水牛输卵管上皮细胞的培养

在水牛体外胚胎生产过程中,胚胎发育阻滞现象较为普遍,严重影响了体外生产胚胎的效率.

血清对水牛卵母细胞体外成熟、体外受精及早期胚胎发育的影响

从屠宰场收集了本地水牛55头、黑白花奶牛22头的卵巢共获卵泡847枚,平均每个水牛卵巢回收3.67枚可用卵母细胞,约为黑白花奶牛(10.23枚/头)的1/3。试验分别采用添加与不添加血清的培养液体外成熟培养水牛卵母细胞,结果二者的成熟率无明显毒性差异(58.23%对56.67%),但体外受精后早期胚胎发育的8-细胞率有显著差异(35.4%对23.0%),表明体外成熟液中有无血清对水牛卵母细胞体外成熟率没有影响,但血清对卵母细胞的早期胚胎发育有重要影响。进一步比较成熟液中不添加血清但在受精液及胚胎液中添加血清和在各个阶段均有血清参与的早期胚胎发育率(8-细胞率),表明二者差异不显著(33.8%对35.4%)。经无血清成熟培养液培养的成熟卵母细胞可以经孤雌激活后得到早期胚胎(4细胞)。

水牛卵母细胞孤雌激活及孤雌胚与体外受精胚发育比较

对MII期水牛卵母细胞进行人工诱导激活可以帮助人们间接判断体外成熟卵母细胞质量的优劣,并且,卵母细胞的充分激活也是提高核移植效率的关键因素之一。试验比较了水牛卵母细胞体外成熟时间对孤雌激活胚发育能力的影响以及不同化学激活方法对水牛卵母细胞孤雌激活效果的影响,并在相同条件下,对孤雌激活胚与体外受精胚的发育能力进行了比较。结果表明,水牛卵母细胞体外成熟27小时或30小时的囊胚发育率(19.0%或17.7%)明显高于体外成熟21小时或24小时的囊胚发育率(12.3%或13.8%);Ion联合6-DMAP激活水牛卵母细胞的效果优于其他几组激活方法;在相同条件下,孤雌激活胚与体外受精胚的发育能力存在着差异,其中卵裂率差异不显著,但孤雌激活胚的囊胚发育率显著高于体外受精胚(13.0%vs 21.7%)。

水牛卵母细胞体外受精及其早期胚胎性别鉴定

从屠宰场收集了本地水牛卵巢380个,平均每个卵巢回收3.29枚可用卵母细胞。分别采用添加5%、10%自制发情牛血清和国产胎牛血清培养液体外成熟培养水牛卵母细胞,结果表明,发情牛血清影响牛卵母细胞体外成熟的效果与胎牛血清的效果无显著差异(48.89%Vs51.11,52.22 Vs50.00),2种浓度间亦无显著差异。在胚胎培养液中分别添加10%的发情牛血清,比添加5%发情牛血清更使卵裂率和胚胎发育率显著升高(34.85 Vs23.58,39.13 Vs31.48),差异显著。通过自主设计的两对引物扩增公水牛特有的Sry基因以及公母水牛共有的水牛1.715卫星DNA序列,采用连续多重PCR方法,能够有效的对水牛早期胚胎进行性别鉴定。

水牛卵母细胞孤雌激活及孤雌胚与体外受精胚发育比较

对MII期水牛卵母细胞进行人工诱导激活可帮助人们间接判断体外成熟卵母细胞质量的优劣,且卵母细胞的充分激活也是提高核移植效率的关键因素之一。本试验比较了水牛卵母细胞体外成熟时间对孤雌激活胚发育能力的影响及不同化学激活方法对水牛卵母细胞孤雌激活效果的影响,并在相同条件下,对孤雌激活胚与体外受精胚的发育能力进行了比较。结果表明,水牛卵母细胞体外成熟27h或30h的囊胚发育率(19.0%or 17.7%)明显高于体外成熟21h或24h的囊胚发育率(12.3%or 13.8%);Ion联合6-DMAP激活水牛卵母细胞的效果优于其他激活方法;在相同条件下,孤雌激活胚的囊胚发育率显著高于体外受精胚(13.0%vs.21.7%)。

水牛卵母细胞孤雌激活及孤雌胚与体外受精胚发育的比较

目的对MII期水牛卵母细胞进行人工诱导激活,可以间接判断体外成熟卵母细胞质量的优劣,并且,卵母细胞的充分激活也是提高核移植效率的关键因素之一。比较了水牛卵母细胞体外成熟时间对孤雌激活胚发育能力的影响以及不同化学激活方法对水牛卵母细胞孤雌激活效果的影响,并在相同条件下,对孤雌激活胚与体外受精胚的发育能力进行了比较。结果表明,水牛卵母细胞体外成熟27 h或30 h的囊胚发育率(19.0%,17.7%)明显高于体外成熟21 h或24 h的囊胚发育率(12.3%,13.8%);Ion联合6_DMAP激活水牛卵母细胞的效果优于其他几组激活方法;在相同培养条件下,孤雌激活胚与体外受精胚的发育能力存在着差异,其中卵裂率差异不显著,但孤雌激活胚的囊胚发育率显著高于体外受精胚(21.7%,13.0%)。

