急性白血病患者血浆肿瘤坏死因子及抑制物

利用ＴＮＦ细胞毒生物学活性检测法和ＴＮＦ抑制物（ＴＮＦＩＮＨ）生物活性检测法，检测２２例初治急性白血病患者体内ＴＮＦ和ＴＮＦＩＮＨ水平。急性白血病患者血浆ＴＮＦ水平明显增高。达１１．４２±６．０２ｕ／ｍｌ。抗人ＴＮＦ－α单抗能完全中和Ｍ＿４、Ｍ＿５、Ｍ＿６型急性非淋巴细胞白血病患者血浆ＴＮＦ活性。部分患者血浆中同时存在ＴＮＰ和ＴＮＦＩＮＨ。ＴＮＦ阴性的患者血浆中亦单独存在ＴＮＦＩＮＨ活性，和正常人相比明显增高。其对ｒｈＴＮＦα活性的抑制作用具有剂量依赖关系。测定急性白血病患者体内ＴＮＦ及ＴＮＦＩＮＨ可能为急性白血病的分型和治疗提供新线索。

奈瑟氏淋球菌表面蛋白A基因克隆及在真核细胞中的表达研究

为了研制奈瑟氏淋球菌外膜蛋白—奈瑟菌表面蛋白A(NeisseriasurfaceProteinA ,NspA)的核酸疫苗 ,根据淋球菌NspA的基因序列 ,设计一对寡核苷酸引物。以淋球菌WHO A菌株基因组DNA为模板 ,通过PCR扩增获得具有完整开放读码框架 (ORF)的NspA基因 ,并将其正向插入真核表达载体pCMVscript,成功构建了表达NspA基因的真核细胞表达载体pcNspA。用脂质体包裹pcNspA重组质粒转染COS细胞 ,以间接免疫荧光分析法分析NspA基因的表达 ,发现转染pcNspA的COS细胞能高表达NspA抗原。淋球菌免疫保护性抗原NspA基因的克隆与真核细胞表达 。

耐药淋球菌差异DNA消减文库的构建

为克隆和研究淋球菌耐药相关基因,分别从耐药性淋球菌菌株RSM292C4和WHO标准参考淋球菌株WHO-A细胞中提取DNA,用Rsa 酶切成400～600bp的片段。将酶切耐药菌株基因DNA片段分别与不同的接头连接,再与标准参考菌株DNA进行消减杂交及抑制性PCR检测,将所得PCR产物与克隆载体连接,构建差异DNA消减文库,并转染大肠杆菌进行文库扩增,获得2500个克隆。随机挑取96个制备质粒进行PCR检测,均扩增出100～600bp大小的片段。耐药淋球菌差异DNA消减文库的构建为进一步筛选、克隆耐药淋球菌特异的未知新基因奠定了基础。

Ⅰ型单纯疱疹病毒(HSV—Ⅰ)体外抗体应答及IFNr的调节

以纯化、灭活的HSV-I为抗原,体外致敏洗涤过的健康成人外周血淋巴细胞,37℃孵育12天,细胞培养上清中的特异性抗体用ELISA法测定。11例血清HSV-I抗体阳性成人的淋巴细胞接受灭活HSV-I抗原致敏后,培养上清中均能检出特异性抗体,抗体类型为IgG(26.6土23ng/m1),体外产生的特异抗体水平与原血清抗体水平无相关性(R=0.45,P>0.05)。同法刺激新生儿淋巴细胞;不能诱生任何类型的HSV-I抗体。在本实验系统中,特异性抗体应答是一个蛋白质的全新(de novo)合成过程,应答水平和体外致敏用的病毒抗原量有明显剂量依赖关系,最适刺激抗原量为108ng/ml。HSV-I抗体应答需要T、B细胞的相互作用,两类细胞单独均不能诱导特异性HSV-I抗体应答。在本实验系统中加入适量重组人γ干扰素,能增强抗体应答水平,过高剂量起抑制作用。

体外致敏制备人单克隆抗体研究现状

体外致敏人淋巴细胞,诱生大量抗原特异性B 细胞和骨髓瘤细胞融合,这是人单抗制备研究中的一项关键步骤。体外致敏提高了杂交瘤形成率和抗体分泌稳定性,推动了人单抗研究的进展。成功的体外致敏有赖于淋巴细胞来源、细胞组成、抗原性质和剂量、血清、分裂原、生长因子、佐剂、免疫时程等因素。本文就近年来这方面的研究现状作一介绍。

