上海市猪源沙门氏菌耐药性及脉冲场凝胶电泳分型研究

为了解上海地区猪源沙门氏菌的耐药性及基因分型情况,本研究对2013年分离到的13株猪源沙门氏菌(10株为猪霍乱沙门氏菌,3株为鼠伤寒沙门氏菌)采用微量肉汤稀释法进行药物敏感性测定,应用脉冲场凝胶电泳(PFGE)进行基因分型。药物敏感试验结果表明,分离到的13株沙门氏菌对磺胺异恶唑、多西环素、氟苯尼考和阿莫西林的耐药率较高,对阿莫西林/棒酸、头孢曲松、丁胺卡那霉素和头孢噻呋敏感。脉冲场凝胶电泳分型结果显示,10株猪霍乱沙门氏菌中有8株为流行病学相关,是本次研究中猪霍乱沙门氏菌的优势基因型。

上海市动物源性大肠杆菌的分离鉴定和药敏试验

为掌握上海市动物源性大肠杆菌的耐药情况及耐药规律,对2013—2015年在门诊畜禽中分离到的大肠杆菌进行药敏试验。共分离到236株大肠杆菌,其中猪源164株、禽源72株。选用15种抗生素,采用CLSI推荐的微量肉汤稀释法,对大肠杆菌进行药物敏感试验。结果表明,无论是猪源大肠杆菌,还是禽源大肠杆菌,对大多数抗生素的耐药程度均较高。其中,对磺胺异噁唑、复方新诺明、恩诺沙星和大观霉素等抗生素的耐药情况较为严重;对丁胺卡那霉素和阿莫西林/棒酸2种抗生素较为敏感,耐药率低于20%。从耐药谱型来看,猪源大肠杆菌较禽源大肠杆菌具有更加复杂的耐药谱型。

猪流行性腹泻病毒COE抗原表位的原核表达及鉴定

为更好地了解近年来仔猪流行性腹泻疫情,收集上海地区猪流行性腹泻病猪的临床样品,扩增猪流行性腹泻病毒保护性抗原基因(COE基因),构建原核表达载体pColdⅡ-COE,转化至大肠埃希菌pGTf2/BL21,IPTG诱导表达,SDS-PAGE结果显示,表达的COE蛋白大小为16ku,Western blot分析表明,该蛋白与临床上猪流行性腹泻病毒阳性猪的血清有特异性反应,说明所表达的COE蛋白具有反应原性,为进一步研制猪流行性腹泻疫苗和ELISA检测方法奠定了基础。

上海地区马梨形虫病和伊氏锥虫病的血清学调查

为了解上海地区马梨形虫病和伊氏锥虫病的存在情况,我们从上海地区选择9家马场,共采集马血样219份,分别采用商品化ELISA试剂盒和平板凝集试剂盒检测马梨形虫病和马伊氏锥虫病抗体。结果显示,219份血清中,马梨形虫病抗体阳性血清有64份,分布于8家马场,平均阳性率为29.2%;马伊氏锥虫病抗体阳性血清有6份,分布于3家马场,平均阳性率为2.7%。调查数据表明,上海地区马梨形虫病感染率较高,需要加强对该病的防控,同时也要对马伊氏锥虫病进行监测。

卵黄抗体在防治仔猪腹泻病中的应用

卵黄抗体(IgY)是使用抗原免疫禽类后,从禽蛋中提取出来的针对特定抗原的抗体,是具有较强免疫功能的蛋白质。由于卵黄抗体具有性质稳定、高产量、低成本等优势,目前已广泛应用于畜禽疾病的治疗中。本文主要介绍了卵黄抗体在仔猪细菌性腹泻和病毒性腹泻等疾病防治中的应用。

