陆地棉色素腺体与不同棉酚旋光体含量之间的相关性研究

【目的】研究不同基因型棉花不同器官的色素腺体与棉酚旋光体含量之间的相关性。【方法】以6个陆地棉材料中棉所12、中棉所12(无)、珂字棉312、珂字棉312(无)、IF11和冀棉14为对象,精确测定主要器官的色素腺体密度和大小,并采用柱前衍生拆旋方法进行高效液相色谱分析,测定其相应的棉酚旋光体含量,然后对色素腺体和棉酚旋光体含量进行相关性分析。【结果】低酚棉全株无色素腺体,但在各器官中仍能检测到低于0.02%(质量分数)的少量游离棉酚存在。有酚棉各器官均具有典型的色素腺体,其中棉仁的色素腺体最密,苞叶最稀;色素腺体大小(直径)以铃壳最大,花瓣和棉仁最小。不同器官中,总棉酚含量以棉仁最高,苞叶最小;棉仁和花瓣的右旋棉酚含量大于左旋棉酚,而萼片、铃壳、上部叶、中部叶和下部叶的左旋棉酚含量大于右旋棉酚。有酚棉的色素腺体密度与大小之间呈极显著负相关;而总棉酚含量与不同棉酚旋光体含量之间,以及左右旋棉酚含量之间呈极显著正相关。色素腺体密度与总棉酚含量以及不同棉酚旋光体含量之间呈极显著的正相关,而色素腺体大小与右旋棉酚含量之间呈显著的负相关。【结论】棉仁与花瓣的总棉酚含量存在高度的相关性,因此,可以通过花瓣的棉酚含量来判断棉仁的棉酚含量。

棉酚旋光体柱前衍生化-HPLC分析与4个栽培棉种之间棉酚含量比较

采用2%D-氨基丙醇+10%冰醋酸+88%乙腈作为棉酚提取和衍生化试剂对消旋棉酚和棉花样品进行热衍生化处理,用C18色谱柱和乙腈流动相进行高效液相色谱分析。该方法色谱结果表现为主峰清晰而杂峰少,左右旋棉酚出峰时间相差7 min,实验精度良好。用该方法对4个栽培种的25份材料的种仁和幼苗的根、茎、叶的左右旋棉酚含量进行了系统的检测。结果表明,海岛棉的种子和根系的总棉酚含量最高,其次是陆地棉;2个二倍体栽培棉种的种子和根系的总棉酚显著低于四倍体棉种,而2个二倍体栽培棉种的叶片总棉酚含量显著高于四倍体棉种。大多参试材料的种子和幼苗各部位的左右旋棉酚含量均有差异,其中海岛棉的左旋棉酚含量略高于右旋棉酚,陆地棉的右旋棉酚含量略高于左旋棉酚,而2个二倍体棉种的左旋棉酚只占总棉酚的1/3。无色素腺体棉的种仁和叶片中总棉酚含量极低,并以左旋棉酚为主,其种仁中只有左旋棉酚而无右旋棉酚;茎秆中总棉酚含量以及左右旋棉酚比例与一般有色素腺体常规棉相似,但根系中的总棉酚含量显著高于对应的有色素腺体棉,却以右旋棉酚为主。

AATS 2014现场直击:新闻背后的故事

科研时间第二期内容现场直击正在加拿大多伦多举行的美国胸心外科年会(AATS 2014),重点报道前线学术交锋热点以及重要人物专访。本文揭晓这些新闻的来历和背后的故事。

关于发行《世界卫生组织人类精液分析实验室技术手册》(第5版)的评论

祝贺各位编撰新版《世界卫生组织人类精液分析实验室技术手册》(简称手册)的作者。手册是推广男科学临床实践的重要工具。然而,手册中叙述的检测方法对预测男性生育力的作用有限,且无法揭示生育力低下的潜在原因。呼吁再次关注男性生育力诊断研究。生育能力应该视为一种连续性状,应放弃人为地将其分为有或没有生育力的做法。应以前瞻性研究数据为基础,开发出可预测生育力低下夫妇一年内妊娠可能性的流程,以指导今后复杂的治疗方案的制定。未来将期待建立检测不育潜在病理机制的方法,以开发个性化治疗手段。诸如氧化应激作用、细胞内调节功能缺陷及正在发展的蛋白质组学等前沿领域,均应进行相应的探索。

