栉孔扇贝心脏细胞的体外培养

体外培养细胞对研究生物的资源保护、功能基因及病害发生机理与防治等均具有重要意义。然而,目前海洋双壳贝类中可以长期存活的组织细胞是有限的。本研究采用植块法启动栉孔扇贝(Chlamys farreri)心脏细胞的原代培养,通过优化培养基的方法,建立了可使其长期存活的原代培养体系。根据组织块迁出细胞的数量和细胞存活时间,确定L-15是3个培养基(L-15,M199,L-15+M199)中最适宜栉孔扇贝心脏细胞的基础培养基。通过三因子三水平正交实验,得出栉孔扇贝心脏细胞适宜的添加物组合:L-15基础培养基中添加5%胎牛血清、50 mmol/L牛磺酸和6 mmol/L Ca^(2+)。原代培养产物中以心肌细胞为主要的细胞类型,其中部分心肌细胞在原代培养14 d内可进行节奏性搏动;部分细胞可局部形成心肌束和肌管样结构;心肌细胞在体外存活时间达2个月。本研究将为栉孔扇贝基础生物学和功能基因的研究提供细胞平台。

SCP3作为栉孔扇贝初级精母细胞标记分子的研究

为检验SCP3在无脊椎动物中是否可以标记特定的生殖细胞,实验利用RACE技术克隆了栉孔扇贝SCP3(Cf-SCP3)的全长cDNA序列,结果显示,其长度为1 033 bp,开放阅读框为726 bp,编码241个氨基酸。推导的氨基酸序列中包含SCP3保守的Cor1结构域和卷曲螺旋结构域。制备了Cf-SCP3地高辛标记的RNA探针和Cf-SCP3重组蛋白的多克隆抗体,采用原位杂交和免疫组织化学技术检测其细胞学定位,结果显示Cf-SCP3转录本和Cf-SCP3蛋白均特异性地定位在栉孔扇贝的初级精母细胞和未受精卵中,在精巢的其他类型细胞和卵巢中均未见表达信号。研究表明,Cf-SCP3蛋白可能与脊椎动物的SCP3蛋白一样,作为联会复合体的组成成分参与栉孔扇贝的配子发生,同时可以作为一个栉孔扇贝初级精母细胞的分子标记应用到体外诱导生殖细胞分化的研究。

非布司他对痛风病人三酰甘油水平的影响

目的 观察非布司他对原发性痛风病人三酰甘油(TG)水平的影响。方法 选取2016年9月—2020年9月在青岛大学附属医院痛风专病门诊就诊的病人298例,分析非布司他治疗期间TG水平变化。结果 治疗2~4周、6~8周时的TG水平均较治疗前明显升高(t=4.294、7.760,P<0.01),治疗10~12周时的TG水平与治疗前比较变化不明显。根据治疗前TG水平分组,TG<1.7 mmol/L组治疗2~4周、6~8周时的TG水平均较治疗前明显升高(Z=4.099、6.814,P<0.01),治疗10~12周时的TG水平与治疗前比较变化不明显;1.7 mmol/L≤TG<2.3 mmol/L组治疗2~4周时的TG水平较治疗前明显升高(Z=3.794,P<0.01),治疗6~8周、10~12周时的TG水平与治疗前比较变化不明显。结论 非布司他治疗早期会引起痛风病人TG水平升高。

老年起病痛风性关节炎临床特点及痛风石危险因素分析

目的探讨老年起病痛风性关节炎的临床特点及易患痛风石的相关危险因素。方法回顾性选取2016年至2022年在青岛大学附属医院痛风临床医学中心门诊就诊的痛风患者1239例。按发病年龄分为两组,中青年组(<60岁)826例与老年组(≥60岁)413例。比较分析两组临床特征加老年人易发痛风石的危险因素。结果老年组收缩压、空腹血糖、肌酐、规律运动比例、合并症、痛风石发生率均高于中青年组;舒张压、三酰甘油、估算的肾小球滤过率(eGFR)、血尿酸、饮酒率、痛风家族史的比例等低于中青年组(P<0.05);老年起病组关节炎首发部位多见于第一跖趾关节,初次发作为上肢关节者人数多于中青年患者(P<0.05)。老年起病组尿酸排泄分型以肾脏排泄不良型多见,肾负荷过多型所占比例高于中青年组(P<0.05)。二元logistic回归分析显示年龄、尿素氮、痛风家族史、病程≥10年是老年患者发生痛风石的危险因素(P<0.05)。结论老年起病的痛风群体有其独特的临床特征,表现为痛风石多见、合并症比率高。关节炎首发部位多见于第一跖趾关节,尿酸排泄分型以肾脏排泄不良型为主。应早期诊疗、控制血尿酸水平、戒烟戒酒、规律运动,以预防或延缓痛风石的形成。

栉孔扇贝胚胎和幼虫中的17β-HSD8表达分析

17β-羟类固醇脱氢酶8(17β-HSD8)广泛分布在脊椎动物体内的多种组织中,调节类固醇激素代谢和脂肪酸代谢。本文采用荧光定量RT-PCR和原位杂交技术,对栉孔扇贝胚胎和幼虫中17β-HSD8mRNA的时空表达进行了分析。研究结果表明,栉孔扇贝17β-HSD8在未受精卵中高水平表达,受精卵和卵裂期胚胎中表达量显著下降,囊胚中的表达量显著提高。提示栉孔扇贝17β-HSD8是一个母源表达的基因,其合子基因在囊胚时期开始表达。原位杂交结果显示,17β-HSD8mRNA阳性信号在各发育阶段的胚胎和担轮幼虫中均匀分布,在D形幼虫中主要定位在内脏团附近,提示17β-HSD8可能参与起始器官发生。

山东省痛风年轻化趋势及相关危险因素分析

目的探讨山东省痛风年轻化趋势及相关危险因素,为遏制痛风年轻化现象提供决策资料。方法通过电子病历结合与患者面对面交流方式,收集2016年9月至2021年12月首次就诊于青岛大学附属医院痛风专病门诊的8393例痛风患者的基线资料、伴发病情况、生化检查和首次发病时间,统计分析2002年至2021年期间发病年龄的动态变化,并统计分析早发型和晚发型痛风患者临床特征及相关危险因素。结果2002年至2021年期间痛风发病年龄呈明显下降趋势,与2002年相比,2021年平均发病年龄下降了2.3岁[(41.9±10.6对39.6±14.0)岁,P=0.042]。2012年至2021年与2002年至2011年相比,发病年龄中位数减小了3岁(37对40岁,P<0.001)。发病年龄<40岁的痛风患者构成比明显上升,由2002年的45.1%上升到57.8%,20年间增加了12.7%(P<0.001)。20~29岁组(P趋势<0.001)和≤19岁组(P趋势=0.011)构成比逐年上升,20年期间分别增加了9.3%(P<0.001)和4.2%(P=0.002),是发病年龄<40岁各年龄段增幅最高者。多元逐步线性回归分析结果显示阳性家族史、血尿酸水平、合并代谢综合征以及吸烟是痛风早发的独立危险因素。结论山东省痛风呈现明显年轻化现象,发病年龄<30岁患者所占比例的明显增加,可能是导致痛风年轻化现象的关键因素。对早发型痛风相关危险因素进行早期和有效干预,是遏制痛风年轻化现象、降低痛风及其相关合并症患病率的关键所在。