20种牡丹叶中总黄酮、总酚和芍药苷的含量测定及抗氧化活性研究

试验旨在测定20种牡丹叶中总黄酮、总酚和芍药苷含量及其抗氧化活性。试验以20个不同品种牡丹叶为研究对象,采用紫外分光光度法测定总黄酮、总酚含量,高效液相色谱法测定芍药苷的含量,采用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基、2,2-联氨-双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二胺盐(ABTS)自由基清除试验评价其抗氧化能力;采用相关系数法对不同品种牡丹叶中总黄酮、总酚、芍药苷的含量与抗氧化活性相关性进行分析,主成分分析法进行聚类评价。结果显示,20种牡丹叶中总黄酮含量为20.71~54.03 mg/g,总酚含量为68.31~188.19 mg/g,芍药苷含量为20.50~45.10 mg/g。牡丹叶中总黄酮、总酚、芍药苷的含量与DPPH自由基、ABTS自由基清除率的半抑制浓度(EC_(50))均具有显著负相关性;主成分分析将牡丹叶聚为4类,按花株色系差异存在一定的聚类。研究表明,牡丹叶中总黄酮、总酚和芍药苷的含量可作为评价其抗氧化能力的指标性成分。

恩诺沙星纳米粒的制备及其药剂学性质研究

目的:研制一种新型的恩诺沙星纳米粒制剂。方法:以聚乳酸为载体材料,采用溶剂挥发法制备了恩诺沙星聚乳酸纳米粒,对其形态学、载药量、包封率以及粒径分布等性质进行了研究,并对其进行相关的质量评价。结果:制备的恩诺沙星聚乳酸纳米粒的包封率平均为71.0%,载药量平均为11.3%,平均粒径为66.8 nm,粒径范围为30.0 nm^117.5 nm,电子透射显微镜下观察纳米粒,基本呈较光滑圆整的球形,大小较均匀,且粒径分布较窄。结论:制备工艺可行且制备的恩诺沙星聚乳酸纳米粒包封率相对较高,质量稳定,重现性好。

不同提取工艺牡丹籽油功能成分及抗氧化活性研究

以脱壳与带壳牡丹籽为材料,分别采用液压压榨、亚临界流体萃取、CO_(2)超临界流体萃取、螺旋压榨、正己烷萃取5种不同提取工艺制备牡丹籽油,测定其多酚、总黄酮含量及抗氧化活性,并进行相关性分析及主成分分析。结果表明:10种牡丹籽油中多酚、总黄酮含量及其抗氧化活性存在差异,牡丹籽油中多酚、总黄酮含量与其DPPH、ABTS自由基清除率的EC_(50)均存在显著负相关性;主成分分析能有效区分不同提取工艺制备的牡丹籽油品质,即亚临界流体萃取、CO_(2)超临界流体萃取>正己烷萃取>液压压榨、螺旋压榨。因此,牡丹籽油中多酚、总黄酮的含量可作为评价其抗氧化能力的指标性成分。

连翘叶中7种成分的抗氧化活性研究

试验旨在筛选出连翘叶抗氧化的主要药效物质,探讨其抗氧化的作用效果。采用化学法、过氧化氢诱导巨噬细胞RAW264.7损伤模型,以清除DPPH自由基、ABTS自由基、·O_(2)^(-)自由基和细胞抗氧化酶活力为指标,综合评价连翘叶中7种成分的抗氧化活性。结果显示,连翘叶中连翘酯苷A(FSA)、连翘酯苷B(FSB)、连翘酯苷H(FSH)和连翘酯苷I(FSI)成分对DPPH自由基、ABTS自由基、·O_(2)^(-)自由基均具有较好的清除能力。FSA、FSB、FSH和FSI可提高过氧化氢诱导的巨噬细胞RAW264.7中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性,提高还原性谷胱甘肽(GSH)含量,降低丙二醛(MDA)含量,改善过氧化氢诱导的细胞氧化损伤。经热图分析及主成分分析,发现FSA、FSB、FSH、FSI 4种苯乙醇苷类成分与抗氧化能力呈正相关。研究表明,连翘叶中的FSA、FSB、FSH、FSI 4种苯乙醇苷类成分具有较好的抗氧化活性,是连翘叶发挥抗氧化活性的主要药效物质。

