新奥霉素发酵液的理化性质和提取方法研究

新奥霉素是本实验室从一株诺尔斯链霉菌的发酵液中,分离得到的新型核苷类农用抗生素。对发酵液理化性质的研究表明,新奥霉素是一种水溶性抗生素,具有较好的紫外和热稳定性,适合在酸性条件下保存。探索了两种提取新奥霉素的工艺。新奥霉素发酵液经助滤剂过滤预处理后,采用微滤-纳滤组合分离法,可以获得活性收率90%以上的新奥霉素浓缩液;采用4倍体积无水乙醇沉淀和两次正相硅胶柱层析,可以获得白色或淡黄色新奥霉素粉末。

独角莲抗肿瘤活性成分初步研究

目的对独角莲的抗肿瘤活性成分进行初步研究。方法通过抑瘤活性检测追踪活性部位,采用水提醇沉法以及离子交换树脂法对独角莲水提物进行HPLC分离纯化。结果活性追踪法研究结果显示,离子交换树脂分离纯化组分Fr.2和Fr.4对小鼠S180实体瘤具有显著的抑瘤活性;组分Fr.4经HPLC纯化得单体化合物1,通过MS、NMR以及与对照品比对确定其为L-精氨酸。用同等剂量的L-精氨酸对照品作对照,发现抑瘤活性与化合物1基本一致。结论初步证明独角莲抗肿瘤活性的有效成分之一是L-精氨酸。

茯苓对温和慢性不可预知应激大鼠行为学及粪便菌群的影响

目的研究茯苓对慢性不可预知温和应激抑郁模型大鼠行为学及粪便菌群的影响。方法采用大鼠慢性不可预知温和应激模型(chronic unpredictable mild stress,CUMS),进行糖水偏好实验评价茯苓给药大鼠的快感缺失情况,采用旷场实验进行大鼠行为学分析,采用16S rRNA基因测序方法进行粪便菌群物种差异分析。结果与正常组比较,模型组大鼠体重及糖水消耗率明显下降,自主活动明显减弱,粪便菌群物种丰富度和物种多样性减少,门水平上的拟杆菌门和变形菌门水平升高,厚壁菌门水平下降,属水平上的乳酸菌属水平下降;大鼠给予茯苓微粉后,与模型组比较,茯苓微粉组大鼠体重及糖水消耗量显著提高(P<0.05),自主活动显著增强(移动距离增加、进入中央次数增加、垂直次数增加)且差异极显著(P<0.01),粪便菌群物种丰富度和物种多样性增加,门水平上的拟杆菌门和变形菌门水平降低,厚壁菌门水平上升;属水平上的乳酸菌水平上升。结论茯苓微粉通过降低拟杆菌门和变形菌门的水平以及恢复厚壁菌门和乳酸菌属的水平来实现抗抑郁作用。

马钱苷元的制备及抗炎活性研究

目的研究马钱苷元的制备工艺,并探讨马钱苷元的抗炎活性。方法以马钱苷为原料用Smith降解法制备马钱苷元,用HPLC、MS等方法对马钱苷元进行结构确证,以二甲苯引起的小鼠耳肿胀模型评价其抗炎活性。结果经Smith降解可反应得到马钱苷元,不同剂量的马钱苷元对二甲苯致小鼠肿胀均有不同程度抗炎活性,高剂量组最明显。结论可用Smith降解法制备马钱苷元,马钱苷元具有明显的抗炎活性。

