阿司匹林抑制胃癌干细胞的机制研究

目的探讨阿司匹林对胃癌干细胞有无抑制作用及可能机制。方法用RMPI-1640培养液培养人胃癌细胞株SGC7901,无血清培养基悬浮培养抽提富集微球体。MTT法检测阿司匹林对SGC7901细胞微球体生长的抑制情况。平板克隆实验观察阿司匹林对SGC7901微球体细胞克隆形成的影响。Transwell小室实验观察阿司匹林对SGC7901微球体迁移侵袭能力的影响。Western blot检测经过阿司匹林孵育后胃癌干细胞E2F1和Sox2蛋白的表达情况。结果阿司匹林对人胃癌细胞株SGC7901微球体细胞的增殖、克隆形成、迁移和侵袭能力具有显著的抑制作用。阿司匹林可剂量依赖性下调胃癌干细胞中E2F1和Sox2蛋白的表达。结论阿司匹林对人胃癌细胞株SGC7901微球体细胞的恶性行为具有抑制作用,其抑制作用与E2F1和Sox2蛋白表达下降有关。

大麦芽碱盐酸盐通过诱导凋亡抑制Hela细胞的恶性行为

目的研究大麦芽碱盐酸盐对Hela细胞的抑制作用及作用机制。方法使用MTT法、平板克隆来检测Hela细胞的增殖能力,用划痕实验、transwell实验来检测Hela细胞的迁移能力,使用凋亡与坏死检测试剂盒来检测大麦芽碱盐酸盐能否诱导Hela细胞出现凋亡,使用蛋白免疫印迹法来检测Hela细胞中Bax、Bcl-2和Caspase3蛋白水平的表达。结果大麦芽碱盐酸盐可呈剂量依赖性抑制Hela细胞的增殖和迁移,诱导Hela细胞凋亡;经大麦芽碱盐酸盐处理后Hela细胞中Bcl-2呈下调趋势,Bax和Caspase3呈上调趋势,且有剂量依赖性。结论大麦芽碱盐酸盐可抑制Hela细胞的增殖和迁移,且通过上调Bax、Caspase3和下调Bcl-2的表达来诱导该细胞凋亡。

阿苯达唑对人食管鳞癌细胞KYSE-150的抑制作用

目的研究阿苯达唑对食管鳞癌KYSE-150细胞的抑制效果及作用机制。方法通过MTT法和克隆形成实验评估KYSE-150细胞的增殖能力,利用划痕和Transwell小室实验证明细胞的迁移和侵袭能力。同时,采用凋亡与坏死检测试剂盒检测阿苯达唑是否能够诱导KYSE-150细胞凋亡,并利用Western blot实验探讨凋亡相关蛋白BAX、Bcl-2、P53的表达水平。结果阿苯达唑能够以剂量依赖性的方式抑制KYSE-150细胞的活力、增殖、迁移和侵袭能力。YO-PRO-1/PI双染检测结果表明,阿苯达唑能够诱导细胞凋亡,同时使Bcl-2蛋白表达下调,而BAX、P53蛋白表达上调。结论阿苯达唑对食管鳞癌KYSE-150细胞的增殖与迁移具有显著抑制作用,其机制可能与对凋亡相关蛋白的调控有关。

干细胞治疗中枢神经退行性疾病的研究进展

近年来,干细胞已成为生命科学医药研究的关注点之一,所衍生出的干细胞移植替代疗法主要通过特定的方式,将细胞移植于病灶部位并实现分化,重塑具有正常功能的细胞及组织,继而实现疾病治愈的目标。本文通过相关中英文文献进行检索,综述干细胞治疗中枢神经退行性疾病的最新治疗现状,为后续学者提供一定的参考价值。

MicroRNA在心律失常中的作用研究进展

本文概述miRNA与心率失常的关系、作用机制以及作为治疗心律失常药物的研究进展,通过回顾miRNA在人机体心脏功能衰竭、失常、梗死等疾病中的密切相关性,从而论证miRNA作为心律失常临床治疗潜在靶点的可能性。

大叶茜草素诱导黑色素瘤B16F10凋亡

目的研究大叶茜草素对黑色素瘤B16F10细胞的作用机制。方法使用MTT法(其中大叶茜草素浓度为0、40、80、160和320μmol/L)、平板克隆(其中大叶茜草素浓度为0、10、20和40μmol/L)来检测B16F10的增殖能力,用划痕实验(其中大叶茜草素的浓度为0、75、150和300μmol/L)来检测B16F10的迁移能力,使用凋亡与坏死检测试剂盒(其中大叶茜草素的浓度为0、75、150和300μmol/L)来检测大叶茜草素是否诱导B16F10凋亡,使用蛋白免疫印迹法(其中大叶茜草素的浓度为0、75、150和300μmol/L)来检测B16F10细胞中MTA1基因蛋白水平的表达。结果大叶茜草素可剂量依赖性抑制B16F10细胞的增殖和迁移,诱导B16F10凋亡;经大叶茜草素处理后B16F10细胞中MTA1具有下调趋势,且呈剂量依赖性。结论大叶茜草素可以通过下调MTA1来抑制B16F10细胞的增殖、迁移并诱导凋亡。