响应面优化博爱赤松茸多糖提取工艺及其抑菌和抗氧化活性研究

优化博爱赤松茸多糖超声辅助提取工艺,并研究其抑菌和抗氧化活性。以多糖得率为评价指标,在单因素实验基础上,采用3因素3水平的Box-Benhnken设计优化赤松茸多糖超声辅助提取工艺;分别采用二倍稀释法和平板涂布法测定博爱赤松茸多糖提取物的最小抑菌浓度(Minium inhibitionconcentration,MIC)和最小杀菌浓度(Minimum bactericidal concentration,MBC);分别采用ABTS法和FRAP法测定博爱赤松茸多糖的抗氧化能力。结果表明:博爱赤松茸多糖超声辅助最佳提取工艺为超声温度62℃、料液比1:30(g/mL)、超声时间62 min,在此条件下,博爱赤松茸多糖的平均得率为13.25%,与理论预测值(13.35%)相对误差为0.75%。在供试的5种常见致病菌中,博爱赤松茸多糖提取物仅对鼠伤寒沙门氏菌具有较强的抑制作用,其MIC和MBC分别为6.25 mg/mL和12.5 mg/mL。博爱赤松茸多糖提取物具有较强的清除ABTS+自由基的能力和还原Fe3+的能力,且在一定质量浓度范围内呈量效关系,但均弱于相同质量浓度下的阳性对照VC。优化后的博爱赤松茸多糖超声辅助提取工艺稳定可行,且其提取物具有较强抗氧化活性和抑菌活性,但其抑菌作用具有选择性。

醋柳黄酮β-环糊精包合物的制备、鉴别与测定

目的:制备醋柳黄酮β-环糊精包合物,以增加醋柳黄酮的水溶性,改善其制剂制备性能。方法:用β-环糊精饱和水溶液法制备包合物,薄层色谱法对黄酮类有效成分进行鉴别并对形成的包合物进行验证,用紫外分光光度法测定原料药及包合物中药物的含量。结果:制备成淡黄色粉末状醋柳黄酮包合物,包合物的收得率为62.17%,平均包合率为9.49%。结论:醋柳黄酮中的黄酮类有效成分能被β-环糊精包合,具有较高的包合率。

VEGF纳米粒的制备及药剂学性质研究

目的：将VEGF制备为纳米粒，以提高VEGF在体内的稳定性，解决VEGF半衰期短等问题，并对所制备的VEGF纳米粒进行药剂学性质研究。方法：以无毒、可生物降解的聚氰基丙烯酸酯为材料，采用乳化聚合法制备VEGF纳米粒，对其外观形态、粒径分布、包封率和载药量以及体外释放进行考察。结果：制备了纳米粒胶体溶液及其冻干品：电子透射显微镜下观察纳米粒形态，外形为粒径比较均匀的球状或近球状的纳米粒，平均粒径为90nm，粒径范围为50～150nm；包封率大于85％，载药量约为42％，冻干品的再分散性良好。结论：本研究制备的VEGF纳米粒，包封率和载药量相对较高，质量稳定，重现性好。

牡丹籽粕多酚和黄酮提取工艺优化及其抗氧化和降糖活性研究

采用响应面法优化同时提取牡丹籽粕多酚和黄酮并检测其抗氧化和降糖活性,最优工艺为乙醇质量分数90%,提取温度85℃,提取时间50 min,料液比1∶40,在此条件下得到的多酚和黄酮提取量分别为(17.59±0.82)mg/g、(0.74±0.09)mg/g,并采用D101大孔树脂对牡丹籽粕提取液进行纯化得到牡丹籽粕多酚和黄酮成分,该成分对DPPH自由基、ABTS自由基的清除能力的IC50值分别为(313.67±42.67)μg/mL、(243.67±22.12)μg/mL,对铁离子还原能力为(438.78±3.36)μmol TE/g,对α-葡萄糖苷酶的半数抑制浓度IC_(50)值为(31.11±2.44)μg/mL,稍优于阿卡波糖IC50值(34.42±1.58)μg/mL.牡丹籽粕多酚和黄酮富集成分具有较好的抗氧化和降血糖活性.

