鸡源大肠杆菌耐药性分析及中药对大肠杆菌耐药性消除作用的研究

研究鸡源大肠杆菌耐药性及中药对大肠杆菌耐药性消除作用。选择22种抗生素采用Kirby-Bauer法对山西省部分地区分离的20株致病性鸡源大肠杆菌进行耐药性检测,对分离菌株进行质粒分析和耐药质粒转化试验,并分析多种中药对大肠杆菌耐药性的消除作用。结果显示,20株试验菌对测试抗生素均存在不同程度的耐药性,其中5耐及5耐以上的菌株占分离菌株的90%,试验菌对青霉素耐药率最高(90%),其次为恩诺沙星(85%),而对黏杆菌素和呋喃妥因的耐药性最低;分离出12种质粒谱型,同一地区、同一鸡场菌株的质粒图谱相同或相似,不同地区菌株的质粒图谱不同,仅有部分相同或相近的流行质粒共存;对其中5株菌株进行耐药质粒的转化试验,发现同一质粒可编码1个至数个耐药性基因,不同质粒可以携带相同的耐药性基因;中药单剂或合剂对大肠杆菌的耐药性有一定的消除作用,其中黄芩的消除效果最好,中药处理后部分菌株质粒图谱无变化,只有黄连和双黄连造成2条质粒带丢失;对中药提取物作用后的消除子进行药敏试验,结果发现大肠杆菌对环丙沙星等多种抗生素恢复了敏感性。研究结果提示联合使用中药治疗鸡源大肠杆菌病有显著效果。

MDV感染B19、B21单倍型SPF鸡外周血淋巴细胞BLec1、BNK及细胞因子基因转录水平比较

本研究旨在揭示BLec1、BNK及细胞因子在B21和B19两种单倍型鸡对马立克病(MD)抗性差异中的可能机制。分别对B21和B19单倍型1日龄鸡腹腔接种马立克病毒(MDV)超强毒株,在攻毒后不同时间检测鸡外周血淋巴细胞中BLec1、BNK及IFN-γ、IL-4、IL-10和IL-18的基因转录水平。结果显示,在第4、7天,两种鸡BNK、BLec1和4种细胞因子水平表现出不同程度的降低。在第10天,B21单倍型鸡中BNK、BLec1、IFN-γ、IL-4和IL-18基因转录量出现不同程度的升高,而B19单倍型鸡中细胞因子转录水平有所下降。在第13天,B21单倍型鸡中BNK、BLec1、IL-18和IL-10基因转录量表现出不同程度的升高,而B19单倍型鸡中则有所下降。以上结果总体表明,MD耐受型鸡在感染沉默期BNK、BLec1和细胞因子转录量高于敏感型,不同遗传基因型鸡对MD的抗性差异与耐受基因及细胞因子的转录情况有着密切的关系。

福美双诱发肉鸡胫骨软骨发育不良早期生长板消减cDNA文库的构建

【目的】为应用cDNA芯片技术筛选肉鸡胫骨软骨发育不良(TD)时序性差异表达基因,本研究构建了早期生长板消减cDNA文库。【方法】将7日龄AV肉鸡随机分为两组,对照组(control,C)饲以基础日粮,试验组(thiram diet-fed,T)饲以基础日粮添加福美双100 mg·kg-1,2 d后继续饲以基础日粮,诱发肉鸡TD。应用抑制消减杂交技术(SSH)构建正反向消减cDNA文库,用PCR验证两个文库中克隆的插入片段,随机抽取100个阳性克隆测序,对所测序列同源性分析和功能预测。【结果】从两个文库共获得2 227个有效阳性克隆,插入片段大小主要分布在200—1 000bp之间;所测序列中有97条ESTs与GenBank中的鸡基因序列同源性达到99%,且非冗余度达到68.7%;此外,有3条ESTs未找到同源序列。这些基因具有构成细胞外基质,参与软骨内骨化和骨的重构,调节骨发育,行使信号转导、血管发生,参与电子传递及能量代谢等功能。【结论】成功构建了消减cDNA文库,将为进一步点制cDNA芯片,筛选不同阶段的差异表达基因奠定了基础,也为肉鸡TD机理研究提供新线索。