猪源沙门氏菌毒力基因检测及脉冲场凝胶电泳分型研究

为了解上海及周边地区猪源沙门氏菌的血清型分布、毒力基因及分子分型情况，我们对21株临床分离到的猪源沙门氏菌用沙门氏菌属诊断血清鉴定血清型；采用多重聚合酶链式反应，检测17个主要的毒力基因；应用脉冲场凝胶电泳（PFGE）技术进行分子分型，探寻21株沙门氏菌之间的亲缘关系。结果显示，21株沙门氏菌中，19株血清型为7：c：5，1株为4：i：2，1株未鉴定出；21株沙门氏菌的17个毒力基因中检出16个，菌株之间无差别；经PFGE后，每个菌株产生13～18条电泳务带，用Bionumerics软件进行聚类分析表明，21株猪源沙门菌相似度在77％～100％，可分为2种不同的基因型，其中A型有19株、B型2株，亲缘关系较近。本次实验分离的沙门氏菌血清型以7：c：5为主，含有16个主要的毒力基因，A型为优势基因型。

上海地区健康猪群中副猪嗜血杆菌的分离鉴定

为了解上海地区副猪嗜血杆菌在健康猪群中的携带情况,对上海地区2个规模化猪场进行了监测,共采集猪唾液20份、猪鼻拭子60份。参考GB/T 34750-2017《副猪嗜血杆菌检测方法》,通过细菌染色、形态观察、生化鉴定、质谱鉴定和PCR检测,从猪唾液样品中检测出1份阳性,从猪鼻拭子样品中检测出5份阳性,阳性率分别为5%和8.3%,说明猪群中存在健康带菌状态。春季马上来临,气温变化无常,养殖人员应尽早按程序对猪群进行免疫,加强饲养管理,防止本病发生。

一例绵羊细颈囊尾蚴病的诊治

细颈囊尾蚴病是由泡状带绦虫的幼虫--细颈囊尾蚴所引起的一种人畜共患病，幼虫主要寄生于猪、绵羊和山羊等动物的肝脏浆膜、网膜和肠系膜等处，成虫寄生于犬、狼和狐狸等动物的小肠内。本病对仔猪和羔羊等幼年动物的危害较为严重，可造成动物的消瘦、虚弱及肝脏受损，严重时会引起死亡。

上海市活禽交易市场鸡群沙门氏菌的分离鉴定与耐药性分析

为了解上海市活禽交易市场鸡群中沙门氏菌的携带情况,我们于2016年对市区的8个活禽交易场所进行了调查。共采集肛门拭子500份,分离培养沙门氏菌,运用诊断血清、VITEK 2Compact和VITEK MS分别对分离菌株进行血清型、生化和质谱鉴定,使用PCR和药敏板分别对分离菌株的耐药基因和耐药性进行检测。结果显示:从500份肛门拭子中分离鉴定出28株沙门氏菌,分离率为5.6%,以肠炎沙门氏菌、印第安纳沙门氏菌和鼠伤寒沙门氏菌为主,说明在市场交易环节应当加强对沙门氏菌的防控;耐药基因检出率较低,仅有喹诺酮类和磺胺类抗生素耐药基因有检出,分别为21.4%和7.1%,I类整合酶基因检出率达到28.6%;从耐药性检测结果看,分离菌株对磺胺类抗生素、头孢噻肟和庆大霉素的耐药率达到50%以上,对环丙沙星、美罗培南、萘啶酸、头孢他啶和氨苄西林的耐药率在40%以下,这些药可用于鸡群沙门氏菌的防控;耐药基因和耐药性之间无明显相关性。

猪丹毒的诊治实例

猪丹毒是由猪丹毒杆菌引起的猪的一种急性、热性传染病,主要表现为急性败血症、亚急性皮肤疹块、慢性多发性关节炎和心内膜炎等。本文介绍了上海地区某猪场猪丹毒的诊断和治疗情况。

猪痢疾短螺旋体病的病原分离鉴定及其病理学观察

为确诊某猪群猪痢疾短螺旋体病,本实验对疑似病例剖检采集结肠粘膜样品,涂布于TSA血平板,37℃严格厌氧培养5 d,进行细菌分离鉴定,获得β溶血的分离株。分离株通过瑞氏-吉姆萨染色、扫描电镜观察和PCR检测,鉴定为猪痢疾短螺旋体。病理组织学显示:结肠呈现严重的卡他性炎症、产生大量粘液、血管充出血和粘膜坏死。高倍镜下显示:肠上皮细胞之间粘结疏松,胶原纤维溶解、断裂。结果表明,该猪群感染猪痢疾短螺旋体,病原菌侵害结肠和盲肠粘膜组织,造成严重损伤。

耳朵发蓝或发紫是不是蓝耳病?

