病理学教学现状及数字化标本和切片应用的必要性

病理学是一门通过观察疾病形态学变化,帮助学生掌握各种疾病基本病变,理解疾病发病机制的形态学学科。受课堂时间和标本切片数量和质量限制,目前病理学实验课安排不能充分满足教学需求。随着现代医学教育的信息化发展,形态学教学中数字化教学成为可能。应用数字化大体标本和组织切片有助于学生自主学习,提高课堂效率,加深对基本病理知识的理解,提高教学效果。

关于多媒体技术与病理学教学的思考

病理学是一门形态学科,是基础医学和临床医学之间的桥梁,它着重从形态学的角度阐述病变器官、组织的大体和镜下特点,从而理解疾病的发生发展规律,揭示疾病的本质,其形象直观性和真实具体性在教学中显得尤为重要。我校近年逐步完善了计算机辅助教学设施，在多数教室中配置了多媒体电脑、投影仪、扩音系统．在形态学实验室配置了互动多媒体教学系统。病理教研室使用多媒体教学已近十年，成功提高了病理教学质量，在教学中也有不少体会。

Kupffer细胞和自然杀伤细胞在大鼠实验性肝癌中分布及意义

目的 :探讨 Kupffer细胞 (KC)、肝脏自然杀伤 (NK)细胞在实验性肝癌细胞凋亡中的作用及其相互关系。方法 :建立在诱癌过程中控制 KC功能状态的肝癌试验动物模型 ,应用免疫组化 S- P法检测各组大鼠肝癌中的CD6 8、CD5 7及 Bcl- 2、Bax的表达 ,对各组 CD6 8、CD5 7阳性细胞数进行定量比较与相关分析 ,并比较各组 Bcl- 2、Bax的表达。结果 :(1) CD6 8阳性细胞数在激活组、单纯诱癌组、抑制组依次递减 ;(2 ) CD5 7、CD6 8阳性细胞数呈正相关 ;(3)抑制组 Bcl- 2阳性表达率显著高于激活组 ,而 Bax阳性率显著低于激活组。结论 :(1) KC在肝脏 NK细胞归巢、分化和活化中发挥着重要作用。 (2 ) KC和肝脏 NK细胞可促进实验性肝癌细胞的凋亡 。

原发性肝细胞癌中枯否细胞、肝脏NK细胞的分布及意义

目的 :研究枯否细胞、肝脏自然杀伤 ( NK)细胞在原发性肝细胞癌 ( PHCC)组织中分布规律 ,探讨其在PHCC发生发展中的作用及其相互关系。方法 :应用免疫组织化学 S- P法检测 5 1例人体肝癌组织中的巨噬细胞标志物 CD68和 NK细胞标志物 CD5 7的表达 ,对阳性细胞数进行形态定量比较与相关分析。结果 :CD68阳性细胞数随PHCC分化程度降低而减少 ,而 CD5 7阳性细胞数在 PHCC不同分化组中无显著差异 ;在 PHCC中 CD68、CD5 7阳性细胞数呈线性正相关。结论 :枯否细胞数量与肝癌分化程度密切相关 ,并与肝脏

弥漫大B细胞性淋巴瘤中mTOR信号通路的激活

引言mTOR（mallmalian target of rapamycin）属于丝/苏氨酸激酶家族,在细胞生长和增殖控制中发挥着关键作用。在上游,生长信号激活的Akt激酶诱导其磷酸化而活化。下游其磷酸化核糖体蛋白S6激酶（S6 kinase,S6K1,p70S6K）而刺激蛋白质翻译.

弥漫大B细胞性淋巴瘤中t(14;18)易位及BCL2表达的意义

目的:探讨弥漫大B细胞性淋巴瘤(DLBCL)中t(14;18)易位及BCL2表达的意义。方法:用石蜡包埋组织免疫组织化学法检测142例淋巴结、胃肠道和咽淋巴环等不同器官或部位发生的DLBCL中CD10、BCL6、MUM1和BCL2的抗原表达,按免疫表型将DLBCL分成GCB-DLBCL和非GCB-DLBCL两个亚型;聚合酶链反应(PCR)扩增75例淋巴结结内DLBCL新鲜组织中由t(14;18)易位所形成的MBR/JH和lnfr/JH重组基因。结果:142例DLBCL中,75例(52.8%)表达BCL2。分型为GCB-DLBCL的51例中,18例(35.3%)表达BCL2;分型为非GCB-DLBCL的91例中,57例(62.6%)表达BCL2,两者阳性率比较有显著性差异(P=0.002)。同时,BCL2的表达阳性率按不同器官或部位发生的DLBCL作比较,结果也存在显著性差异(P=0.01)。18.7%的淋巴结结内DLBCL中有t(14;18)易位,阳性病例主要见于GCB-DLBCL之中。结论:t(14;18)易位是GCB—DLBCL亚型的遗传学特征,BCL2表达在不同亚型和不同器官或部位发生的DLBCL中有显著性差异,