膝骨关节炎治疗研究进展

膝骨关节炎是一种多因素导致,继发骨质增生的慢性骨关节疾病。本文主要介绍膝骨关节炎中西医治疗方式与药物的最新进展,为膝骨关节炎的治疗提供思路,认为在疾病早期进行药物靶向治疗是未来研究的关键。

β-榄香铜酸对人食管癌细胞Eca-109的抑制作用

目的探究β-榄香铜酸对人食管癌细胞Eca-109增殖、迁移、侵袭的影响及作用机制。方法使用不同浓度的β-榄香铜酸(0、20、40、60μmol/L)处理Eca-109细胞,首先进行MTT、平板克隆、细胞划痕、transwell迁移、transwell侵袭实验检测β-榄香铜酸对Eca-109的细胞增殖、迁移、侵袭的影响;之后在60μmol/L浓度组使用铁死亡抑制剂Ferrostatin-1(Fer-1)干预探索其作用机制。使用试剂盒检测Eca-109细胞中Fe^(2+)、ROS、lipid ROS、GSH、MDA含量,使用Western blot实验检测Eca-109细胞中GPX4、PTGS2和4-HNE的蛋白表达。结果β-榄香铜酸可呈剂量依赖性抑制Eca-109的细胞增殖、克隆形成、迁移、侵袭,激活Eca-109中铁死亡通路蛋白PTGS2和4-HNE,导致GPX4失活,出现铁依赖性的脂质过氧化。Ferrostatin-1可抑制整个进程,从而减少Eca-109细胞的铁死亡。结论β-榄香铜酸可通过铁死亡通路抑制人食管癌细胞Eca-109,有望成为潜在抗食管癌的药物。

基于网络药理学和体外实验探析盐酸药根碱对人骨肉瘤的机制研究

目的采用网络药理学、分子对接技术和细胞实验,探讨盐酸药根碱(JH)对人骨肉瘤细胞(HOS)的潜在作用靶点和对细胞的增殖、迁移、侵袭的影响及作用机制。方法首先通过数据库筛选JH的成分靶点,HOS相关的疾病靶点,以此来构建药物-靶点-疾病可视化网络和蛋白相互作用网络(PPI),然后进行GO和KEGG富集分析,采用分子对接软件对潜在的作用靶点(靶点数目最多的活性成分和蛋白相互作用中自由度最大的蛋白质)进行验证。采用不同浓度的JH处理HOS,通过MTT测定、平板克隆形成、Transwell小室侵袭与迁移实验证实JH在HOS细胞增殖中的抑制作用。结果该研究共获得JH抗HOS的靶点共有26个,富集分析提示JH通过多种信号途径发挥抗HOS的作用;分子对接显示JH与主要靶点之间具有良好的结合活性;与对照组相比,JH能显著降低HOS细胞活性;与对照组相比,JH组细胞的增殖、迁移能力显著降低。结论JH可能通过多种靶点有效抑制HOS增殖。经体外细胞实验验证表明,JH随着浓度增加,可抑制HOS的增殖、侵袭和迁移。因此,可能是一种有效的潜在抗HOS药物。

膀胱癌T24中肿瘤干细胞样细胞的分离与鉴定

目的观察使用无血清培养基悬浮培养能否从膀胱癌T24中分离出微球体,并证实其是否有肿瘤干细胞的特点。方法使用无血清培养基DMEM/F12添加生长因子EGF、bFGF、胰岛素、B27对膀胱癌T24进行悬浮培养,并从长期增殖能力、克隆形成能力、自我更新能力、对放化疗的抵抗能力、迁移和侵袭能力等方面证实这些微球体是否有肿瘤干细胞的特点。结果从培养的第4天开始长出微球体,微球体细胞比普通贴壁T24细胞有更强的增殖能力和克隆形成能力,对放化疗的抵抗能力更强,有更强的迁移和侵袭能力,微球体有自我更新能力,具有肿瘤干细胞的特点。结论使用无血清悬浮培养可以从T24中分离出微球体,而且这些微球体细胞有肿瘤干细胞的特点。