鸡毒支原体胶体金免疫层析试纸条的研制和初步应用

为研制一种用于快速检测鸡毒支原体(MG)的胶体金免疫层析试纸条,采用直径20nm的胶体金颗粒标记纯化的MG多克隆抗体,硝酸纤维素膜检测线和质检线分别喷加纯化的MG多克隆抗体和兔抗鸡IgG抗体,制作胶体金试纸条。试纸条检测MG阳性显示两条红色反应条带;阴性为一条红色反应带。本试纸条可检测到1∶1 280倍稀释的MG抗原,即颜色变化单位为8×104 CCU/mL,具有高度的灵敏性。用试纸条检测衣原体、滑液支原体、猪肺炎支原体、鸡大肠埃希菌和鸡白痢沙门菌等均呈阴性,表明该试纸条具有较好的特异性。对试纸条检测呈MG阳性的38只病鸡进行MG培养验证,所得结果一致;同时对MG培养检测的另外95份病鸡样品进行试纸条测试比对,符合率为96.84%,证明该试纸条具有很高的准确性。该胶体金免疫层析试纸条检测MG操作简单,灵敏度、准确度、特异性等均符合要求,可以用于养殖场批量MG的检测。

畜禽清瘟败毒散对鸡白痢的防治效果

永济市某肉种鸡场使用强制换羽后，种鸡继续饲养，并进行孵化和育雏。在育雏过程中，发现弱雏较多，精神萎顿，羽毛下垂，被毛无光，食欲不振，拉黄白色糊状粪便；剖检病死鸡发现肺部、十二指肠及直肠有灰白色结节，肝脏肿大，有坏死点，肾脏肿大并有尿酸盐沉积，心肌有硬...

种猪猪瘟单抗的检测

本文应用猪瘟单抗酶联试剂先后检测了２０９份种猪血清抗体。１９９７年检测结果表明：猪群的猪瘟弱毒抗体阳性率为２９４％，强毒抗体阳性率为９２％。说明该猪群免疫效果不确实，且有猪瘟强毒感染。通过加强免疫和淘汰强毒抗体阳性猪，使得猪瘟弱毒抗体阳性率在１９９８年达到了８１０％，猪瘟强毒抗体阳性率下降为１０％。对强毒阳性猪再淘汰，并加强消毒，基本上净化了该猪场。说明猪瘟单抗酶联试剂可用于检测猪瘟的免疫水平，同时对种猪的隐性感染可作出早期诊断。

用Dot-ELISA检测鸡新城疫病毒的研究

本文建立了检测鸡新城疫病毒的Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ法。用该法检测自然发病鸡群的粪便样品和脾组织匀浆各８２份，鸡新城疫病毒的检出率（５１．２％、７４．４％）高于血球凝集试验（３６．６％、６１．０％），且两种方法具有良好的平行关系。该法操作简单，结果明显、直观，适用于基层检测鸡新城疫病毒。

雏鸡绿脓杆菌病的诊治

绿脓杆菌是一种条件性病原微生物，感染雏鸡时可引起大批死亡，造成较大经济损失。近年来该病的发生有增多趋势，应引起畜牧兽医工作者及养鸡人员的高度重视。１９９７年１０月份晋中地区几个鸡场陆续发生１～７日龄雏鸡大批死亡的现象，死亡率达１７％～５０％。经临诊观...

市售白条鸡中病死鸡的识别要点

随着我国养鸡业的迅猛发展,鸡肉在人们的肉食品中所占的比例越来越大。然而,在养鸡业中仍以蛋鸡饲养占主要规模,在许多的中小城镇,市售白条鸡以淘汰蛋鸡为主。随着养鸡规模的不断扩大而又相对集中,鸡病的发生也越来越频繁、种类也越来越多。

附红细胞体自然感染对猪红细胞的影响

选择临床健康的 2月龄附红细胞体自然感染仔猪 1 5头 ,每周采血一次 ,连续 4次 ,观察红细胞的形态 ,并测定RBC、红细胞脆性 (最小脆性和最大脆性 )、红细胞ATPase和SOD活性、红细胞C3b受体 (E_C3bRR)率和红细胞免疫复合物花环 (E_ICR)率。检测结果 :随着猪附红细胞体感染强度的增强 ,所测定指标的变化无明显规律性或无明显差异 (P >0 .0 5 ) ,但红细胞脆性增高、红细胞ATPase和SOD活性及E_C3bRR率和E_ICR率均有降低趋势。表明猪感染附红细胞体后 ,红细胞易破裂而溶血、红细胞内外阳离子平衡失调、红细胞抗氧化能力降低、红细胞免疫功能下降。