去乙酰化酶抑制剂TSA对间充质干细胞C3H10T1/2增殖和成脂分化的影响

采用MTT和流式细胞术分别检测不同浓度的TSA对C3H10T1/2细胞活性和细胞周期分布的影响;油红O染色检测TSA对其成脂分化的影响,实时定量PCR检测TSA对成脂分化的关键转录因子PPAR-γ,以及成脂分化标志物Fabp4和Adipoq mRNA转录的影响.研究去乙酰化酶抑制剂TSA对间充质干细胞C3H10T1/2增殖和成脂分化的影响及其可能的作用机制.结果显示TSA浓度为1、10和30 nmol/L呈浓度依赖性地抑制C3H10T1/2细胞活性,改变细胞形态,并将其细胞周期抑制在G0/G1期;TSA浓度为10nmol/L明显抑制C3H10T1/2细胞的成脂分化作用,并呈浓度依赖性地抑制PPAR-γ、Fabp4和Adipoq mRNA的转录.表明TSA呈剂量依赖性地抑制间充质干细胞C3H10T1/2的增殖和成脂分化,除转录水平调控外,非组蛋白如细胞骨架相关蛋白可能也参与TSA的抑制作用.

病理学教学中POPS教学法结合LBL教学法的综合运用

为了取得更好的教学质量和教学效果,在病理学教学中联合应用POPS及LBL教学法,首先在总论中运用LBL教学法系统全面的教授基本病理过程的一般规律,接着在各论中运用POPS教学法学习不同疾病的特殊规律。先让学生准确快速的掌握基本知识点,继而把学习主动权再交予学生,充分激发学生的学习热情,加强学生解决问题和临床思维能力。

提高留学生病理实验教学质量的探索

病理学是医学留学生的必修课程,而实验课是其重要组成部分。本文首先讨论了留学生的现状,他们虽具有较强的自学能力,上课活跃表现力强,但自律性差,需严明纪律,强化课堂管理。同时指出病理实验教学面临的亟待解决的规范英文版病理学实习教材和改进教学方法等问题。提出推行留学生PBL教学和留学生说课等教学模式,并提出充分运用多媒体互动教学设备,改进教学课件等建议。

CAI课件在病理学双语教学中的应用研究

在病理学双语理论教学过程中,运用CAI课件有提高课堂教学质量、发挥学生主体作用、有利于教学资源共享等优势,但也存在着灵活性差、学生过分依赖课件等问题。必须实现教师主导作用与学生主体作用、传统教学与现代教学媒体、教学目的与教学内容相结合,才能真正提高CAI课件的教学效果。

肝脏巨噬细胞及其在肝损伤中的作用

肝脏巨噬细胞来源和功能复杂,包括肝脏固有巨噬细胞和单核细胞来源的浸润巨噬细胞,在宿主防御机制及维持机体内环境稳定中起着重要作用,也是参与肝脏损伤和修复的主要细胞成分.解析不同来源肝脏巨噬细胞在不同病因导致肝损伤过程中表型分化、生物学作用的动态变化及其分子机制,对理解肝损伤的病理过程,探索以肝脏巨噬细胞为靶点预防和治疗肝损伤以及肝纤维化的方案具有重要意义.

自制组织微阵列仪及其在肝癌分子病理研究中的应用

目的自主研发制备一种新型的结构合理、使用方便的石蜡组织微阵列手动装置,以解决现有的石蜡组织芯片工具由于结构、组合等原因在实验、研究工作中存在使用不便等问题。方法自主研发制备石蜡组织微阵列手动装置,并利用此装置将62例肝癌组织及匹配的癌旁组织标本制备组织芯片,并对其进行HE染色及AFP、CD34、Ki67和HIF alpha等蛋白质的免疫组织化学实验,分析肝癌组织及癌旁组织的表达差异性。结果对自制组织芯片进行多种蛋白的免疫组织化学检测和分子病理分析结果显示,染色清晰完整;统计分析显示,Ki67和HIF alpha在肝癌组织中的表达量显著高于癌旁组织(P=0.0003,P=0.0144),与文献的报道一致。结论本文自制组织微阵列仪具有较高的实用价值,是生物化学药物分子机制和病理研究应用的有效工具。

转基因2型自身免疫性肝炎动物模型研究进展

自身免疫性肝炎(autoimmune hepatitis,AIH)是一种慢性肝损伤疾病,目前认为多由自身肝细胞抗原诱发的免疫耐受丧失引起.目前按自身抗原类型主要分为1型和2型AIH,而2型AIH的自身抗原比较特异.近年来,针对2型AIH的小鼠模型日渐成熟,特别是转基因模型的日趋完善,为该疾病的研究提供了新的助力,本文着重介绍近几年来几种较成功的小鼠AIH的模型.