“以器官系统为中心”的医学教学改革之探讨

我国医学院校一直实施"以学科为中心"的培养模式,但是这种培养模式存在资源利用率不高、学前忘后等缺点,直到20世纪90年代,国内包括中国医科大学、锦州医学院等院校开始探索"以器官系统为中心"的医学教学模式改革,本文就这两种教学模式的特点、应用现状、存在的问题和建议做了较全面的探讨。

siRNA沉默RIP1对膀胱癌细胞株T24恶性生物学行为的影响

目的利用siRNA转染干扰沉默膀胱癌细胞株T24的受体相互作用蛋白1(RIP1)基因,并观察沉默前后T24恶性生物学行为的变化。方法使用Lipofectamine誖2000和RIP1siRNA与膀胱癌细胞株T24共孵育48 h,RT-PCR和Western-blot检测孵育前后RIP1mRNA和蛋白质的表达变化以观察沉默效率,并观察沉默前后T24增殖能力、克隆形成能力、迁移和侵袭能力的变化。结果与siRNA孵育48 h后,RIP1的沉默效率可以达到85%,RIP1沉默后T24的增殖能力、克隆形成能力、迁移和侵袭能力下降。结论沉默RIP1基因可以降低T24的恶性程度,提示RIP1在膀胱癌T24中起癌基因的作用。

马钱子碱抑制骨肉瘤的作用机制

目的探究马钱子碱对骨肉瘤细胞的抑制作用及可能机制。方法在HOS和143B细胞中分别加入不同浓度的马钱子碱处理细胞,使用3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)比色法,通过EDU实验和细胞克隆形成实验检测肿瘤细胞的增殖活性;利用细胞划痕实验检测细胞的迁移能力,Transwell小室实验检测骨肉瘤细胞的侵袭能力;流式细胞术检测细胞周期及凋亡情况,引入生物信息预测技术预测马钱子碱对骨肉瘤发挥作用的机制,最后采用Western blot实验验证蛋白的表达量。结果马钱子碱呈时间和剂量依赖性抑制HOS和143B细胞的增殖,也能够抑制肿瘤细胞的迁移和侵袭;马钱子碱通过抑制PI3K-AKT信号通路促进骨肉瘤HOS和143B细胞的凋亡,下调了HOS和143B细胞中p-PI3K、p-AKT、MMP9、CyclinD1、C-caspase9蛋白含量。结论马钱子碱可呈剂量依赖性的抑制HOS和143B细胞的增殖和侵袭迁移,有望作为潜在的抗骨肉瘤药物。

盐酸药根碱对宫颈癌细胞的抑制作用

目的探讨盐酸药根碱(Jatrorrhizine hydrochloride,JH)在细胞水平上对宫颈癌细胞增殖能力、平板克隆、细胞伤口愈合、侵袭、迁移、细胞凋亡和坏死的影响及作用机制研究。方法通过MTT、平板克隆实验研究不同浓度的盐酸药根碱48h后对宫颈癌Hela细胞培养过程中的增殖及克隆形成的影响。为获得更准确的结果,通过细胞伤口愈合实验和Transwell细胞迁移实验来检测盐酸药根碱对Hela细胞横向和纵向迁移能力的影响,并采用Transwell细胞侵袭实验来检测其对Hela细胞侵袭能力的影响。使用YO-PRO-1/PI检测试剂盒进行荧光染色,用来检测细胞凋亡与坏死情况。通过Western blot检测不同浓度的盐酸药根碱对Hela细胞中坏死与凋亡相关蛋白表达水平的影响。结果MTT、平板克隆实验结果显示盐酸药根碱抑制宫颈癌Hela细胞增殖,呈现时间和剂量依赖;细胞伤口愈合实验和迁移、侵袭实验显示盐酸药根碱能够以剂量依赖性的方式抑制Hela细胞的横向及纵向迁移以及侵袭能力。结论体外细胞实验表明,盐酸药根碱可抑制Hela细胞增殖、侵袭、迁移能力,有望作为抗癌潜在药物在临床上进一步研究。

食管鳞癌癌干细胞的分离与功能特性

目的运用无血清培养基悬浮培养的方法从数个食管鳞癌细胞株中分离出微球体,并对其癌干细胞特性进行鉴定。方法使用无血清培养基DMEM/F12添加20 ng/mL EGF、10 ng/mL bFGF、5%B27和5μg/mL胰岛素的方法从3个食管鳞癌细胞株EC109、EC9706和HK-3中分离出微球体,并从增殖能力、克隆形成能力、对放化疗的抵抗能力、迁移和侵袭能力、干性基因的表达能力证实HK-3的微球体是否有癌干细胞的特点,同时分析了3个食管鳞癌细胞株恶性程度与其癌干细胞干性之间的关系。结果我们发现3个食管鳞癌细胞株均有形成微球体的能力,其中HK-3微球体比普通贴壁HK-3细胞有更强的增殖能力、克隆形成能力、对放化疗的抵抗能力、迁移和侵袭能力,表达更高的干性基因如ABCG2和ALDH1,而且EC109、EC9706和HK-3表达c-myc的蛋白量逐渐降低,形成微球体的能力及干性基因的表达量亦逐渐降低。结论食管鳞癌细胞株存在癌干细胞样细胞,且其恶性程度与癌干细胞的比例成正相关。

