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猪链球菌2型二肽酶Ⅳ的克隆、表达及酶活性鉴定 被引量:2
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作者 季红峰 潘秀珍 +3 位作者 郑峰 王长军 朱进 唐家琪 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期438-440,共3页
目的克隆表达猪链球菌2型二肽酶Ⅳ(DPPⅣ)编码基因,分析表达产物的免疫原性,并测定其酶活性。方法采用PCR法,从四川资阳中毒性休克综合征病人分离株05ZYH33基因组扩增DPPⅣ的编码基因dppⅣ,构建重组表达质粒pET32a-dppⅣ,转化E.coliBL21... 目的克隆表达猪链球菌2型二肽酶Ⅳ(DPPⅣ)编码基因,分析表达产物的免疫原性,并测定其酶活性。方法采用PCR法,从四川资阳中毒性休克综合征病人分离株05ZYH33基因组扩增DPPⅣ的编码基因dppⅣ,构建重组表达质粒pET32a-dppⅣ,转化E.coliBL21(DE3),筛选阳性转化子进行IPTG诱导表达,产物通过SDS-PAGE鉴定,并用western blot检测其抗原活性;最后对表达产物进行亲和层析纯化,测定其在不同pH、温度下的酶活性。结果dppⅣ基因在原核细胞中得到高效表达,在最适温度和pH下具有最强酶活性。结论我国猪链球菌2型毒力株05ZYH33含有dppⅣ基因,在原核系统高效表达的重组蛋白具有良好的免疫原性和酶活性。 展开更多
关键词 猪链球菌 dpplV 克隆 酶活性
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应用上转换发光技术快速检测抗2型猪链球菌抗体 被引量:2
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作者 郑峰 周蕾 +6 位作者 葛俊超 魏华 潘秀珍 季红峰 朱进 杨瑞馥 唐家琪 《中华流行病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期310-311,共2页
目前,国内针对猪链球菌2型(S.suis2)抗体的检测方法仅限于用ELISA进行实验室分析,而且各种免疫学检测方法均有一定的非特异性反应。因此,建立适用于现场的S.suis2抗体快速检测方法,对于流行区疫情监测预警、早期控制以及临床诊... 目前,国内针对猪链球菌2型(S.suis2)抗体的检测方法仅限于用ELISA进行实验室分析,而且各种免疫学检测方法均有一定的非特异性反应。因此,建立适用于现场的S.suis2抗体快速检测方法,对于流行区疫情监测预警、早期控制以及临床诊断均有重要的应用价值。 展开更多
关键词 2型猪链球菌 上转磷光技术 抗体
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