基于深度学习的人工智能辅助肺腺癌胸水脱落细胞学诊断的方法

目的应用深度学习模型对胸水脱落肺腺癌细胞进行检测和分类,探讨人工智能辅助肺癌细胞病理诊断的可行性。方法收集2019年3月至2021年12月南通大学附属医院、上海交通大学附属胸科医院和复旦大学附属中山医院的肺腺癌胸水标本110例,非癌性胸水标本20例为对照组。采用常规法和单细胞分离液处理技术2种方法分离细胞标本,并进行液基制片和苏木精-伊红(H-E)染色,全切片数字扫描使细胞图像数字化后保存为数字文件,由人工智能辅助诊断。经过裁切与图像预处理后,使用LabelImg软件对胸水细胞进行标记,打方框并标注细胞类型,选用较典型细胞样本,分别标记淋巴细胞、间皮细胞和腺癌细胞,共标记800张图像用于训练。采用Yolo V4模型对疑似与确诊肺癌细胞进行训练,采用Inception V3模型对不同分类细胞进行训练,取另外250张图像进行测试。结果训练后的Yolo V4模型能够对胸水脱落细胞H-E染色涂片中疑似+确诊肺腺癌细胞进行识别标注,全类平均正确率(mAP)为20%;训练后的Inception V3模型对胸水脱落细胞病理图像中单个细胞分割后的淋巴细胞、间皮细胞、疑似+确诊肺腺癌细胞进行分类,准确度为98%。单细胞分离液可增加能明确标注的癌细胞数量,提高单目标识别的效率和准确性。结论基于深度学习的方法,人工智能模型可以对胸水脱落细胞中肺腺癌细胞进行检测与分类,并用于辅助肺癌病理诊断。提高细胞分离的效率和统一的标准化制片,有助于促进深度学习方法的临床实际应用。

组蛋白去乙酰化酶在间充质干细胞C3H10T1/2成脂分化过程中的表达及HDAC11的作用

组蛋白去乙酰化酶(histone deacetylase,HDAC)通过调节组蛋白乙酰化修饰参与调控基因表达.研究发现多种HDAC参与成脂分化,但其机制尚不清楚.本研究探讨间充质干细胞C3H10T1/2成脂分化过程中HDAC的表达变化及其对成脂分化的影响.本研究首先建立了C3H10T1/2体外成脂分化的模型,并以油红O染色鉴定成功诱导成脂分化.PCR检测C3H10T1/2细胞成脂分化过程中11种HDAC的变化趋势,发现成脂分化过程中,HDAC1、2、5、9和10的m RNA表达量下降,而HDAC3、6、8和11的m RNA表达量明显上升,其中HDAC11上升最为显著.进一步通过RNA干扰沉默HDAC11表达,PCR检测成脂分化的关键转录因子PPARγ2和成脂标志物Perilipin、Adipoq的m RNA表达量下降,但Fabp4表达变化不明显.油红O染色结果表明,诱导C3H10T1/2成脂分化过程中,干扰HDAC11表达,胞浆内脂滴形成数量减少,成脂分化受到抑制.实验结果提示,C3H10T1/2细胞成脂分化伴随着多种HDAC表达的变化,其中HDAC11的增加最显著,干扰HDAC11的表达可以抑制C3H10T1/2细胞的成脂分化.

通过外周血诊断肝细胞癌的研究进展

通过外周血检测肝细胞癌(HCC)具有操作简便、非侵入性和可重复性等优点。传统和新近发现的HCC血清蛋白标志物包括甲胎蛋白和甲胎蛋白异质体3、脱-g-羧基凝血酶原、磷脂酰基醇蛋白聚糖-3、骨桥蛋白、肝细胞生长因子、胰岛素样生长因子1、血管内皮生长因子、鳞状细胞癌抗原和鳞状细胞癌抗原Ig M免疫复合物、α-L-岩藻糖苷酶、嗜铬粒蛋白;用于HCC诊断和预后判断的血清非蛋白编码核酸分子包括微小RNA、长链非编码RNA;此外,近年来对外周血肿瘤细胞及其产物开展了大量研究,将循环肿瘤细胞、循环肿瘤DNA以及血清外泌体检测用于监测肿瘤进展,拓展了外周血检测HCC的方法和途径。

microRNA与肿瘤

1993年，Lee等在秀丽新小杆线虫（Caenorhabditis elegans，C．degans）中发现了一种发育时序性基因lin-4。lin-4不编码任何蛋白，而是形成22nt的小分子RNA，该小分子RNA可抑制Lin-14蛋白合成，而lin-14 mRNA的水平却无明显变化。直到2000年，Reinhart等嵋。才在C．elegans中发现第2种类似的基因let-7，随后在人、果蝇及其他11种生物中也检测出let-7及其同源物。此后不到一年时间又相继发现了数百种类似的小分子RNA。这类具有调控基因表达功能的小分子非编码RNA现被称为microRNAs（miRNAs）。近年来，随着生物信息学发展，分子生物学实验技术改进和模式物种cDNA文库建立，miRNAs的研究突飞猛进。miRNAs与肿瘤发生发展的关系及其潜在的诊断价值更是目前肿瘤研究的一个新热点。

