一链双靶siRNA对皮肤鳞状细胞癌NET-1和Survivin基因表达及增殖和凋亡的影响研究

目的:探讨一链双靶siRNA对人皮肤鳞癌细胞株(A431)NET-1和Survivin基因的抑制作用以及对细胞增殖、凋亡的影响。方法:构建siRNA NET-1、siRNA Survivin以及同时靶向NET-1和Survivin基因的一链双靶siRNA。采用免疫共沉淀法检测NET-1和Survivin蛋白在A431人皮肤鳞癌细胞中的相互作用。将A431细胞分为siRNA-NET-1组、siRNA-Survivin组、siRNA-NET-1&Survivin组、siRNA-NC组和control组,分别进行细胞转染。qRT-PCR和Western Blot法分别检测细胞内NET-1、Survivin mRNA和蛋白表达,细胞免疫荧光法观察NET-1、Survivin蛋白在细胞内的表达及定位。CCK-8法和流式细胞仪分别检测细胞增殖与凋亡情况。结果:免疫共沉淀法证实NET-1和Survivin蛋白有相互作用。qRT-PCR和Western Blot结果显示,siRNA-NET-1&Survivin组、siRNA-NET-1组和siRNA-Survivin组细胞中NET-1和Survivin mRNA和蛋白表达水平均低于siRNA-NC组及control组,siRNA-NET-1&Survivin组低于siRNA-NET-1组和siRNA-Survivin组,差异均有统计学意义(P<0.05)。CCK-8法检测显示,siRNA-NET-1&Survivin组、siRNA-NET-1组和siRNA-Survivin组细胞增殖水平低于siRNA-NC组和control组,siRNA-NET-1&Survivin组低于siRNA-NET-1组和siRNA-Survivin组,差异均有统计学意义(P<0.05)。流式细胞仪检测显示,siRNA-NET-1&Survivin组、siRNA-NET-1组和siRNA-Survivin组细胞凋亡率高于siRNA-NC组和control组,siRNA-NET-1&Survivin组高于siRNA-NET-1组和siRNA-Survivin组,差异均有统计学意义(P<0.05)。细胞免疫荧光显示,siRNA-NET-1&Survivin组、siRNA-NET-1组和siRNA-Survivin组NET-1和Survivin蛋白表达阳性细胞百分率低于control组,siRNA-NET-1&Survivin组低于siRNA-NET-1和siRNA-Survivin组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:NET-1和Survivin蛋白存在相互作用,靶向NET-1和Survivin的一链双靶siRNA能同时下调A431细胞NET-1和Survivin基因表达,并能抑制A431细胞增殖,促进细胞凋亡,一链双靶siRNA作用效果优于单靶siRNA。

光动力疗法联合外科手术对皮肤鳞状细胞癌患者生活质量的影响观察

目的 研究光动力疗法联合外科手术治疗皮肤鳞状细胞癌(CSCC)的效果及对患者生活质量的影响。方法 将诊治的100例CSCC患者按随机数字表法分为对照组和研究组各50例。对照组行外科手术治疗,研究组于外科手术基础上采用光动力疗法治疗,比较两组治疗效果、复发率及治疗前后血清相关指标[鳞状细胞癌相关抗原(SCCA)、细胞角蛋白19片段(CYFRA21-1)]水平、生活质量。结果 研究组总有效率(92.00%)较对照组(76.00%)高(P<0.05)。治疗后,研究组血清SCCA、CYFRA21-1水平较对照组低(P<0.05);生活质量评分较对照组高(P<0.05)。治疗后6个月内,研究组复发率比对照组(2.00%VS 16.00%)低(P<0.05)。结论 光动力疗法联合外科手术治疗CSCC的效果显著,可有效下调患者血清SCCA、CYFRA21-1水平,提升生活质量,减少复发率。

在校企合作中提升研究生的创新能力

通过校企合作途径,优化研究生培养模式,提高了研究生创业、创新和创造能力。实践表明校企合作进行研究生培养,能满足高等教育发展、企业单位及学生求知、就业的需求,实现由封闭的教学模式向开放模式转变及学历型教育向能力型教育的转变。

光动力治疗通过细胞自噬调控增强皮肤鳞状细胞癌的治疗效果

目的:探讨光动力治疗(photodynamic therapy,PDT)对皮肤鳞状细胞癌的效应及细胞自噬在其中的作用。方法:在皮肤鳞状细胞癌细胞A431中,通过噻唑蓝(methylthiazolyldiphenyl-tetrazolium bromide,MTT)法检测5-氨基酮戊酸(5-aminolevulinic acid,ALA)-PDT对细胞增殖的影响,并进一步研究自噬抑制剂3-甲基嘌呤(3-methyladenine,3-MA)或自噬诱导剂5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)联合ALA-PDT对细胞增殖的影响。Hoechst染色观察3-MA或5-FU联合ALA-PDT对A431细胞凋亡的影响,并用实时定量聚合酶链式反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测凋亡相关基因如Bax、Bcl2、Survivin的表达情况。3-MA或5-FU联合ALA-PDT处理A431细胞后,通过RT-qPCR检测细胞中自噬微管相关蛋白1轻链3(autophagy microtubule associated protein 1 light chain 3,LC3)的表达水平及透射电镜来监测细胞自噬的发生。结果:ALA-PDT可抑制A431细胞的增殖并可诱导发生细胞自噬。进一步发现3-MA或5-FU联合ALA-PDT也可显著抑制皮肤鳞状细胞癌细胞的增殖。3-MA或5-FU联合ALA-PDT处理A431细胞后,与未处理组相比,Hoechst染色检测显示细胞凋亡被显著诱导;RT-qPCR检测显示LC3和Bax表达上调、Bcl2和Survivin表达下调;透射电镜显示细胞自噬被显著诱导,影响程度:5-FU+ALA-PDT>ALA-PDT>3-MA+ALA-PDT。结论:自噬调节可能是ALA-PDT治疗的关键点,ALA-PDT联合3-MA或5-FU可能成为治疗皮肤肿瘤,尤其是皮肤鳞状细胞癌的新策略。