（内蒙古自治区巴彦淖尔市某养殖场）最近本场有20多头育肥猪,精神状态不好,食欲减退,其中有4头耳朵发紫,是不是发生了蓝耳病？答蓝耳病是当今养猪业的头号猪病,一直困扰着许多养殖场（户）。在一些地区,一些猪场有时会出现猪耳朵发紫、发蓝的现象,很容易让人联想到是蓝耳病。但是需要注意的是,猪耳朵蓝紫不一定就是蓝耳病,而真正的蓝耳病并不一定都有蓝紫耳朵现象。

上海地区屠宰场猪红斑丹毒丝菌的分离鉴定

为了解上海地区猪红斑丹毒丝菌在健康猪群中的带菌状况,本试验选择上海地区标准化屠宰场的上市猪为研究对象,采集鼻拭子、肺脏、扁桃体和下颌淋巴结等样本,进行猪红斑丹毒丝菌的分离,采用VITEK 2Compact系统和VITEK MS快速鉴定系统进行鉴定,并设计1对16SrRNA基因引物,对分离菌株进行PCR扩增,随机选取16株分离菌进行测序及16SrRNA同源性分析。结果显示,49.07%(105/214)的样本中分离到猪红斑丹毒丝菌,分离菌株同参考菌株及疫苗株之间16SrRNA同源性为99.6%~100.0%。本试验结果表明上海地区猪群中确实存在猪红斑丹毒丝菌的健康带菌状况。

上海市150株猪链球菌对8种常见抗菌药物的耐药情况

为调查上海市猪链球菌耐药情况,采用体外最小抑菌浓度(MIC)药物敏感试验,对2004—2017年从上海市分离的150株猪链球菌,开展了5类8种临床常见抗菌药物的敏感性检测。结果显示:95%的猪链球菌对8种抗菌药物产生了不同程度的耐药,耐药率为16.67%~90.00%。对β-内酰胺类药物的耐药性较低,耐药率分别为氨苄西林16.67%、青霉素19.33%、头孢噻呋26.00%,但也表现出耐药性加重的趋势;对酰胺醇类和喹诺酮类药物出现了一定程度的耐药,其中对氟苯尼考的耐药率为24.67%,对环丙沙星和氧氟沙星的耐药率均为42.00%;对大环内酯类和四环素类药物则出现了极高的耐药性,其中对红霉素、四环素的耐药率分别达到82.67%、90.00%。46%的菌株为多重耐药,其中10.7%的菌株为8重耐药。结果表明,上海市猪链球菌耐药情况较为严峻,除对β-内酰胺类药物较为敏感外,对其他药物均出现了不同程度的耐药,且普遍为多重耐药。因此,上海市需加强兽用抗菌药物的临床用药指导,倡导合理规范用药。

猪源猪链球菌耐药情况分析

近年来,为掌握上海地区猪源猪链球菌的耐药情况及耐药规律,文章对2013~2015年畜禽门诊、养殖场、屠宰场分离到的59株猪链球菌进行药敏试验。结合CLSI及兽医临床标准,选用8种抗生素,采用微量肉汤稀释法(MIC)进行药物敏感试验。结果表明,猪链球菌对8种抗生素均产生不同程度的耐药性,且耐药程度很高在44%~95%之间,四环素耐药率最高为95%,敏感率40%以上的有4种抗生素。部分药物在临床上,已经成为严重的耐药,猪链球菌耐药情况,呈逐年加重的趋势。