黄芪多糖对鸡新城疫和传染性腔上囊病疫苗免疫力的影响

将黄芪多糖 (APS)分别按 0、2 .5、5 .0、10 .0mg/只 ,以点眼、滴鼻、皮下注射、肌肉注射的不同方式 ,分别与鸡NDⅠ系、NDⅣ系、ND油乳剂苗和IBD冻干苗同时接种于 4组 (每组 35只 )健康非免疫雏鸡 ,对血清中ND、IBD抗体效价及脾、腔上囊重量的变化进行了动态观察。检测结果 :各APS组血清ND、IBD抗体效价显著高于APS空白组 (P <0 .0 5 ) ,其中以APS 5 .0mg/只组的抗体效价最高 ;除ND油乳剂苗各APS组和NDⅣ系APS 2 .5mg/只在 12日龄测定值外 ,各APS组脾和腔上囊重量显著高于APS空白组 (P <0 .0 5 )。试验表明 ,APS可用作鸡疫苗的免疫佐剂提高鸡的免疫力 ;点眼、滴鼻、皮下注射、肌肉注射的接种方式不影响APS提高鸡免疫力的作用 ;APS以 5 .

黄芪多糖提高鸡抗氧化作用对免疫功能的影响

本实验观察了黄芪多糖 (APS)对正常雏鸡血清中GSH -Px、SOD活性及MDA含量的影响。在不同日龄 (5d、 14d、 2 5d)、不同APS剂量 (0、 2 5、 5、 10mg/只 )水平下 ,以点眼滴鼻、皮下注射、肌肉注射的不同给药方式使用APS后 ,各试验组血清GSH -Px、SOD活性均表现显著升高 (p <0 0 5 ) ,MDA含量均表现显著降低 (p <0 0 5 )。表明APS可提高鸡的抗氧化作用 ,提示APS可通过增强免疫器官中GSH -Px、SOD活性提高免疫防御和免疫监视。

福美双诱导的肉鸡胫骨软骨发育不良软骨细胞凋亡

为研究肉鸡胫骨软骨发育不良(TD)软骨细胞的凋亡分布及凋亡相关基因的表达水平,将80羽1日龄健康AA肉鸡基础日粮饲养1周后,随机分为对照组和处理组,处理组饲喂添加100mg·kg-1福美双的日粮,采用HE染色和TUNEL法分别对肉鸡胫骨生长板软骨细胞的形态学和凋亡情况进行观察,同时采用Real-time PCR方法和免疫组化技术分别对软骨细胞中凋亡相关基因的mRNA转录水平及蛋白质表达水平进行检测。结果显示,福美双诱发TD后第1、2、4和6天,肉鸡生长板软骨栓形成逐渐增大,异常软骨细胞增加,TD病变区软骨细胞,尤其是肥大区软骨细胞凋亡程度明显增加。Real-time PCR检测结果显示,与对照组比较,TD生长板促凋亡基因Bax在试验第1、2、4和6天表达量极显著上调(P<0.01);Caspase-3在第1、2和4天表达量极显著增加(P<0.01);抗凋亡基因BAG-1表达下调,在试验第1和2天差异极显著(P<0.01)。免疫组化结果显示,第1和4天处理组Bax的蛋白表达量明显高于对照组。本研究提示肉鸡TD生长板软骨细胞凋亡与促凋亡基因的表达增强和抗凋亡基因的表达下降有关。

