“新农科”背景下养殖水域生态学课程教学改革探讨

在当前的“新农科”大背景下,要求我国高等农业教育必须创新发展和改革,重点培养新农科所需的优秀专门人才。本文在分析养殖水域生态学课程教学中存在的问题的基础上,探讨了提高该课程教学质量的建议和措施,具体包括课程结构体系的优化、教学内容的选择和创新、教学方式和方法的改革以及改进课程考评方式等多方面,以此提高学生的学习主动性和积极性,从而找到一些途径和方法以提高养殖水域生态学课程的教学质量,进而使学生掌握水产养殖生态学的前沿和动态,培养适应水产业的创新型和复合型人才。

铜锈环棱螺形态性状对体质量的影响分析

为探究铜锈环棱螺不同群体主要形态性状间的相关性及影响其体质量的主要因素,随机选取微山湖、东平湖、骆马湖、洪泽湖、长江江都区段和滇池的野生铜锈环棱螺,测量其壳高、壳宽、壳厚、壳口长、壳口宽及体质量,采用相关分析与通径分析方法,并建立体质量的最优多元回归方程。试验结果显示,壳厚与体质量相关性不显著,壳高、壳宽、壳口宽和壳口长均与体质量相关性极显著。6个群体的决定系数总和分别为0.916、0.927、0.794、0.886、0.810和0.783,表明已分析出影响体质量的大部分形态性状。铜锈环棱螺体质量性状的主要影响因素在6个群体中并不相同,其中壳高或壳宽对体质量的影响作用比较大,是铜锈环棱螺体质量的主要影响因素。经多元回归方差分析和偏回归系数显著性检验,偏回归系数极显著(P<0.01)。本试验结果可为铜锈环棱螺的品种选育提供参考依据。

饲料中单独或联合添加乳酸菌对大口黑鲈生长及免疫性能的影响

试验旨在分析在饲料中单独或联合添加2种乳酸菌对大口黑鲈生长速度和免疫性能的影响,试验共分为4组:C0组作为对照,使用基础饲料;T1、T2和T3组则分别在基础饲料中添加了1.0×10^(8) CFU/g的植物乳杆菌LP-37、1.0×10^(7) CFU/g的戊糖片球菌PP-23,以及两者按此浓度组合的混合益生菌。每个实验组均设置了3个重复,每个重复包含50尾大口黑鲈,养殖周期为6周。结果显示:T1、T2、T3组的大口黑鲈在终末体重、增重率和特定生长率方面均显著优于C0组(P<0.01),并且在饵料系数方面,T1至T3组均显著低于C0组(P<0.05)。其中,T3组,在促生长方面效果最为显著。在肠道组织形态方面,T1和T3组绒毛高度均极显著高于C0组(P<0.01),T3组绒毛宽度显著高于C0、T1和T2组(P<0.05),各试验组肌层厚度均极显著高于C0组(P<0.05)。各试验组均能提高大口黑鲈血清中碱性磷酸酶、酸性磷酸酶和总超氧化物歧化酶的活性,及肠道中胃蛋白酶、α-淀粉酶和脂肪酶的活性,并且与促生长结果类似,T3组提升的幅度最大。与C0组相比,T1—T3组大口黑鲈脾脏和头肾中IL-1β、IL-8、TNF-α、IFN-γ等基因表达量显著降低(P<0.05),IL-10、TGF-1β等基因表达量显著提高(P<0.05),其中,T3组效果最显著。综上所述,饲料中添加LP-37和PP-23能显著提高大口黑鲈的生长性能、血清和肠道中酶活性,增强抗炎因子的表达,降低促炎因子的表达,显著改善肠道形态,且联合添加组优于单一添加组。