HSV－I感染人单核细胞诱生肿瘤坏死因子α

以纯化ＨＳＶ－Ｉ感染人外周血单个核细胞，发现ＨＳＶ－Ｉ可感染粘附活化的单核细胞和经ＰＨＡ活化的淋巴细胞，并诱导细胞毒因子分泌。ＬＰＳ诱导ＴＮＦ抑制剂多粘菌素Ｂ不能阻断ＨＳＶ－Ｉ感染单核细胞分泌细胞毒因子，但紫外线灭活的ＨＳＶ－Ｉ不能诱导单核细胞分泌细胞毒因子。用重组人ＴＮＦａ中和抗体能完全中和ＨＳＶ－Ｉ感染单核细胞培养上清中的细胞毒活性，表明其中含有的细胞毒因子为ＴＮＦａ。而重组人ＴＮＦａ中和抗体对ＨＳＶ－Ｉ感染的ＰＨＡ活化淋巴细胞上清中的细胞毒活性无明显影响，其细胞毒因子可能大多为淋巴毒素（ＴＮＦβ）。

结肠直肠癌患者PBL、LNL、TIL免疫功能的比较研究

目的 :研究结肠直肠癌患者外周血淋巴细胞、肿瘤浸润淋巴细胞、肿瘤引流淋巴结淋巴细胞的免疫学功能 ,为研究结肠直肠癌患者的过继性细胞免疫治疗积累实验资料。方法 :比较结肠直肠癌患者不同来源淋巴细胞的细胞表型、NK活性、LAK活性、特异性细胞毒活性、体外增殖反应等特征。结果 :结肠直肠癌患者PBL、LNL、TIL在免疫功能上有较大差别。从结肠直肠癌患者肿瘤原位新鲜分离的LNL和TIL的NK活性、LAK活性和特异性细胞毒活性均明显低于PBL。PBL中含有较多的NK细胞 ,LNL中含有较多的B细胞和CD4+ 细胞 ,PBL和无肿瘤转移的LNL的细胞增殖能力明显高于TIL和有肿瘤转移的LNL。结论 :一般情况较好的结肠直肠癌患者外周血淋巴细胞的免疫学指标和正常人PBL相比基本正常。

淋球菌外膜抗原的免疫原性

淋球菌的唯一宿主是人 ,在漫长的进化过程中淋球菌形成了一套逃避人体免疫系统的机制。尽管如此 ,人们却一直试图筛选有保护作用的淋球茵外膜抗原用于疫苗研究 。

肿瘤坏死因子α与流产的研究进展

在不明原因流产中应考虑免疫因素的作用。目前已认识到孕妇体内和胎盘局部的TNFα和可溶性TNFα受体均是妊娠过程中的重要调节因子,对流产具有重要影响。

扩增片段长度多态性技术对淋球菌的基因分型

目的 :评价扩增片段长度多态性技术 ( AFL P)分析对淋球菌分离株进行基因分型的能力。方法 :2 6株淋球菌分离株基因以 Eco RI和 Mes I酶切及 AFL P分析。结果 :同一地区的淋球菌分离株之间存在相当大的 DNA多态性。结论 :AFL P是鉴别淋球菌临床分离株有用而敏感的分子技术 ,有助于了解菌株来源。

论综合性大学医学教育面临的发展机遇

医学院校加盟综合性大学,改变了过去大学单纯以文理科为支撑的局面,同时给我国医学教育发展带来了良机。如何将医学教育有机地融入综合性大学,发挥综合性大学的优势,不断发展医学教育,需要我们正确认识综合性大学医学教育所面临的发展机遇。

耐药淋球菌相关核苷酸序列的克隆与初步分析

为克隆淋球菌染色体耐药相关核苷酸序列 ,我们利用抑制性消减杂交技术构建耐药性淋球菌与标准参考菌株差异DNA消减文库 ,从中筛选淋球菌耐药相关核苷酸序列。通过初步筛选 ,对克隆得到的DNA片段进行测序 ,经GenBank和淋球菌基因组序列库检索分析 ,发现 5个未知新核苷酸序列。这些核苷酸序列可能与淋球菌染色体耐药性相关 ,将为研究淋球菌耐药性提供新的实验对象。

淋球菌AFLP基因分型的初步研究

采用扩增片段长度多态性技术(AFLP)对奈瑟氏淋球菌菌株进行基因分型研究。以EcoRI和MesI酶切26株淋球菌临床分离株基因组,并进行AFLP分析。同一地区的淋球菌分离株之间存在相当大的DNA多态性。AFLP是鉴别淋球菌临床分离株有用而敏感的基因分型技术,有助于了解流行淋球菌菌株的来源、流行菌株之间的克隆相关性,以及抗生素耐药性菌株的传播情况。