四甲基秋兰姆二硫化物对肉鸡胫骨生长板超微结构的影响

本研究拟研究四甲基秋兰姆二硫化物(福美双)对肉鸡胫骨生长板超微结构的时序性影响。7日龄AA肉鸡饲喂含100mg·kg-1福美双的饲料48h,分别在8、9、13日龄剖杀试验鸡,迅速采取胫骨生长板放入2.5%戊二醛溶液于4℃固定,制备超薄切片,用透射电镜做超微结构观察。结果发现:8日龄鸡增殖软骨细胞变圆、坏死,线粒体增多、稍肿胀、出现致密颗粒,内质网断裂扩张呈泡状,而9日龄时更为严重;在8、9日龄时,前肥大软骨细胞多数无完整的细胞结构、细胞质溶解、有疑似凋亡细胞,13日龄时,前肥大软骨细胞已有完整的细胞结构,但细胞器仍呈坏死状、分泌旺盛。由此可见,福美双在短时间内可导致胫骨生长板增殖细胞、前肥大软骨细胞坏死,且前肥大软骨细胞更易受损,影响了软骨细胞的正常发育,推测其可能引发能量代谢障碍,并干扰了细胞内信号转导,使细胞周期紊乱,从而引发肉鸡胫骨软骨发育不良。

养殖企业(户)如何才能规避免疫风险并提高免疫应答——猪病免疫预防的关键点

如何有效预防与控制疾病的发生与流行,保障畜牧业持续健康发展,成了养猪业迫在眉睫的问题。其中疫苗的免疫接种是控制猪传染性疾病最重要的手段之一,尤其是在病毒性疾病的防制中,由于没有有效的药物进行治疗或预防,因而免疫预防显得更为重要。然而,疫苗的免疫接种并不是一劳永逸的事情,比如免疫过猪瘟疫苗的猪只仍然可能表现猪瘟临床症状或剖检后可见到明显的猪瘟病变;免疫过蓝耳病疫苗的猪只还会患高致病性蓝耳病等。那么,为什么会有这种情况发生呢?专家就此从专业角度进行了认真的剖析并给出了答案,希望能对读者走出误区并及时发现、排除干扰免疫接种疫苗效果的环节、因素有切实的帮助。专家提醒,猪高致病性蓝耳病灭活苗只用于健康猪,不应用于发病和感染猪群,对妊娠母猪应慎用,避免引起机械性流产,屠宰前21日不得进行接种;疫苗预防能力的产生是有条件的,其中重要的一条就是待免猪本身是健康的,同时还应保证良好清洁的饲养环境、安全的饲料和科学的饲养管理。

超级细菌的产生和预防

细菌的耐药性是由于各种抗菌药物的广泛使用,致病微生物加强其防御能力,抵抗抗菌药物的杀伤,从而对抗菌药物敏感性降低甚至消失的现象。引起细菌耐药性快速产生的原因是复杂的,细菌的耐药机理也是多方面的。本文从细菌耐药性产生的原因、机理、超级细菌的危害和应对措施几方面对其进行了阐述。

动物医学专业“指导—自学—实践”三结合教学模式研究

动物医学专业实践性强,经济社会发展对动物医学人才的综合素质提出了更高的要求;分析了目前动物医学教学存在的问题和原因;提出了多层次指导、多形式自学、多元化实践相结合的实践教学模式;形成了配套的教学文件,促进了教学基地建设,拓宽了实践教学渠道,提高了青年教师的整体素质,培养了高素质的学生,激发了学生自主学习兴趣,初步证实了该模式的科学性和可行性。得出此模式对同类院校的教学改革具有一定的参考、推广价值。

鸡β-防御素在大肠杆菌中的高效表达及复性

鸡β-防御素(gallinacin-3,Gal3)是鸡体内重要的防御因子,本试验研究了鸡Gal3融合蛋白在大肠杆菌中高效表达的规律,并探索了重组蛋白质的复性工艺.结果表明,加入诱导剂后1h,开始有可检出量的重组蛋白质表达,2h的表达水平已接近最大量;化学诱导剂IPTG 0.2～1.2mol/L对重组蛋白的产量没有明显影响.经Lablmage软件分析,融合蛋白的产量可达菌体总蛋白的35%以上,且主要以包涵体形式存在.将所获包涵体用8mol/L尿素溶解后,分步稀释于含有氧化型谷胱甘肽和还原型谷胱甘肽的复性系统中,重组蛋白得到完全复性.12mg/L复性的重组鸡Gal3能抑制肠炎沙门氏菌的生长,24mg/L能抑制肠致病型大肠杆菌的生长.