构树叶的HPLC特征图谱及多成分含量测定

试验旨在建立构树叶HPLC特征图谱,同时测定8个成分的含量。采用Thermo Scientific Syncronis C18柱,乙腈-0.1%磷酸水溶液为流动相,检测波长330 nm。借助中药色谱指纹图谱相似度系统评价16批构树叶相似度,外标法测定8个成分含量,结合聚类分析和主成分分析评价不同批次构树叶品质和一致性。结果显示,16批构树叶特征图谱相似度较高,相似度在0.814~0.992。试验得到18个共有峰,并测定了芹菜素-7-O-葡萄糖醛酸苷、荭草苷、牡荆苷、异牡荆素、野黄芩苷、新绿原酸、隐绿原酸、绿原酸等8个成分的含量。主成分分析将16批样品聚为3类,样品分类趋势明显,聚类分析与主成分分析结果一致。研究表明,试验建立的方法简便、可靠,可同时测定构树叶中8个成分含量;8个成分能够体现构树叶整体分类信息,可将其作为构树叶特征成分。

响应面优化连翘叶总三萜提取工艺及其抗肿瘤活性研究

以总三萜提取率为评价指标,利用超声波提取技术结合单因素试验和响应面试验优化连翘(Forsythia suspensa(Thunb.)Vahl)叶总三萜的最佳提取工艺;并利用6种大孔树脂进行进一步纯化,再采用CCK-8法检测连翘叶总三萜对人乳腺癌MCF-7、MDA-MB-231细胞,肝癌HepG2、SNU-739细胞,结肠癌HT29、HCT116细胞的增殖抑制作用。结果表明,连翘叶总三萜最优提取工艺为乙醇浓度85%、料液比1∶40 g/mL、提取时间35 min、提取温度60℃,在此条件下连翘叶总三萜的提取率可达14.13%;D101型树脂为最佳树脂,经纯化的连翘叶总三萜的含量可达72.89%,连翘叶总三萜对MCF-7、MDAMB-231、HepG2、SNU-739、HT29和HCT116细胞的半数抑制浓度(IC50)分别为(6.29±0.34)、(9.51±0.71)、(12.05±1.23)、(9.91±0.94)、(22.82±0.65)、(23.45±1.01)mg/L。优化后的连翘叶总三萜提取工艺稳定简单,且其纯化后具有较强的抗肿瘤活性。

蒲公英根活性组分体外抗菌及抗炎作用

以市售蒲公英根为研究对象,采用乙醇提取、大孔树脂柱分离和活性跟踪相结合的方法优选蒲公英根抗菌抗炎活性组分,通过倍半稀释法测定蒲公英根不同组分对人、畜禽等9种常见病原菌的抑菌作用,通过脂多糖诱导的小鼠巨噬细胞RAW264.7炎症细胞模型评价各组分的抗炎活性。结果表明,蒲公英根抗菌抗炎活性组分的分离工艺为:70%乙醇回流提取后,用D101大孔树脂柱分离,其中,水洗脱之后的70%(体积分数)乙醇洗脱部位为蒲公英根的抗菌抗炎活性部位,即蒲公英根抗菌抗炎活性组分;该组分黄酮含量相对较高,且对9种供试菌具有较强的广谱抗菌性,大多数最小抑菌质量浓度为1.95 mg/mL,最小杀菌质量浓度均为31.25 mg/mL,对脂多糖诱导的小鼠巨噬细胞RAW264.7的炎症因子IL-6、IL-1β和TNF-α的浓度和转录水平均有显著抑制作用(P<0.05)。优选的蒲公英根抗菌抗炎活性组分分离工艺简便、高效,而且具有较强的广谱抗菌作用和良好的抗炎作用。

不同产地金银花提取物的指纹图谱及绿原酸、木犀草苷含量测定

通过15批不同产地金银花提取物的指纹图谱研究及其指标成分绿原酸、木犀草苷的含量测定,为合理评价金银花提取物质量提供参考.采用HPLC法建立15批金银花提取物指纹图谱,并采用外标法测定其指标成分绿原酸、木犀草苷的含量,指纹图谱共有模式的建立采用国家药典委员会"中药指纹图谱相似度评价系统软件(2012A)"进行处理分析. 15批金银花提取物指纹图谱中标定共有峰12个,确认9个,相似度高于0.94;15批金银花提取物的提取收率范围为35.60%～47.05%,绿原酸含量范围为3.33%～4.84%;木犀草苷含量范围为0.067%～0.091%.结果表明不同产地金银花提取物的指纹图谱、指标成分含量存在差异,又存在一定程度的相关性,为金银花提取物的评价及合理利用提供实验数据.

