抗菌肽Melectin对急性败血症患者铜绿假单胞菌临床分离株的体外抗菌活性分析

目的研究Melectin对急性败血症临床分离株铜绿假单胞菌(PA)的体外抗菌活性。方法随机收集安徽理工大学第一附属医院急性败血症临床PA分离株,其中铜绿假单胞菌的多重耐药菌(Extreme-drugresistant Pseudomonasaeruginosa,MDRPA)10株,非耐药铜绿假单胞菌(Non-Extreme-drugresistantPseudomonasaeruginosa,Non-MDRPA)25株。应用微量肉汤稀释法检测Melectin对PA的体外最低抑菌浓度(minimum inhibitoryconcentration,MIC);选取MDRPA和Non-MDRPA的代表株各1株(MIC为16μg/mL),检测4×MIC浓度Melectin(64μg/mL)的杀菌动力学,并分别加入4,8,16μg/mLMelectin后,定时测定其600 nm处吸光度并绘制生长曲线。结果Melectin在体外条件下对MDRPA和Non-MDRPA均表现出良好的体外抗菌活性:Melectin抗MDRPA的MIC为16μg/mL,Non-MDRPA的MIC为16μg/mL,两组MIC差异无统计学意义(P>0.05)。4×MIC的Melectin在60 min时可以杀灭49.82%的MDRPA和53.33%的Non-MDRPA。体外培养24 h,Melectin浓度在低于MIC时(浓度为0、4、8μg/mL),MDRPA的生长基本不受影响。而Non-MDRPA在0、4μg/mL浓度下不受Melectin抑制,在半数MIC既8μg/mL浓度下,虽然0~15 h时细菌生长受到抑制,但在15 h后细菌呈快速生长趋势。在MIC浓度(16μg/mL)Melectin进行作用时,MDRPA和Non-MDRPA均不再生长。结论Melectin体外条件下可以有效抑制PA急性败血症临床分离株的生长,有望发展成为一种新型抗菌药物。

铜绿假单胞菌多黏菌素异质性耐药及联合药敏研究

目的明确多黏菌素（colistin）在多重耐药铜绿假单胞菌中的异质性及体外联合药敏情况。方法选择297株碳青霉烯类耐药铜绿假单胞菌，采用微量肉汤稀释法测定多黏菌素等抗菌药物的最低抑菌浓度（MIC）。采用群体谱分析方法分析多黏菌素敏感菌株的多黏菌素异质性，并分析部分菌株的杀菌曲线。采用棋盘法判断多黏菌素与亚胺培南、美罗培南、比阿培南、头孢他啶、左氧氟沙星、哌拉西林／他唑巴坦和头孢哌酮／舒巴坦的联合抑菌效应。结果药物敏感性试验提示99．66％的菌株对多黏菌素敏感。群体谱分析提示异质性耐药菌株比例为35％（7／20株），具有异质性的菌株比例为20％（4／20株）。联合药敏提示多黏菌素联合用药对异质性耐药菌株的作用以协同和相加为主，而对无异质性的菌株则主要表现为相加和无关作用。结论多重耐药铜绿假单胞菌对多黏菌素的敏感性很高，但异质性及异质性耐药现象较为普遍。多黏菌素与其他多种抗菌药物联合对异质性耐药菌株的作用增强。