海湾扇贝对海水中镉的富集规律研究

本文利用原子吸收分光光度法研究镉暴露实验中海湾扇贝不同器官组织富集、排放镉的过程及影响因素。水体中镉通过被动扩散进入海湾扇贝鳃,根据吸附等温线并结合直线拟合结果得海湾扇贝鳃对镉的单层饱和结合量为2.12μmol.g干重。鳃对镉的富集量和富集速率与水相中镉浓度成正相关关系,最高浓度组(2μmol.L-1)的镉富集量和富集速率分别为(1.5±0.52)μmol.g-1干重和(0.375±0.13)μmol.(g.d)-1。随着养殖时间的延长,海湾扇贝鳃、内脏和肌肉镉富集量逐渐增加,14d(336h)后,内脏和鳃中镉富集达到平衡,但肌肉中镉富集是否达到平衡,尚需进一步研究。盐度对海湾扇贝鳃、内脏和肌肉镉富集速率无显著影响(P>0.05)。富集在海湾扇贝体内的镉不断被排出,其中鳃的排放率最大,达到了38.3%,其次是内脏、肌肉。

半滑舌鳎养殖群体中自然性逆转伪雄鱼的发现

利用雌性特异标记遗传性别鉴定技术,对71尾4龄半滑舌鳎的生理和遗传性别进行鉴定,结果显示32尾生理型雌鱼均能扩增出205bp的雌性特异条带;39尾生理型雄鱼,仅一尾鱼体重显著高于其他雄鱼并扩增出了雌性特异条带,因此这尾鱼遗传上为雌性,是一尾伪雄鱼。对养殖的600尾半滑舌鳎生理雄鱼大规模检测发现,养殖群体自然性逆转伪雄鱼比例为1.66%。对正常雌、雄鱼和1龄自然性逆转伪雄鱼的性腺组织学观察显示,与正常雄鱼相比,伪雄鱼性腺中也有大量的精母细胞,但数量比正常雄鱼的要略少;且未在伪雄鱼的性腺组织中观察到卵母细胞,说明半滑舌鳎性逆转发生在性腺分化期。半滑舌鳎自然性逆转现象的发现有助于解释当前半滑舌鳎养殖群体中雄性率偏高的现象,为半滑舌鳎全雌苗种生产提供了一条新的技术途径,并丰富了鱼类性别分化理论。

鱼类精子质量评价研究进展

在鱼类人工繁育中,研究者主要关心的是卵子质量,长期以来对精子质量未引起足够重视。而精子质量同样会影响繁育效果的重要因素。鱼类精子质量的评价指标有多种,如精子活力、运动时间、密度、形态、受精率和生理功能等。其中最传统的评价指标是精子活力,其测定方便,能较准确地预测受精率。将精子运动时间和活力综合考虑可更好地反映精子的运动能力。而精子受精率则是精子质量的直接反映,但会受到卵质等因素的影响。质膜完整性、线粒体功能、染色质结构完整性等可体现精子的质量,但测定方法较繁琐。近年来,鱼类精子质量检测技术迅速发展,计算机辅助精子分析(CASA)、流式细胞术(FCM)分析、低渗肿胀(HOS)、单细胞凝胶单泳(SCGE)等技术的建立,使得测定指标更多样、客观、准确。本文逐一介绍了评价精子质量的各种指标,并对各指标的测定方法、测定原理、国内外研究情况进行详细叙述,旨为我国鱼类精子质量评价研究提供背景资料。

