征和ITS rDNA序列比对进行菌种鉴定,利用平板对峙试验检测分离木霉抑菌能力,用NBT染色和根部观察检验木霉诱导后新疆野苹果幼苗叶片活性氧含量、抗病和促生能力。结果表明:分离鉴定出俄罗斯木霉22株,渐绿木霉13株,哈茨木霉4株。从长势和产孢量等特性上看,俄罗斯木霉T7和哈茨木霉T2为新疆野苹果根围优势生防木霉菌种。哈茨木霉T2对尖孢镰刀菌的抑菌率为75.47%,对链格孢菌的抑菌率为78.17%。俄罗斯木霉T7对尖孢镰刀菌的抑菌率为79.66%,对链格孢菌的抑菌率为91.53%;NBT染色发现木霉处理后野苹果苗叶片活性氧含量降低,叶片染色颜色更浅。总之,木霉能有效抑制病原菌生长,能有效减少新疆野苹果幼苗中活性氧含量,促进和保护根系生长。本研究为防治新疆野苹果病害防治提供生防性能优良的木霉菌株,为苹果病害的生物防治提供可以借鉴的方法。
关键词
新疆野苹果
木霉菌
抗病原菌
促生长
Keywords
Malus sieversii
Trichoderma spp.
antifungal
growth promotion
分类号
S718.81 [农业科学—林学]
下载PDF
职称材料
题名
棘孢木霉天冬氨酸蛋白酶家族基因特性研究
被引量:
1
3
作者
王欣玉
王金杰
范海娟
窦恺
季世达
刘志华
机构
东北林业大学林学院
出处
《中国农学通报》
2018年第27期102-110,共9页
基金
哈尔滨市科技局科技创新人才计划,A类青年后备人才“设施蔬菜专用木霉菌肥中小规模固态发酵生产工艺研究”(2016RAQXJ087)
文摘
本研究旨对棘孢木霉基因组20个天冬氨酸蛋白酶家族基因(Asp)特性进行分析。分别进行了保守区及家族预测、氨基酸多序列比较及功能区预测、进化关系分析及其在不同培养条件下棘孢木霉中的差异表达分析。20个Asp均属Asp蛋白酶家族(PF00026),均为酸性(p I<7)。有18个Asps含有信号肽。多序列比对发现Asps含有2个特征性催化指纹"DTGS/A"和"DT/SGS/Y/T/A/N",根据第二个"DTGT"、"DSGT"、"DTGA/N"和"DSGY/T/S"特征性催化指纹,将20个Asps分为4个分支。进一步在C-hungry胁迫下,10个Asps基因上调,Asp54.2上调最高为3222。在N-hungry胁迫下,8个Asps基因上调,Asp50.9上调最高为33100。山新杨(Tas-Pd Pap)叶粉诱导后,13个Asps基因上调,Asp50.9上调最高为21078。说明棘孢木霉促杨树生长及与病原菌拮抗过程中,Asp起了非常重要的作用。
关键词
生物防治
棘孢木霉
天冬氨酸蛋白酶
生物信息学分析
差异表达
Keywords
bio-control
Triehoderma asperellum
aspartic proteases
bioinformatics analysis
differential expression
分类号
S763.15 [农业科学—森林保护学]
下载PDF
职称材料
题名
新疆野果林木霉分离鉴定、抑菌作用及固态发酵配方优化
被引量:
5
4
作者
田桢
曹传旺
季世达
刘斌
刘志华
机构
东北林业大学林学院
沈阳农业大学林学院
中国科学院新疆生态与地理研究所
出处
《微生物学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第12期4696-4709,共14页
基金
国家重点研发计划(2016YFC0501505)
国家自然科学基金面上项目(31870627)。
文摘
【背景】新疆野苹果病害发生严重,而木霉(Trichoderma spp.)是重要的植物病害生防菌,因此可利用其对新疆野苹果病害进行防治。【目的】分离鉴定新疆野果林木霉菌株,分析其对新疆野苹果2种病原菌的抑菌能力,为新疆野苹果专用木霉菌肥的制备提供菌种资源。【方法】利用平板稀释法对新疆野果林4种草本植物根围木霉菌进行分离,通过形态学与分子生物学方法进行菌种鉴定,平板对峙试验检测其抑菌能力并优化木霉菌株的固态发酵配方。【结果】共分离得到2种木霉菌共42株,分别为34株棘孢木霉(T.asperellum)和8株深绿木霉(T.atroviride);棘孢木霉TasT01对苹果炭疽病菌(Colletotrichum gloeosporioides,Cgl)和苹果斑点落叶病病原菌(Alternaria alternariaf.sp.mali,Aal)的抑菌率分别为58.60%和57.14%;深绿木霉TatT35对Cgl和Aal的抑菌率分别为43.86%和36.90%。进一步显微镜观察发现,TasT01可通过菌丝缠绕的方式抑制2种病原菌的生长。TatT35菌株固态发酵配方为稻壳90%、麦麸10%、(NH_(4))_(2)SO_(4)0.5%时,孢子浓度达1.0×10^(8)个/g。【结论】TasT01和TatT35对新疆野苹果2种病原菌都有很好的抑制效果,固态发酵配方优化后可以提高孢子浓度,该研究结果为新疆野苹果真菌病害的生物防治提供了可借鉴的方法。
关键词
木霉菌
新疆野苹果
分离
鉴定
抑菌能力
固态发酵
Keywords
Trichoderma
Xinjiang wild apple
isolation
identification
antifungal ability
solid state fermentation
分类号
TQ446 [化学工程—化学肥料工业]
TQ920.1 [轻工技术与工程—发酵工程]
S476.1 [农业科学—农业昆虫与害虫防治]
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被引量
操作
1
棘孢木霉Myb27转录因子基因特性分析、原核表达及产物纯化
韩静
安一博
季世达
田桢
刘志华
《吉林农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2024
0
原文传递
2
新疆野苹果根围木霉分离鉴定及生防特性研究
方圆
季世达
王玉成
周畅
刘志华
《西部林业科学》
CAS
北大核心
2019
3
下载PDF
职称材料
3
棘孢木霉天冬氨酸蛋白酶家族基因特性研究
王欣玉
王金杰
范海娟
窦恺
季世达
刘志华
《中国农学通报》
2018
1
下载PDF
职称材料
4
新疆野果林木霉分离鉴定、抑菌作用及固态发酵配方优化
田桢
曹传旺
季世达
刘斌
刘志华
《微生物学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2021
5
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