二氧化碳激光联合光动力治疗外阴尖锐湿疣临床效果观察及不良反应分析

目的:分析二氧化碳激光联合光动力治疗外阴尖锐湿疣的临床疗效和不良反应情况。方法:回顾分析2019年1月—2020年1月在南通大学附属医院皮肤科治疗的外阴尖锐湿疣患者160例,按治疗方法不同分为两组,每组80例。对照组采用二氧化碳激光治疗,观察组采用二氧化碳激光联合光动力治疗,统计3个月后的疗效及6个月后的复发率。结果:治疗3个月后,观察组的有效率为93.75%,对照组为70.00%(P<0.05)。6个月后随访观察组的复发率(6.25%)明显低于对照组(26.25%)(P<0.05),观察组疼痛评分显著低于对照组,不良反应消退时间及创面愈合时间均短于对照组(均P<0.05)。结论:二氧化碳激光联合光动力治疗外阴尖锐湿疣临床效果显著,能明显改善临床复发率,缓解患者疼痛,加速患者创面愈合,值得临床推广应用。

角色扮演法在临床皮肤病见习教学中的应用

目的:探讨角色扮演法在临床皮肤病见习教学中的效果。方法:在皮肤科实习的120例临床医学本科生,随机分为观察组和对照组各60例。对照组采用传统教学法带教,观察组采用角色扮演法结合传统教学法带教。比较两组学生对教学效果认同度、对教学模式满意度以及理论和见习考试成绩。结果:观察组对教学效果8个方面的认同度高于对照组,差异均具有统计学意义(P<0.01);观察组对教学模式满意度为96.67%,高于对照组的77.33%,差异有统计学意义(P<0.05);观察组理论考试和见习考试成绩分别为89.0±2.6分和96.6±2.2分,高于对照组的74.7±3.1分和86.5±4.4分,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:临床皮肤病见习教学中引入角色扮演法可显著提高临床医学生的皮肤病理论考试和见习考试成绩,增强综合分析问题能力,培养临床沟通技巧,受到学生普遍欢迎和认同。

T细胞亚群及其细胞因子在寻常型银屑病中的作用机制研究

目的探讨T细胞亚群及其细胞因子在寻常型银屑病发病中的作用机制。方法连续性收集2014年1月至2016年2月该院门诊诊治的寻常型银屑病患者50例作为研究组,同期收集50例至该院体检的健康成人50例作为对照组。观察两组患者外周血中Th17细胞、Treg细胞,白细胞介素(IL)-2、IL-10、转化生长因子(TGF-β)、IL-17和IL-23。结果与对照组比较,研究组患者Th17细胞显著增加[(0.28±0.08)%vs.(0.88±0.14)%,P=0.000];Treg细胞显著减少[(6.27±2.47)%vs.(3.85±1.27)%,P=0.000]。与对照组比较,研究组患者IL-2、IL-17、IL-23水平显著升高,IL-10、TGF-β显著降低(P<0.05)。银屑病患者PASI评分为(18.58±6.49)分。Pearson线性相关性分析显示PASI与Th17、IL-2和IL17显著正相关,与Treg和TGF-β显著负相关(P<0.05)。多元线性回归分析显示Th17、Treg和IL-17是影响银屑病患者PASI的免疫因素(P<0.05)。结论寻常型银屑病患者Th17、Treg细胞及相关细胞因子水平平衡失调,且与病情严重度相关。

手术结合大剂量干扰素治疗皮肤恶性黑色素瘤(CMM)的临床效果观察

观察手术结合大剂量干扰素治疗皮肤恶性黑色素瘤(CMM)的临床效果。方法 研究对象60例为2013年6月-2018年6月期间收治的CMM患者,入院后以电脑随机法分为A(n30,手术治疗)、B(n30,手术结合大剂量干扰素治疗)两组,并展开3年随访调查,同时将近期及远期疗效、血清MMP-2与MMP-9指标水平、生活质量评分及进行组间对比分析。结果 B组近期临床疗效(90.00%)高于A组66.67%),对比(x24.811,P<0.05)。B组1、2、3年远期生存率(96.67%、83.33%、76.67%)高于A组的(76.67%、60.00%、33.33%),对比(x25.192、4.021、11.380,P<0.05)。B组治疗后血清MMP-2及MMP-9指标水平(41.11±5.33ng·ml-1、91.38±5.91ng·ml-1)均较A组的(49.01±6.47ng·ml-1、104.84±6.67ng·ml-1)更低,对比(t5.161、8.273,P<0.05)生活质量量表评分B组较A组更高,对比有统计学意义(P<0.05)。结论 手术结合大剂量干扰素治疗CMM可降低血清MMP-2与MMP-9水平,并提升近期临床疗效,确保远期生存率,同时积极影响生活质量水平,值得被进一步推广应用到临床。