植物乳杆菌LP-37和氟苯尼考对许氏平鲉(Sebastes schlegelii)肠道形态、消化酶及免疫酶活性的影响

为分析植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)LP-37和氟苯尼考对许氏平鲉(Sebastes schlegelii)肠道形态的影响,在水温(14±1)℃条件下,将体质量为(32.23±9.38)g的许氏平鲉饲养在约5 m^(3)的循环水圆桶中45 d,分别投喂4种饲料:喷洒去离子水的基础饲料(对照组C0);前30 d投喂喷洒1×10^(7)CFU/g植物乳杆菌的饲料,后15 d投喂对照饲料(植物乳杆菌组,P1);前30 d投喂喷洒20 mg/L氟苯尼考的饲料,后15 d投喂对照饲料(氟苯尼考组,F1);前15 d投喂喷洒氟苯尼考的饲料,中间15 d投喂喷洒植物乳杆菌的饲料,最后15 d投喂对照饲料(植物乳杆菌和氟苯尼考组,G1)。在第30 d和第45 d解剖许氏平鲉的肠道,通过HE染色和Image J软件分析肠道形态结构的变化,并测定血清中α-淀粉酶、脂肪酶、胰蛋白酶、碱性磷酸酶和超氧化物歧化酶活性的变化。结果显示,1×10^(7)CFU/g植物乳杆菌和20 mg/L的氟苯尼考可以改善肠道结构,显著提高肠道绒毛长度、肌层厚度、隐窝深度(P<0.05);1×10^(7)CFU/g植物乳杆菌LP-37可以显著提高许氏平鲉血清中α-淀粉酶、碱性磷酸酶、超氧化物歧化酶活性(P<0.05);20 mg/L的氟苯尼考可以显著提高许氏平鲉血清α-淀粉酶、胰蛋白酶活性、碱性磷酸酶、超氧化物歧化酶的活性,显著降低脂肪酶活性(P<0.05);组合使用1×10^(7)CFU/g植物乳杆菌LP-37和20 mg/L氟苯尼考可以显著提高许氏平鲉血清α-淀粉酶、超氧化物歧化酶的活性(P<0.05),显著降低脂肪酶、胰蛋白酶的活性(P<0.05)。综上所述,植物乳杆菌LP-37和氟苯尼考均可以改善许氏平鲉肠道结构,调节许氏平鲉消化酶和免疫酶的活性。

石鲽、牙鲆精子冷冻保存研究及其在人工杂交中的应用

对石鲽(Kareius bicoloratus )和牙鲆(Paralichthys olivaceus)精子冷冻保存技术进行了研究,筛选到一个优良的稀释液MPRS,用MPRS冷冻保存石鲽、牙鲆精子,冻后成活率在70%以上。在石鲽冻精和牙鲆卵的杂交实验中,杂交组受精率是 28 4%±4 55(n=3),孵化率是 42 7%±7 35(n=3),胚胎发育正常;5 000尾杂交鱼苗有102尾成功度过变态期。在牙鲆冻精和大菱鲆卵的杂交实验中,杂交组的受精率只有2 7%,部分受精卵虽能孵化出膜,但仔鱼全为畸形。这两个杂交实验,特别是石鲽冻精和牙鲆卵的杂交实验,证实了冷冻保存的精子完全可以应用在杂交育种工作中。

紫外灭活的异源和同源精子诱导的半滑舌鳎单倍体胚胎发育过程比较

为探讨在雌核发育研究中紫外灭活的异源精子的细胞质等是否对"受精"卵的发育产生影响,本文对紫外灭活的异源和同源精子诱导的半滑舌鳎单倍体胚胎发育过程进行了比较研究。结果显示,在胚盘形成期、二细胞期、多细胞期和囊胚期,异源和同源精子诱导的半滑舌鳎单倍体胚胎发育时序及形态无显著差异。之后,灭活的异源精子诱导的单倍体胚胎发育速度比同源精子诱导的单倍体胚胎要慢,至受精后18 h 48 min已慢1个发育时期,说明在发育前期,异源精子诱导的单倍体胚胎发育阻力更大。肌节期后,同源精子诱导的半滑舌鳎单倍体胚胎发育也严重受阻,与异源精子诱导的单倍体胚胎发育速度无显著差异;且单倍体胚胎陆续大量死亡,但异源精子诱导的单倍体胚胎死亡率明显要大于同源精子诱导的单倍体胚胎。异源和同源精子诱导的单倍体胚胎孵出的仔鱼均表现有单倍体综合症,外形基本一致。为确保紫外线处理将精子完全灭活,当紫外灭活的异源和同源精子诱导的半滑舌鳎单倍体胚胎发育至原肠后期时,各取30粒用倍性分析仪检测其倍性,结果显示全为单倍体。