右髂总动脉弯曲畸形一例报道

笔者在解剖一具40岁男性尸体标本时,发现其右侧髂总动脉有弯曲畸形,现报道如下。成尸发育正常,双下肢对称等粗。动脉弯曲畸形有一处,为右髂总动脉跨越左、右髂总静脉分叉处。左侧髂总动脉主干及左、右髂总动脉的分支无异常。畸形中点距离右髂总动脉根部约8.8 cm,距离肠系膜下动脉根部约15.8 cm,距离右髂内动脉和髂外动脉分叉处约6．5cm，畸形处弯度约为88．3度。

hMLH1和干细胞标志物CD44在胃癌的表达及相互间的关系

目的研究错配修复基因hMLH1和干细胞标志物CD44在胃癌的表达状况、意义及相互间的关系。方法采用免疫组化SP法检测79例胃癌组织和相对应的癌旁组织中错配修复基因hMLH1和干细胞标志物CD44的表达状况,结合临床资料分析这两个指标的表达与肿瘤病理参数间的关系,运用卡方检验分析该两个指标间的相互关系。结果79例胃癌标本中,hMLH1阳性表达的有15例,占19%,,CD44阳性表达的有53例,占67.1%,两者在癌旁正常组织表达的阳性率分别为51%和15.2%,两者差异均有统计学意义(P<0.05);胃癌组织中hMLH1的表达与CD44呈负相关(P<0.05);hMLH1阴性表达、CD44阳性表达与胃癌淋巴结转移、浸润深度、TNM分期及脉管浸润呈正相关(P<0.05)。结论 hMLH1在胃癌的形成过程中起到重要作用,它与胃癌干细胞标志物CD44之间存在拮抗关系。

受体相互作用蛋白RIP1在乳腺癌的表达及其临床意义

目的评价受体相互作用蛋白RIP1在乳腺癌的表达及与临床病理特征的关系。方法使用免疫组化SP法检测46例乳腺癌组织和相应癌旁组织中RIP1的表达状态,并结合临床病理特征如临床分期、病理分级、肿瘤大小、有无淋巴结转移进行统计学分析。结果 46例乳腺癌组织中,阳性表达的有30例,占65.2%,癌旁组织中阳性表达的只有13例,仅占28.3%,差异有统计学意义(P<0.01),癌组织中RIP1的阳性表达与病人的年龄、肿瘤大小、组织学类型无关,与临床分期、病理分级、有无淋巴结转移呈正相关,即癌组织中RIP1表达越高,病人临床分期病理分级越高、淋巴结转移越多。结论癌组织中RIP1表达增高是乳腺癌恶性程度较高的一个标志。

左结肠动脉与肠系膜上动脉异常吻合支1例

笔者在解剖尸体标本时发现左结肠动脉与肠系膜上动脉异常吻合支一例，现报道如下：成年尸体，男性，55岁左右，身长165cm，身材瘦小，肠系膜上动脉起至腹主动脉前壁，距离左右髂总动脉分又处约13cm，肠系膜下动脉起至腹主动脉前壁，距离左右髂总动脉分叉处约4cm，左结肠动脉起始处距离肠系膜下动脉起始处约2．1cm，异常吻合支在距离左结肠动脉起始处约5．5era处发出，斜向右上，越过中线注入肠系膜上动脉的分支，如图1所示。

错配修复基因hMLH1在胃癌的表达及与胃癌临床进展的关系

目的探讨错配修复基因hMLH1在胃癌的表达及其与胃癌临床进展的关系。方法收集咸宁市中心医院普外科于2000年1月至2005年12月行胃癌根治术的胃癌石蜡标本66例,采用免疫组化SP法检测这66例胃癌组织中hMLH1的表达情况,结合病理资料分析hMLH1的表达与病理特征间的关系,并且对这66例胃癌病人进行随访,观察hMLH1的表达与胃癌病人无瘤生存期、5年生存率的关系。结果 66例标本中阳性表达的有31例,占46.9%。其中高中分化癌和低分化癌的阳性比例分别为36.9%和10.0%,差异有统计学意义,P<0.05;无淋巴结转移和有淋巴结转移的阳性比例分别为33.3%和13.6%,差异有统计学意义,P<0.05。随访结果表明:31例阳性表达的病人术后5年内无瘤生存期平均为27.2个月,5年生存率为58.6%,35例阴性表达的病人术后5年内无瘤生存期平均为10.6个月,5年生存率为29.7%,组间比较差异有显著性,P<0.05。结论 hMLH1在胃癌的表达与癌的分化状况和有无淋巴结转移及临床进展有关。