基于BDNF/TrkB/CREB通路探讨参苓开心颗粒的抗抑郁作用机制

研究参苓开心颗粒(Shenling Kaixin Granules)对慢性不可预知性温和应激(chronic unpredictable mild stress,CUMS)模型大鼠的抗抑郁作用机制。将90只雄性SD大鼠随机分为对照组、模型组、舒肝解郁胶囊(110 mg·kg^(-1))组及参苓开心颗粒低(90 mg·kg^(-1))、中(180 mg·kg^(-1))、高(360 mg·kg^(-1))剂量组,通过CUMS法复制抑郁大鼠模型,实验结束后通过糖水偏好、旷场、高架十字迷宫及强迫游泳等实验评估大鼠行为学变化;ELISA检测血清白细胞介素1β(interleukin 1β,IL-1β)、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factorα,TNF-α)、脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)、5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)含量,检测海马CA1区超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、过氧化氢酶(catalase,CAT)活性;苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色检测海马CA1区病理变化;Western blot检测海马CA1区神经生长因子(nerve growth factor,NGF)、BDNF、酪氨酸激酶受体B(p-TrkB/TrkB)、环磷腺苷效应元件结合蛋白(p-CREB/CREB)、核因子E2相关因子2(nuclear factor E2 related factor 2,Nrf2)、血红素加氧酶1(heme oxygenase 1,HO-1)、B淋巴细胞瘤-2基因(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)/Bcl2关联X蛋白(Bcl-2 associated X protein,Bax)、胱天蛋白酶3(caspase-3)表达水平的变化。结果显示,与对照组相比,模型组大鼠糖水偏好减少,旷场实验进入中央次数、中央时间及运动总距离缩短,高架十字迷宫实验进入开臂次数及时间百分比减少,强迫游泳实验不动次数及时间增加;血清IL-1β、TNF-α含量增加,BDNF、5-HT含量下降;海马CA1区SOD、CAT活性下降,NGF、BDNF、p-TrkB/TrkB、p-CREB/CREB、HO-1、Bcl-2/Bax表达下调,Nrf2核转移降低,caspase-3表达上调。与模型组相比,各给药组大鼠糖水偏好系数、进入中央次数、中央时间、运动总距离、进入开臂次数及时间百分比均增加,强迫游泳不动次数与时间均缩短;血清IL-1β、TNF-α含量下降,BDNF、5-HT含量增加;海马CA1区SOD、CAT活性增强;NGF、BDNF、p-TrkB/TrkB、p-CREB/CREB、HO-1、Bcl-2/Bax表达上调,Nrf2核转移增加,caspase-3表达下调。综上表明,参苓开心颗粒可能通过激活BDNF/TrkB/CREB通路增加Nrf2核转移,降低海马氧化应激损伤,抑制caspase-3活性,降低海马神经细胞的凋亡,发挥抗抑郁作用。

基于网络药理学和分子对接方法研究山花晶颗粒抗视疲劳的作用机制

目的基于网络药理学探讨山花晶颗粒抗视疲劳的作用机制。方法利用中药系统药理学分析平台(TCMSP)和中药分子机制的生物信息学分析工具(BATMAN)筛选山花晶颗粒的活性成分和潜在作用靶点,通过STRING数据库富集信号通路;采用Cytoscape软件分析蛋白质-蛋白质相互作用(protein-protein interaction,PPI)网络中的关键靶点,采用分子对接实验对主要活性成分和关键靶点的结合能力进行验证。结果山花晶颗粒筛选出槲皮素、熊果酸、大黄素等66个主要活性成分以及多巴胺受体D2(dopamine receptor D2,DRD2)、5-羟色胺受体1A(5-hydroxytryptamine receptor 1A,HTR1A)、毒蕈碱型胆碱受体M2(cholinergic receptor muscarinic 2,CHRM2)等34个潜在作用靶点,富集分析出神经活性配体-受体相互作用、钙信号通路、环单磷酸腺苷(cyclic adenosine monophosphate,cAMP)信号通路等35条相关信号通路,分子对接结果表明主要活性成分与关键作用靶点的对接构象合理。结论山花晶颗粒能够通过"多成分-多靶点-多通路"抑制细胞凋亡和炎性因子的产生,从而减轻眼部细胞氧化和损伤,发挥抗视疲劳的作用。