孕酮在颗粒细胞中通过cAMP/PKA信号通路影响卵母细胞发育

目的探究孕酮在颗粒细胞中影响卵母细胞发育的分子机制。方法将人卵巢颗粒细胞(KGN)用不同浓度孕酮(P4)(0、1000、2000、3000 ng·mL^(-1))处理之后,RT-PCR和Western blot法检测不同浓度P4处理后卵泡刺激素受体(FSHR)和干细胞因子(SCF)的表达情况;用rFSH、H-89、forskolin、forskolin+H-89、P4+H-89和P4分别处理KGN细胞后,RT-PCR和Western blot法检测SCF的基因及蛋白表达情况;CCK-8法检测不同浓度P4处理后的细胞存活率;Western blot法检测不同浓度P4处理后Caspase3、Bcl-2、Bax相关凋亡蛋白的表达情况。结果用不同浓度P4(0、1000、2000、3000 ng·mL^(-1))处理之后,FSHR和SCF的基因和蛋白的相对表达量均下降(P均<0.05)。用rFSH、H-89、forskolin、forskolin+H-89、P4+H-89和P4分别处理KGN细胞后,显示P4可以下调forskolin诱导的SCF的表达。P4抑制颗粒细胞系KGN细胞的存活率,并促进Caspase3、Bcl-2、Bax相关凋亡蛋白的表达。结论P4通过cAMP/PKA通路影响颗粒细胞中SCF的表达,并且抑制细胞的存活,促进细胞凋亡。