拉氧头孢对肠杆菌科细菌及厌氧菌的体外抗菌活性观察

目的观察拉氧头孢对肠杆菌科细菌及厌氧菌的体外抗菌活性，并与其他抗菌药物进行比较，为临床合理应用拉氧头孢提供实验依据。方法根据美国临床和实验室标准协会（CLSI）（2014版）标准，采用琼脂稀释法和Etest法测定拉氧头孢及其他抗菌药物对491株临床分离的肠杆菌科细菌和厌氧菌的最低抑菌浓度（MICs值）。结果拉氧头孢对大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、变形杆菌、肠杆菌属及其他肠杆菌科细菌均具有较好的抗菌活性（包括ESBLs大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌及变形杆菌），其MIC50范围均在0．25—4mg／L之间，MIC90范围均在0．5～8mg／L之间，敏感率均在90％以上；产ESBLs与非产ESBLs的肠杆菌科细菌对亚胺培南及美罗培南的敏感率均在90％以上；产ESBLs的大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、变形杆菌对哌拉西林／他唑巴坦和头孢哌酮／舒巴坦的敏感率分别为90％、68％、53％和76％、66％、76．6％；而非产ESBLs细菌对哌拉西彬他唑巴坦和头孢哌酮／舒巴坦的敏感率在均95％以上；肠杆菌属细菌及其他肠杆菌科细菌对哌拉西林／他唑巴坦的敏感率分别为80％、80％，对头孢哌酮／舒巴坦的敏感率分别为80％、76．7％。拉氧头孢对厌氧菌的MICs范围为≤0．064-〉256mg／L，MIC50为2mg／L，MIC90为64mg／L。结论拉氧头孢对产与不产ESBLs的肠杆菌科细菌以及厌氧菌均具有较好的体外抗菌活性。

磷霉素和替加环素对产肺炎克雷伯菌碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌的联合药物敏感试验

目的：评价磷霉素和替加环素对产肺炎克雷伯菌碳青霉烯酶（KPC 酶）肺炎克雷伯菌的体外联合抗菌效应并研究其对磷霉素的耐药机制。方法微量肉汤稀释法分别测定磷霉素和替加环素单药对42株肺炎克雷伯菌（20株产 KPC 酶，22株 KPC 酶阴性）的最低抑菌浓度（MIC）。采用棋盘法设计测定不同浓度组合的抗菌药物的联合药物敏感试验，计算分级抑菌浓度指数（FICI）并判定联合效应。FICI＝MIC磷霉素联合/MIC磷霉素单药＋MIC替加环素联合/MIC替加环素单药。相关判读标准：FICI≤0．5为协同作用，0．5＜FICI≤1．0为相加作用，1＜FICI≤2为无关作用，FICI＞2为拮抗作用。对磷霉素耐药的产 KPC酶肺炎克雷伯菌进行常见磷霉素耐药基因筛选。数据比较采用 t 检验。结果产 KPC 酶肺炎克雷伯菌对磷霉素的敏感率为35．0％（7/20），替加环素敏感率为70．0％（14/20）。联合用药后，敏感率分别增至50．0％（10/20）和95．0％（19/20），且各自 MIC 值均有所下降。替加环素在联合后 MIC 值下降明显，与单药 MIC 比较差异有统计学意义（t＝-2．596，P ＝0．013），而磷霉素联合前后 MIC 比较差异无统计学意义（t ＝-1．274，P ＝0．211）。FICI 显示，2种抗菌药物的协同、相加效应共计60％，无关效应占40％，未发现拮抗作用。22株 KPC 酶阴性菌株2种抗菌药物联合无关作用占54．5％，相加、协同效应分别为31．8％和13．6％，无拮抗作用。2株携带 fosA 耐药基因的菌株，其 fosA 与 KPC 酶基因均定位于同一质粒上，质粒分别为138．9 kb 与104．5 kb。结论产 KPC 酶肺炎克雷伯菌对替加环素敏感性较高。替加环素联合磷霉素以协同作用和相加作用为主，提示该联合用药方案对产 KPC 酶肺炎克雷伯菌具有一定的抑制效应。

诺卡菌病的实验室诊断重要性

诺卡菌（Nocardia）是一种腐生型细菌，广泛存在于自然界。该菌是一类机会致病菌，主要通过呼吸道或外伤进入人体内，引起肺部、皮肤甚至全身的急慢性化脓性或肉芽肿性病变。诺卡病（Nocardiosis）是由诺卡菌感染引起的一种少见疾病，临床表现与肺结核病、恶性肿瘤等的症状相似，容易造成误诊．且诺卡菌与分枝杆菌具有相似的染色特征、形态特征和培养特征。故及时、准确地诊断出诺卡菌．对疾病的确诊、治疗及预后有着重大意义。