精液分析:新版《世界卫生组织人类精液分析实验室技术手册》及其在精液和精液病理学研究中的应用

评论最新的、全面的精液分析指南:第5版《世界卫生组织人类精液分析实验室技术手册》(简称手册)。该手册不但描述了精液分析中常规变量的测定方法,还描述了对精子功能检测具有重要价值但不常见的其他多种检测方法。手册记录了体外受精及宫腔内人工授精过程中精液处理的方法和技术,还详述了多种精液评价的实用技术。手册对进行精液分析的实验室均有指导意义。

精液分析:精子数目、形态及功能

新版《世界卫生组织精液分析实验室技术手册》(简称手册)较旧版有所改进。改进之一就是用较低的新参考值取代原来20×106/mL的精子密度参考值。新参考值是经过对配偶妊娠等待时间≤12个月的男性精液进行统计分析得出的。第3版和第4版手册中精子前向性运动分级的规定缺乏循证医学依据,因此应废除。但新版本中的评估方法也缺乏循证医学依据,其合理性令人难以理解。但为了避免重新使用第1版手册(1980)中的精子活动力评估系统,只能勉为其难地使用当前的方法。强行推荐所谓的"Tygerberg严格精子形态学标准"是因为委员会的部分成员偏袒该标准,并无循证医学依据。这种推荐将阻碍男科学这一科研领域的进步和发展。WHO手册相当重要,但遗憾的是其推荐的精子活动力及精子形态学等重要参数的评估标准仍缺乏循证医学的支持。

男科实验室质量保证和质量控制

质量保证（QA）和质量控制（QC）是所有实验室进行检测分析的基础。与其他医学学科相比，研究者最近才认识到男科实验室需要有QA和QC。此外，有证据表明，一些医生并不完全赞成尚需进行QA和QC的努力。然而，由于QA和QC是质量管理实施过程的中心环节，评审机构和监管部门越来越需要实验室制定有效的QA和QC措施。随着《世界卫生组织人类精液分析实验室技术手册》第5版的出版，该手册推荐的实验方法学已有相应的修改，现行的QA和QC体系也需作出一定程度的更新，以适应新的变化和要求。主要讨论该手册在3方面的变化，即：①建议根据精液质量推测体积。②精子活力等级由原来的4级改为3级。③将精子形态的参考值下限定为4％（95％CI为3％。4％）。还讨论了QC及QA在所有男科实验室检测中的重要性，包括即将开展的评估精子DNA完整性的实验。同时，阐述对从事男科学检验工作人员开展充分的初级培训与专业继续教育的必要性。

21世纪医学的精液分析:精子功能检测的必要性

精子功能检测曾经是不孕夫妇进行辅助生殖技术(ART)前普遍采取的检查。如今世界各地的生殖医学中心已忽视了这些检查。精子功能检测操作步骤的确已分组纳入最新出版的《世界卫生组织人类精液分析实验室技术手册》的"研究步骤"章节。这很大程度上反映了此现状,即当前临床实践忽略了对不孕夫妇中男方因素的深入检查。认为如果能找到精子,一定就是健康、具有受精能力的、可进行胞浆内单精子注射(ICSI)的精子。然而,通过精子功能测试,可揭示造成男性不育的精子缺陷,为不孕夫妇提供指导。诚然,在某些情况下,ART可克服某些精子功能缺陷,但在其他情况下,夫妇有权了解不孕不育的原因,甚至ICSI的成功率(和精子有关)。知晓这些,有助于其真正清楚自己的生育状态,以证实是否寻求供精人工授精、领养孩子或维持无子女状态。了解不孕的真正原因,有助于说服不孕夫妇放弃艰难又毫无结果的自然妊娠,更加坚定地选择ART治疗不育。

定义实验室参考值和决定限:人群,区间范围及其解读

简要概述多种分析人类精液检测结果的方法。参考区间(参考值范围)是最常用的解释临床实验结果的工具。参考值范围概念的发展,有赖于20世纪80年代临床化学专家国际联盟对这一概念的详尽阐述。这些指南要求:健康参考人群至少应包括120个健康个体,并对其进行分类,辨别最外延5%的参考值数据来确定双侧或单侧参考区间的界限值。最近,基于流行病学结果分析得出的决定限,也已用来解读分析检测结果。参考群体必须根据检验项目的临床使用要求严格定义:如果参考值范围用于评估男性生育能力,12个月内使配偶成功妊娠的男性应当是最合适的参考人群;如果用于精液检测结果的流行病学评估,随机选择的健康男性应该是最为理想的参考群体。虽然男性个体精液检测结果基于参考值和决定限无疑会在不久的将来成为解释结果的工具,但从长远看,解释精液检查结果的多因素方法或结合女性有关因素的分析,似乎是检测生育能力低下夫妇妊娠可能性的最佳方式。