水牛卵母细胞体外受精及其早期胚胎性别鉴定

从屠宰场收集了本地水牛卵巢380个,平均每个卵巢回收3.29枚可用卵母细胞。分别采用添加5%、10%自制发情牛血清和国产胎牛血清培养液体外成熟培养水牛卵母细胞,结果表明,发情牛血清影响牛卵母细胞体外成熟的效果与胎牛血清的效果无显著差异(48.89%Vs 51.11%,52.22%Vs 50.00%),2种浓度间亦无显著差异。在胚胎培养液中添加10%的发情牛血清,比添加5%发情牛血清的卵裂率和胚胎发育率显著升高(34.85%Vs 23.58%,39.13%Vs 31.48%),差异显著。通过自主设计的两对引物扩增公水牛特有的Sry基因以及公母水牛共有的水牛1.715卫星DNA序列,采用连续多重PCR方法,能够有效地对水牛早期胚胎进行性别鉴定。

水牛卵母细胞孤雌激活及孤雌胚与体外受精胚发育比较

比较了水牛卵母细胞体外成熟时间对孤雌激活胚发育能力的影响,以及不同化学激活方法对水牛卵母细胞孤雌激活效果的影响,并在相同条件下,对孤雌激活胚与体外受精胚的发育能力进行了比较。结果表明,水牛卵母细胞体外成熟27h或30h的囊胚发育率(19.0%、17.7%)明显高于体外成熟21h或24h的囊胚发育率(12.3%、13.8%);Ion联合6-DMAP激活水牛卵母细胞的效果优于其他几组激活方法;在相同条件下,孤雌激活胚与体外受精胚的发育能力存在着差异,其中卵裂率差异不显著,但孤雌激活胚的囊胚发育率显著高于体外受精胚。

水牛卵母细胞孤雌激活及孤雌胚与体外受精胚发育比较

对MⅡ期水牛卵母细胞进行人工诱导激活可以帮助人们间接判断体外成熟卵母细胞质量的优劣,并且,卵母细胞的充分激活也是提高核移植效率的关键因素之一。试验比较了水牛卵母细胞体外成熟时间对孤雌激活胚发育能力的影响以及不同化学激活方法对水牛卵母细胞孤雌激活效果的影响,并在相同条件下,对孤雌激活胚与体外受精胚的发育能力进行了比较。结果表明,水牛卵母细胞体外成熟27h或30h的囊胚发育率(19.0%or 17.7%)明显高于体外成熟21h或24h的囊胚发育率(12.3%or 13.8%);Ion联合6-DMAP激活水牛卵母细胞的效果优于其他几组激活方法;在相同条件下,孤雌激活胚与体外受精胚的发育能力存在着差异,其中卵裂率差异不显著,但孤雌激活胚的囊胚发育率显著高于体外受精胚(13.0%vs.21.7%)。

TDI用于CaCO_3/低密度不饱和聚酯树脂发泡的研究

以甲苯二异氰酸酯(TDI)为发泡剂,CaCO_3为填料制备了CaCO_3/低密度不饱和聚酯树脂(CaCO_3/LDUPR)发泡制品。通过理论分析和红外光谱实验确定TDI可以用作制备CaCO_3/LDUPR样品的发泡剂。通过表观密度和压缩强度的测试,结合扫描电子显微镜的分析,确定了采用TDI制备CaCO_3/LDUPR发泡制品的最佳条件。结果表明:当TDI质量分数为4%,CaCO_3质量分数为30%时,由TDI制备的CaCO_3/LDUPR样品的表观密度达到(0.48±0.02)g/cm3,比压缩强度为(37.19±1.49)MPa·g-1·cm3。TDI制备的CaCO_3/LDUPR样品的微观孔结构和性能均优于MDI和AIBN制备的发泡样品。

己二酸对不饱和聚酯树脂收缩和弯曲性能的影响

采用力学性能测试、红外光谱、示差扫描量热分析和电镜分析研究了己二酸对不饱和聚酯树脂(UPR)收缩和弯曲性能的影响,并与传统的聚乙酸乙烯酯(PVAc)大分子低收缩剂进行了比较。结果表明,己二酸对UPR的收缩率和弯曲强度的影响优于PVAc。己二酸与UPR中过量二元醇的前酯化反应在3.0 h时趋于完全,当己二酸用量为20 g(100 g UPR)时UPR的收缩率最低,达到(0.36±0.01)%,弯曲强度达(51.10±1.94)MPa。己二酸与UPR的前酯化反应消除了聚酯自聚,实现了UPR的理想聚合,固化的UPR基体形成了均相的微观结构,从而降低了UPR收缩率并改善了UPR的弯曲强度。

MDI用于CaCO_3/乙烯基不饱和聚酯树脂的研究

采用二苯基甲烷二异氰酸酯(MDI)改性CaCO_3并制备了CaCO_3/乙烯基不饱和聚酯树脂(UPR),通过力学性能测试及电镜分析研究了改性CaCO_3对材料性能的影响。结果表明,MDI改性的CaCO_3颗粒与UPR完全融合,呈现规律的显微结构。CaCO_3/UPR的弯曲强度和冲击强度高于γ-甲基丙烯酰氧基丙基三甲氧基硅烷(KH-570)改性的CaCO_3/UPR。