室内小水体尼罗罗非鱼保种技术

随着罗非鱼养殖品种日益增多,如何经济高效地保存这些新品种的优异种质变得越来越重要。经过多年的试验和探索,初步摸索出一套完整的室内小水体尼罗罗非鱼保种技术。室内小水体循环系统由养殖缸、充气系统、控温系统、水体净化系统等组成,可严格控制水温在28℃左右,溶氧丰富,能够满足罗非鱼人工繁殖、养殖的必需条件。室内小水体尼罗罗非鱼人工养殖的主要技术流程有鱼苗的放养密度、养殖用水要求、饲养管理和疾病防治等。室内小水体尼罗罗非鱼人工繁殖技术的流程有亲鱼的培育、亲鱼配组、受精卵的口腔孵化或体外人工孵化、苗种培育等。总体上,在室内小水体就可以养殖、繁殖罗非鱼,是一种非常适合于罗非鱼保种的有效方法。

美国研究生课堂教学特点及启示

研究生课堂教学作为研究生培养的重要组成部分,是研究生获得知识、技能和培养创新能力的一个关键环节。美国研究生课堂教学具有任教师资学术水平高、教学内容侧重内在联系、互动式开放教学盛行、课程考核评价方法科学合理等特点,这些对提高中国研究生课堂教学质量具有一定的借鉴作用。

当前北方罗非鱼养殖业的困境及对策

罗非鱼原产于非洲，形似本地鲫鱼，故又有人称其为非洲鲫鱼。罗非鱼食性广泛，大多为植物性为主的杂食性，甚贪食，摄食量大；耐低氧，生长迅速，尤以幼鱼期生长更快。罗非鱼肉质细嫩、没有肌问刺，是淡水鱼中品质较好的鱼类品种，广受消费者喜爱。罗非鱼也是世界粮农组织推荐的主要养殖品种之一，也是我国最具国际竞争实力的鱼类品种之一。

牙鲆抗病群体和家系的建立及其生长和抗病性能初步测定

通过自然选择和人工感染途径筛选出抗鳗弧菌病牙鲆鱼种，将其培育成亲鱼94尾，建立了牙鲆抗病群体；从日本引进了牙鲆日本群体；以上述2个群体以及黄海中捕捞的黄海群体为基础群体，通过不同组合的交配，建立了63个牙鲆家系，其中半同胞家系54个，全同胞家系9个。生长比较实验表明这63个家系的生长速度存在着明显差异，从中筛选出生长快速的家系4个（家系36，42，43和57），生长较快的家系9个（家系27、28、35、39、41、51、60、65和76），生长慢的家系1个（75号家系）。通过对59个家系的抗病能力测定表明，不同家系在抗鳗弧菌感染的能力上存在着明显差别，从中鉴定出抗病力强的家系3个（家系50，61和68号），其在鳗弧菌感染后的成活率高达60％以上；抗病力比较强的家系17个，其成活率为39％～60％；抗病力一般的家系33个，其成活率为17％～39％之间；抗病力差的家系6个，其成活率在17％以下。这些牙鲆家系的建立为牙鲆抗病、高产新品种的培育奠定了重要基础。

鲈鱼胚胎的玻璃化冷冻保存

本文对鲈鱼 (Lateolabraxjaponicus)胚胎进行了玻璃化冷冻保存研究 ,筛选出了浓度较低、玻璃化程度较稳定的 5种玻璃化液 ,冷冻时形成玻璃化的概率在 4 8 1%～ 10 0 % ,在 35～ 4 3℃的水浴中解冻时保持玻璃化的概率在 4 4 4 %～ 6 3 0 % ;玻璃化液VSD2在解冻时保持玻璃化的概率最高。对鲈鱼神经胚、 2 0对肌节胚、尾芽胚、心跳胚、出膜前胚在玻璃化液VSD2中的适应能力及适合于玻璃化冷冻的胚胎时期进行了比较 ,结果显示 :不同时期胚胎对玻璃化液的耐受能力不同 ,鲈鱼神经胚耐受能力最低 ,心跳胚耐受能力最强 ,出膜前期胚次之 ,心跳胚和出膜前胚适合于进行玻璃化冷冻。对 0 5mol/L蔗糖的洗脱时间进行了选择 ,结果显示 ,洗脱10～ 2 0min效果较好。利用玻璃化程度较好的VSD2对鲈鱼不同时期胚胎进行超低温 ( - 196℃ )冷冻 ,获得了2 1%～ 2 7 9%的透明胚。将鲈鱼心跳胚冷冻解冻后获 2粒复活胚 ,培养至出膜期 ,成活 4 2～ 5 0h ;出膜前期胚在冷冻解冻后有 1粒胚复活 。