酶法辅助提取信阳毛尖香气成分

以信阳毛尖为研究对象,采用同时蒸馏萃取法(simultaneous distillation and extraction,SDE)提取,气相色谱-质谱(gas chromatography-mass spectrometry,GC-MS)进行检测,考察β-葡萄糖苷酶、果胶酶、中性蛋白酶及纤维素酶辅助对信阳毛尖香气成分提取的影响。结果表明,4种酶均可以提高信阳毛尖香气成分中醇类、萜烯类、酸类、酮类及其它成分个数及其相对含量,其中中性蛋白酶辅助提取的香气成分种类最多。β-葡萄糖苷酶辅助提取信阳毛尖香气成分得率最高,其次是中性蛋白酶。因此在信阳毛尖香气成分提取时添加β-葡萄糖苷酶和中性蛋白酶,既可以增加香气成分种类,又可以提高香气成分得率。

板蓝根多糖防治鸡传染性支气管炎的试验研究

探讨板蓝根多糖(IRPS)对人工感染鸡传染性支气管炎(IB)的防治效果。将180只12日龄白羽肉鸡随机均分为6组,分别为板蓝根多糖高剂量组、中剂量组、低剂量组,板蓝根多糖预防组,病毒对照组,健康对照组。除健康对照组外,其余各组每只鸡于15日龄接种IBV-M41病毒液0.2 mL。比较用药前后试验鸡的临床症状、生长性能、免疫器官指数、淋巴细胞亚群水平的差异,评价板蓝根多糖对鸡传染性支气管炎的防治效果。结果表明,板蓝根多糖预防组的发病率显著低于其他攻毒组(P<0.05);板蓝根多糖高剂量组、中剂量组与预防组的总有效率显著高于病毒对照组(P<0.05),分别为90.00%、86.67%、93.33%;板蓝根多糖高剂量组、中剂量组、预防组鸡的料重比显著低于病毒对照组(P<0.05)。同时,板蓝根多糖可促进感染鸡的免疫器官发育,显著提高感染鸡CD3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+)T淋巴细胞比率。说明板蓝根多糖对鸡传染性支气管具有较好的预防和治疗作用,在实际生产中可以推广应用。

大卫颗粒的质量标准提高

目的:提高大卫颗粒的质量标准。方法:对制剂中连翘、金银花、柴胡及甘草进行薄层色谱(TCL)鉴别;采用高效液相色谱法(HPLC)同时测定制剂中绿原酸、连翘酯苷A、黄芩苷的含量。结果:连翘、金银花、柴胡及甘草的TLC图斑点清晰,分离度好,阴性对照无干扰。绿原酸、连翘酯苷A、黄芩苷检测质量浓度线性范围分别为5.228～52.28(r=0.999 9)、5.92～59.20(r=0.999 8)、6.816～68.16μg·mL^(-1)(r=0.999 9);精密度、稳定性、重复性试验的RSD<2.0%;平均加样回收率分别为101.84%(RSD=0.44%,n=6)、99.07%(RSD=0.79%,n=6)、101.30%(RSD=0.62%,n=6)。结论:该研究所建标准定性定量方法简便、专属性强、结果准确可靠,可用于大卫颗粒的质量控制。

基于UPLC-MS/MS技术测定药材中川楝素的方法研究

为了建立并验证一个液相色谱串联三重四级杆质谱法(LC-MS/MS)测定药材中的川楝素,供试品经甲醇水浴回流提取后,采用Agilent Eclipse Plus C18色谱柱(4.6 mm×100 mm,3.5μm),以乙腈-0.01%甲酸水溶液为流动相梯度洗脱,流速为0.5 mL/min,柱温30℃,进样量2μL.质谱条件为电喷雾电离源(ESI),负离子模式,选择离子监测(SIM),用于定量的离子为573.1.结果显示,川楝素在42.73~2 136.40 ng/mL范围内线性关系良好(R2=0.999 6),加样回收率为99.34%~106.53%,日内、日间精密度(RSD)均低于3%,最低检出限(LOD)为0.92 mg/kg,最低定量限(LOQ)为3.05 mg/kg,稳定性较好.说明所建方法能够高效快捷地对川楝素进行测定,且方法简便、专属性强、灵敏度高,测定结果准确可靠,适用于川楝子、苦楝皮中川楝素的定性定量测定,也为其新制剂的设计和开发提供方法参考.