绵羊感染伪狂犬病的病理学观察与病毒分离鉴定

为了确诊1例疑似绵羊伪狂犬病病例,本试验以上海郊区某羊场发病绵羊的病料为研究对象进行了病理学观察、病毒分离和鉴定。病理组织学变化显示,发病羊大脑组织神经元发生广泛性变性、坏死并伴有嗜神经现象,神经元周围出现胶质细胞增生。病料接种BHK-21细胞,细胞出现病变,间接免疫荧光试验和荧光定量PCR检测结果证实所分离的病毒为伪狂犬病病毒。流行病学调查结果表明,绵羊伪狂犬病可能是由猪伪狂犬病病毒感染引起的。通过免疫接种猪伪狂犬病弱毒疫苗,绵羊伪狂犬病疫情得到及时控制。

猪化脓隐秘杆菌的分离鉴定

化脓隐秘杆菌（Trueperella pyogenes）常引起牛、羊、猪等动物的化脓性感染，主要表现为肺炎、关节炎、心内膜炎、乳腺炎、皮下脓肿等，给养殖业带来较大的经济损失。化脓隐秘杆菌以前被称为化脓棒状杆菌、化脓放线菌，1997年Pascual Ramos等将该菌从放线杆菌属中重新分类为隐秘杆菌属。化脓隐秘杆菌是隐秘杆菌属中致病力最强的病原体，是经济型家畜（牛、羊和猪）的一种条件性致病菌，大部分寄居在健康动物的乳房、泌尿生殖道、呼吸道和胃肠道粘膜。

分光光度法测定猪链球菌菌悬液浓度

目的:建立猪链球菌的快速计数方法。方法:采用分光光度法进行细菌计数方法研究,以平板计数法测定菌液中细菌总量,并结合OD_(600)研究两者之间的线性关系。结果:分别对猪链球菌5个不同的稀释度进行OD_(600)检测,同时对菌液进行平板计数获得对应细菌总数,以600nm处吸光度(OD_(600))作为纵坐标,以平板计数的细菌数(cfu)作为横坐标建立猪链球菌细菌数与吸光度相关关系的标准曲线。结论:经验证,建立的猪链球菌分光光度测定法可用于菌液浓度的快速测定,便于工作快速有效开展。

上海地区鸡毒支原体的分离与鉴定

鸡毒支原体（M G ）是鸡的慢性呼吸道病病原体，感染发病的鸡主要表现为呼吸罗音、咳嗽、流浆液性鼻涕，并可见气囊炎，会造成鸡的胴体等级下降，饲料报酬率低，生长速度缓慢，产蛋量降低。该病多发于冬、春季节，通常与病毒、细菌协同感染，导致呼吸道症状加剧、死亡率增高。即使在接种鸡新城疫疫苗、传染性支气管炎疫苗时，也经常诱发本病。

上海地区鸡毒支原体感染抗体的血清学调查

本研究采集了上海地区规模化蛋鸡场、林地散养鸡场、种山鸡场的健康产蛋鸡群共240份血清，进行了鸡毒支原体感染抗体的ELISA血清学检测。结果显示，规模化蛋鸡场和林地散养蛋鸡场鸡毒支原体感染抗体平均阳性率分别为97．8％和93．3％，两种饲养模式的鸡群鸡毒支原体感染率都很高，两者无显著差别；3个种山鸡场检测结果差异较大，分别为100％、0、30％，说明种山鸡对鸡毒支原体的感染并不普遍；对规模化肉鸡场鸡群鸡毒支原体抗体跟踪结果表明，在65日龄时鸡毒支原体在鸡群中已经存在，65～90日龄期间鸡群普遍感染鸡毒支原体，肉鸡上市前感染抗体阳性率达到94％。结果表明，产蛋鸡群鸡毒支原体感染情况与饲养方式没有相关性，均呈现较高阳性率，种山鸡感染并不普遍，肉鸡群感染鸡毒支原体高峰期在65～90日龄之间，预防鸡毒支原体病的最佳日龄应在30～60日龄之间。