活化大鼠肝星状细胞的蛋白质表达谱

目的用在线二维纳升高效液相结合串联质谱（2D nanoLC—MS／MS）技术分析体外培养大鼠原代肝星状细胞（HSC）的蛋白质表达谱。方法分离培养大鼠原代HSC，取体外培养第10天自动活化的大鼠HSC总蛋白质，通过2D nanoLC—MS／MS对酶解所获肽段进行分离和鉴定，并对鉴定的蛋白质进行细胞定位和功能分类。结果从50μg HSC总蛋白质中鉴定出1014种蛋白质，相对分子质量范围为7832～588364；主要分布于细胞核、细胞骨架、线粒体、内质网，分别占25％、17％、13％、13％。蛋白质功能主要与核酸代谢、细胞器组装、信号传导、能量代谢等生理进程有关，分别占17％、14％、10％、9％；其中细胞骨架蛋白α-平滑肌肌动蛋白、波形蛋白和结蛋白是活化大鼠HSC特异性表达的蛋白质。结论本研究获得了目前较为全面的活化大鼠原代HSC的蛋白喷表达谱，为深入研究HSC的活化机制奠定了基础。

病理学双语教学的整体设计与实践

在病理学双语教学改革的整体设计和实践中,南通大学医学院围绕以学生为主体、教师为主导的原则,通过优化教学内容,建立课程网络教学资源库和开设双语教学网站,编写系列双语教材,改进教学方法,开展多种教学活动等,丰富了课程教学资源,形成了科学的课程管理与教学质量评价体系,造就了一支稳定的、结构合理的、教学和科研相结合的、学术水平和教学水平较高的优秀教学团队,从而提高了教学效果.

基于炎症标志物构建肝细胞癌术后预后预测模型

目的构建基于炎症反应标志物预测肝细胞癌患者术后3和5年生存模型。方法回顾性分析2010-01-13-2015-10-23南通市肿瘤医院(279例)与南通大学附属医院(359例)首次行肝细胞癌切除术治疗的638例患者临床资料。收集患者术前实验室检查指标。采用Epidata经双人录入核查构建数据库,运用电子随访信息系统或电话方式进行随访。caret包createDataPartition函数随机分为训练集448例与验证集190例。受试者工作特征(ROC)曲线分析确定中性粒细胞与淋巴细胞比率(NLR)、γ-谷氨酰转移酶与丙氨酸氨基转移酶比率(GGT/ALT)的最佳截断值。LASSO回归和多因素Cox比例风险回归分析独立危险因素,构建肝细胞癌患者术后生存3和5年列线图模型。在验证集进行模型效能验证。结果ROC曲线分析确定术前NLR和GGT/ALT最佳截断值为2.72和1.44。患者术后1、3和5年累计生存率分别为88.0%、68.3%和58.8%。乙肝病毒e抗原(HBeAg)阳性(HR=1.988,P=0.011)、NLR>2.72(HR=1.814,P=0.005)、GGT/ALT>1.44(HR=1.508,P=0.022)、天门冬氨酸氨基转移酶与血小板比率指数(APRI)>2.00(HR=2.347,P<0.001)、甲胎蛋白(AFP)>400μg/L(HR=1.680,P=0.014)、乳酸脱氢酶(LDH)>195 U/L(HR=1.517,P=0.036)、D-二聚体>0.33 mg/L(HR=1.495,P=0.026)、淋巴细胞计数(HR=1.668,P=0.002)和住院天数(HR=1.032,P=0.027)是肝细胞癌患者3年总生存期(OS)的独立危险因素。HBeAg阳性(HR=1.971,P=0.006)、NLR>2.72(HR=1.496,P=0.010)、GGT/ALT>1.44(HR=1.482,P=0.013)、APRI>2.00(HR=2.236,P<0.010)、肿瘤直径≥5 cm(HR=1.543,P=0.030)和住院天数(HR=1.029,P=0.031)是患者5年OS的独立危险因素。将Cox回归分析P<0.100的变量构建列线图模型,验证集3和5年OS的ROC曲线下面积(AUC)为0.748(95%CI:0.679~0.817)和0.774(95%CI:0.708~0.840)。结论构建基于炎症标志物的预后列线图模型,确定NLR、GGT/ALT和APRI是肝细胞癌患者术后生存的危险因素,可应用于指导临床治疗方案,改善肝细胞癌术后患者的预后。