半滑舌鳎雌性特异AFLP标记CseF783的克隆及其在遗传性别鉴定中的应用

半滑舌鳎性别控制和全雌育种等研究领域中迫切需要一种能够快速鉴定鱼类个体遗传性别的有效方法。文章采用AFLP技术,利用选择性引物组合(E-ACT/M-CAA)从半滑舌鳎中筛选到一条雌性特异的AFLP标记。对该标记进行二次PCR扩增、琼脂糖凝胶回收、克隆、测序。分析表明,序列全长为791 bp,与GenBank中的序列无同源性。以该雌性特异AFLP标记DNA序列为模板,设计了一对特异的PCR引物,成功地将其转化为SCAR(Sequence characterized amplified regions)标记,并在100尾已知性别的半滑舌鳎个体(雌雄各50尾)中进行验证,结果表明,该SCAR标记在所有雌性个体中均扩增得到一条长度为324 bp的DNA条带,而在49尾雄性个体中均扩增不到该DNA条带(有1尾雄性个体例外),证明该SCAR标记是雌性特异的,并可用于半滑舌鳎个体遗传性别鉴定。随后,利用该SCAR标记检测了3日龄半滑舌鳎幼苗,结果表明,雌性个体比例为41.7%。

三个牙鲆育种群体亲本效应及遗传参数估计

针对牙鲆(Paralichthys olivaceus)养殖品种生长速度变慢、抗病力降低这一问题。近年来构建了牙鲆抗病群体(RS)、日本群体(JS)和黄海群体(YS)3个育种群体,开展牙鲆选择育种,建立了63个家系,收集了所有家系5 328尾鱼苗的体长和体重数据。借助线形混合模型(Linear mixedmodel)、"加性-显性"模型、约束极大似然法(REML)及最佳线性无偏预测(BLUP)分别估计亲本效应值、体重和体长遗传力和遗传相关、父母本效应和杂交效应。预测结果显示,其中父本130,141,146,170,218,229,303和308随机效应达到了极显著效应水平(P<0.01),父本112,122,141,190,212达到显著水平(P<0.05),所有母本体重随机效应达到了极显著水平(P<0.01);体长和体重两性状的加性、显性、表型和基因型相关分量都达到极显著水平(P<0.01),体长和体重的加性方差比率均大于显性方差比率,可见两性状的遗传效应主要取决于基因的加性效应。体长的总遗传效应率为31.20%,体重的总遗传效应率为33.58%,体长和体重的随机方差比率分别达到68.80%和66.41%,说明养殖环境等因素对牙鲆体长和体重的影响较大,同时说明在牙鲆选择育种中消除环境影响极为重要。体长和体重的狭义遗传率分别为0.199和0.256(P<0.01),广义遗传率分别为0.312和0.336(P<0.01),牙鲆在以上两性状上属于中等遗传力,通过选择育种可取得较大的遗传进展。对3个牙鲆育种群体杂交随机效应估计结果显示,抗病群体和黄海群体在体长和体重两性状上加性随机效应显著(P<0.05);抗病群体分别与日本群体、黄海群体杂交,其后代表现出显性随机效应达到0.10的水平(P<0.10),黄海群体自交、日本群体和黄海群体杂交随机效应不显著(P>0.05),因此在杂交组配中选择抗病群体与其他两个群体交配可取得较好的效果。