顶空-气质联用法分析4个洛阳牡丹品种的鲜花香气成分

以4个洛阳牡丹品种的鲜花为研究对象,采用顶空-气相色谱质联用法(HS-GC-MS)测定其香气成分及相对含量.4个品种的牡丹鲜花共鉴定出69种成分,肉芙蓉中香气成分26种,海黄中香气成分32种,香玉中香气成分39种,丹凤中香气成分39种,均包括醇类、醛类、酯类、萜烯类、烷烃类及其他类成分;四种牡丹中含有13种共有成分,而海黄、香玉、丹凤分别有8种、12种、13种特有的香气成分.

HPLC法测定不同产地生姜中姜酚类成分的含量

采用HPLC法测定不同产地生姜中姜酚类成分的含量,采用Agilent ZORBAX-SB C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-0.1%甲酸溶液为流动相进行梯度洗脱,流速1.0 mL/min,柱温35℃,检测波长282 nm,用标准曲线法分别对6-姜辣素、8-姜酚和10-姜酚定量.结果显示,6-姜辣素、8-姜酚和10-姜酚分别在1.005~100.5μg/mL(r=1)、1.001~100.1μg/mL(r=0.999 9)和0.996 5~99.65μg/mL(r=0.999 9)范围内线性关系良好;平均回收率(n=6)分别为99.31%(RSD 1.26%)、98.69%(RSD 1.48%)、98.55%(RSD 1.44%).测定的14批不同产地的生姜及不同部位,6-姜辣素、8-姜酚和10-姜酚含量存在一定的差异.由此认为所建立的方法准确、可靠、重现性好,能快速有效地测定生姜及不同部位的含量.

指纹图谱结合一测多评法测定金银花叶的化学成分

为开发利用金银花叶资源,采用HPLC-DAD方法建立金银花叶HPLC指纹图谱,并用一测多评法(QAMS)和外标法相结合的质量评价模式,测定一年12个月不同时期内金银花叶中12种成分的含量,验证此方法测定金银花叶成分的可行性和准确性.结果显示,12个月中金银花叶的HPLC指纹图谱相似度大于0.925;QAMS法测得的金银花叶中12种成分含量与外标法测定结果相比较,两组数据无显著性差异(P>0.05).由此说明,指纹图谱与QAMS相结合评价金银花叶质量的方法简便、准确度高、重复性好,可为金银花叶的质量评价提供参考,为金银花叶的进一步开发利用提供依据.

艾草粉对蛋鸡产蛋性能、蛋品质、鸡蛋营养成分、肠道形态及肠道菌群的影响

试验旨在探究艾草粉对蛋鸡产蛋性能、蛋品质、鸡蛋营养成分、肠道形态及肠道菌群的影响。试验选用360只50周龄体重与产蛋率相近的大午金凤蛋鸡,随机分为4组,每组6个重复,每个重复15只,以基础日粮饲喂并分别添加0(对照组)、1%、2%、3%艾草粉,试验期56 d。试验期间,以每个重复为单位统计其产蛋性能;在第28和56天,分别从各重复中取3个鸡蛋进行蛋品质检测;在第56天,分别从各重复中取3只蛋鸡,取十二指肠、空肠和回肠组织,分析肠道形态;刮取十二指肠、空肠和回肠黏膜,检测γ干扰素(IFN-γ)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、闭合小环蛋白1(ZO-1)、闭锁蛋白1(CLDN1)和咬合蛋白(Occludin)含量;取盲肠内容物分析肠道微生物多样性及相对丰度的差异。结果显示:与对照组相比,2%、3%艾草粉组蛋鸡平均日产蛋重显著增加(P<0.05),料蛋比显著降低(P<0.05);2%艾草粉组鸡蛋中不饱和脂肪酸的含量显著增加(P<0.05),2%、3%艾草粉组鸡蛋中胆固醇含量显著降低(P<0.05)、Fe和Se含量显著升高(P<0.05);1%、2%艾草粉组蛋鸡空肠绒毛长度显著增加(P<0.05),1%、2%、3%艾草粉组回肠绒隐比显著增加(P<0.05);2%艾草粉组小肠黏膜γ干扰素、闭合小环蛋白1、闭锁蛋白1、咬合蛋白含量显著增加(P<0.05),肿瘤坏死因子α含量显著降低(P<0.05);2%、3%艾草粉组蛋鸡肠道菌群Simpson指数显著提高(P<0.05),有益微生物拟杆菌属和乳杆菌属丰度增加(P<0.05)。综上,饲粮添加2%艾草粉对蛋鸡产蛋性能、蛋品质、肠道形态及肠道菌群的改善效果最佳。