提高人类精液中圆形细胞数量测定的精确度

本研究的目的是提高用过氧化物酶试验检测精液中的白细胞时所得的圆形细胞数量的精确度。精液样本的圆形细胞浓度在（0．6～6）×10^6／mL之间，降低精液的稀释度，增加被测悬浮液的体积。1＋5（1：6）的稀释度适合于测量过氧化物酶活性，并能为细胞检测提供足够清晰的背景。在该稀释度下，测定Neubauer-改良精子计数板两边所有18个网格中的细胞数量，额定细胞浓度为（1．9～3．3）×10^6／mL的10个样本中只有3个样本的圆形细胞数／〉400个。由于更低浓度的精子稀释液不适合测定圆形细胞或其过氧化物酶反应产物，所以无法精确测量（抽样误差5％）参考下限值（1×10^6／mL）。结果表明，正是由于测定精液中的10个样本中圆形细胞很难精确到1×10^6／mL，所以白细胞精液症临界值的确定一直存在诸多分歧。因此需要建立一些统计学上合理的参考限。

精液质量的正常参考值与男性生育能力

最近的研究表明:如果男性精液中精子密度低于40×106/mL,其生育能力就会随精子密度减少而相应下降。然而最新出版的《世界卫生组织人类精液分析实验室技术手册》第5版将正常精液密度的下限值,从原来的20×106/mL降低到15×106/mL。鉴于这一改动,全世界很大一部分生育能力低下的男性,将被认为"正常"而得不到适当的男科治疗。

人类精子形态学评估:理想形态,异常精子描述和生物识别

用于评估"理想"形态的精子比例的严格方法第5版《世界卫生组织人类精液分析实验室技术手册》(简称手册)推荐。这基于"理想"精子形态与生育力之间相关的统计学研究,以及目前一致认为精子形态的评估应该是研究生育力的主要手段。即使在可育男性的精子中"理想"形态精子所占比例也很低,但是"理想"精子形态的概念一直存在,这是一个备受争议的话题。在很长一段时间里认为,对各种异常精子进行详细分类是可选择的,甚至是多余的。该观点也反映在较早版本的世界卫生组织(WHO)手册中。然而,一些最近的研究表明,仔细评估异常精子形态对不孕症诊断、生育能力预测以及基础或公共健康研究有重要意义。一种将视频显微扫描技术和计算机视觉结合起来,并且是唯一能够评估精子生物统计学连续性的方法,已成功应用于最近的几个临床、基础和毒理学研究中。详细的精子形态的视觉评估(包括对异常精子分类得出的畸形精子指数)和更加现代的以计算机为基础的方法实际上是相辅相成的,虽然往往认为是多余的。要依据研究的领域(临床、基础、毒理学)和需要解决的问题选取最适当的方法。简要地讨论每种方法的优势以及某些限制。

《亚洲男性学杂志》“21世纪精液分析特刊”前言

精液分析成为不育研究的重要部分经历了一个极其漫长的历史变迁过程，并声名狼藉，曾经被排除在常规的病理学检查之外，直到近些年才引起学术界的重视。精液分析起源于19世纪，那时对精子的认识仅仅局限于检测性交后宫颈黏液中是否存在精子，曾认为是“有失体面的，不自重的^[1]。”

精子相关研究何去何从——实验精液学的未来

首先祝贺《世界卫生组织人类精液分析实验室技术手册》(简称手册)第5版的出版,这是迄今为止最完善的关于精液常规检测的手册。基于对1900名"新爸爸"的精液分析结果,WHO手册发布了有重要参考价值的精子质量检测参考值范围,还详细介绍了精子功能检测的方案,并增加了关于辅助生殖和冷冻保存时精液处理的新章节。该手册是关于精液常规检测的权威描述,有可能对该领域的未来以及手册未来发展版本的实验技术进行预测。如今,已可应用空前强大的分析技术检测包括精子在内的各类细胞的生化组成。事实上,精子是进行这种分析的完美载体,因为可获得非常纯净的精子悬液,精子天然游离存在,并可以在体外受精进而启动胚胎发育。在这些检测中各种组学技术的应用以及与此匹配的功能评估应该为精液质量缺陷的研究提供生化基础。这些信息将有助于了解男性不育症的原因,并制定合理的治疗方法和可能的预防措施。

《亚洲男性学杂志》——黑人男性前列腺癌基因突变新发现引起全球关注

2010年2月22日《亚洲男性学杂志》发表的一篇报道黑人男性前列腺癌高发相关基因突变的原始研究论文，全球包括Science News在内的30多家新闻媒体报道了此新发现。