氨氮降解菌的筛选、鉴定与复合菌水质调控效果研究

为寻找高效降解水体中氨氮的菌株并对其进行应用评价,研究从多种水产养殖池塘水体和底泥的混合物中筛选出2株氨氮降解菌,降解率分别达97.8%和98.5%,经鉴定均为凝结芽孢杆菌(Bacillus coagulans)。对筛选出的2菌株培养条件进行优化,2菌株pH、C/N适应范围广,并且耐高温、高盐。通过灌服试验表明所筛选菌株对养殖动物是安全的。在此基础上,将筛选菌株与本实验室前期诱变菌株B38复配后制成复合菌,通过养殖试验评价了复合菌对氨氮、亚硝酸盐及藻类数量的调控效果。与4种商品微生态制剂(光合细菌、酵母菌、强效EM和芽孢杆菌)相比,泼洒复合菌的池塘氨氮含量逐渐降低。在氨氮含量下降的同时,亚硝酸盐含量有上升的趋势,但在试验的第18天,复合菌组与酵母菌组亚硝酸盐含量有所降低。对藻类数量的影响结果显示,从第9天开始添加复合菌与芽孢杆菌组藻类数量高于其他各组,在第14天,这2组藻类数量大约为其他组的2倍。由此可见,复合菌具有明显的降氨氮特性,并能有效增加藻类数量,但对亚硝酸盐降解效果不显著。研究为复合型微生态制剂的开发提供了技术支撑。

紫外诱变选育高活性蛋白酶枯草芽孢杆菌及其降解饲料能力评价

以凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)养殖池塘底泥中分离的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)BC2为出发菌株,利用紫外诱变的方法培育蛋白酶活性高的枯草芽孢杆菌菌株,并评价其降解饲料的能力。结果表明:(1)经6次紫外诱变,突变菌株B38的透明圈直径(H)与菌落直径(C)之比(H/C值)达到6.42,提高了2.13倍;(2)福林酚法测得B38的蛋白酶活性为86.82 U/m L,是出发菌株BC2的3.14倍,但紫外诱变对B38纤维素酶活性影响不显著;(3)连续传代培养10代后发现B38产蛋白酶和纤维素酶能力保持稳定,证明诱变菌株具有较好的遗传稳定性;(4)利用凯氏定氮法评价B38降解饲料蛋白的能力,发现与BC2相比,B38降解饲料中可溶性蛋白的能力提高了2.57倍,而降解不溶性蛋白的能力变化不大。本研究诱变选育的枯草芽孢杆菌B38为开发优良的水产微生态制剂产品提供了重要的前提和基础。

我国引进条斑星鲽群体遗传多样性的AFLP分析

应用AFLP技术对我国条斑星鲽引进群体（烟台、大连和莱州）共63尾个体的遗传多样性及遗传变异进行分析，计算了3个群体间的遗传相似性指数和遗传距离，并构建了UPGMA系统发生树。10个引物组合在3个群体中共扩增到827个位点，大小位于50-700bp。每个引物组合扩增到的多态性条带在8到37条之间不等，平均为17．9个。3个群体的多态性位点比例分别为29．14％、15．60％和20．31％；Shannon多样性指数分别为0．1799、0．0949和0．1231；Nei基因多样性指数分别为0．1225、0．0658和0．0848。3个条斑星鲽引进群体的遗传多样性水平，烟台引进群体最高，莱州引进群体次之，大连引进群体最低，但总体水平均较低。烟台引进群体与大连引进群体间的遗传距离最大为0．0230，莱州引进群体与大连引进群体间的遗传距离最小为0．0129。3个引进群体间的遗传分化系数（Gst）为0．219，表明3个引进群体之间发生了一定程度的分化。

半滑舌鳎四倍体鱼苗的诱导与鉴定

采用静水压法处理半滑舌鳎(Cynoglossus semiliaevis)受精卵以抑制其卵裂并进行染色体加倍,筛选出有效的静水压处理起始时间、处理强度及其持续时间。结果表明,孵化水温(23±0.2)℃时,授精后21.5 min,采用40 MPa的静水压压力,休克处理4.5 min,四倍体诱导效果最好,鱼苗四倍体率达到68.3%。采用流式细胞仪分析了四倍体鱼苗细胞DNA含量,表明四倍体鱼苗细胞DNA含量为二倍体对照鱼苗的2倍。通过染色体制作分析表明四倍体鱼苗的染色体数为84条,而二倍体对照鱼苗的染色体数为42条。本研究采用静水压方法,在国内外首次建立了半滑舌鳎四倍体诱导方法。本项技术的建立旨在为大量生产半滑舌鳎三倍体不育群体奠定基础。