淋病奈瑟菌耐药性的分子基础初探

目的 : 研究染色体介导淋病奈瑟菌耐药的机制。方法 : 应用抑制性消减杂交技术构建和筛选耐药淋病奈瑟菌差异DNA消减文库。结果 : 从削减文库中随机挑取的 96个克隆 ,发现其中有 47个克隆仅能与testerDNA探针杂交 ,而不能与driverDNA探针杂交。结论 : 这些克隆中载有特异基因片段 ,它们为RSM2 92C4基因组DNA所特有 ,可能代表某些淋病奈瑟菌新基因。

奈瑟氏淋球菌DNA的AFLP指纹图谱

目的 :评价扩增片段长度技术 (AFLP)分析对淋球菌分离株进行基因分型的能力。方法 :2 6株淋球菌分离株基因以EcoRI和MesI酶切及AFLP分析。结果 :同一地区的淋球菌分离株之间存在相当大的DNA多态性。性伙伴之间分离的淋球菌菌株同源性大于 95 % ,无性关系患者中分离的淋球菌菌株同源性为 70 %～ 95 % ,而不同地点分离株、WHO参考株均不能和本地区分离株聚类。结论 :AFLP是鉴别淋球菌临床分离株有用而敏感的分子技术 ,有助于了解菌株来源。

淋病奈瑟菌孔蛋白疫苗研究进展

淋病奈瑟菌孔蛋白具有较强的免疫原性和相对缓慢的抗原变异性。近年来,淋病奈瑟菌孔蛋白结构、抗原性及其影响因素等方面的研究进展推动了该菌疫苗的研究。

结肠癌瘤细胞对不同来源自体淋巴细胞的影响

[目的]研究结肠癌瘤细胞对自体肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)、肿瘤引流淋巴结的淋巴细胞(LNL)、外周血淋巴细胞(PBL)的影响。[方法]比较结肠癌患者自体肿瘤细胞对体外培养TIL、PBL、LNL细胞增殖、诱生细胞因子IL鄄2、TNF鄄α、IFN鄄γ水平的影响。[结果]结肠癌患者的TIL和PBL、LNL相比,CD8+细胞增加,CD4+细胞数减少。PBL和LNL对PHA、rhIL鄄2刺激产生的细胞增殖能力比TIL强。PBL能产生较高水平的TNF鄄α和IFN鄄γ,而IL鄄2产生水平较低;LNL产生高水平的TNF鄄α和IL鄄2,但仅产生低水平的IFN鄄γ。TIL产生的TNF鄄α、IFN鄄γ水平较PBL、LNL低。[结论]结肠癌患者自体肿瘤细胞对不同来源淋巴细胞的细胞因子分泌有不同影响,PBL可能是结肠癌过继性细胞免疫治疗较为理想的CTL前体细胞来源。

白细胞介素7(IL-7)的研究概况

长期培养的骨髓基质细胞分泌一种独立的细胞因子,能促进前体B 细胞增殖,现统一命名为白细胞介素7(IL-7)。本文综述了近两年来IL-7的编码基因、基因产物和生物活性等方面的研究概况,并就其研究和应用前景作了展望。

结肠癌患者自体瘤细胞对不同来源淋巴细胞功能的影响

目的 :研究结肠癌患者自体瘤细胞对肿瘤浸润淋巴细胞、肿瘤引流淋巴结的淋巴细胞、外周血淋巴细胞的影响。方法 :比较结肠癌患者自体肿瘤细胞对体外培养TIL、PBL、LNL细胞增殖、诱生细胞因子 (IL - 2、TNFα、IFNγ)水平的影响。结果 :发现结肠癌患者的TIL和PBL、LNL相比 ,CD8+细胞增加 ,CD4+细胞数减少。PBL和LNL对PHA、rhIL - 2刺激产生的细胞增殖能力比TIL强。PBL能产生较高水平的TNFα 和IFNγ,而IL - 2产生水平较低 ;LNL产生高水平的TNFα 和IL - 2 ,但仅产生低水平的IFNγ。TIL产生的TNFα、IFNγ 水平较PBL、LNL低。实验结果表明结肠癌患者自体肿瘤细胞对不同来源淋巴细胞的细胞因子分泌有不同影响 ,其机制有待进一步研究。