玉米赤霉烯酮对动物繁殖性能的毒性作用及其机制

玉米赤霉烯酮(ZEA)一种由镰刀菌属产生的次级代谢物,化学结构与内源性雌激素相似,因此,ZEA可通过与雌激素竞争性结合雌激素受体,导致动物机体生殖激素代谢紊乱,诱发生殖器官形变及功能障碍,严重危害动物繁殖系统,解决ZEA污染问题己经成为当务之急。本文对ZEA的理化特性、毒性作用等进行综述,以期为有效缓解ZEA毒性及提高动物繁殖性能、促进畜牧业健康发展提供理论依据。

玉米赤霉烯酮对山羊睾丸间质细胞的毒性机制研究

【目的】探究玉米赤霉烯酮(ZEA)对山羊睾丸间质细胞活力、形态及细胞凋亡相关基因表达的影响,明确其对山羊睾丸间质细胞的毒性作用,为后续揭示ZEA对雄性山羊生殖系统的毒性机制提供理论依据。【方法】以山羊睾丸间质细胞为试验材料,采用不同浓度ZEA处理细胞24 h,以CCK-8法检测细胞增殖情况并筛选出最适浓度;然后通过光学显微镜、透射电子显微镜、细胞划痕试验、实时荧光定量PCR、JC-1试剂盒及ROS试剂盒分别检测ZEA处理山羊睾丸间质细胞的形态特征、超微结构变化、损伤愈合能力、细胞凋亡及氧化应激相关基因表达、线粒体膜电位及胞内活性氧(ROS)水平的变化。【结果】随着ZEA浓度的升高,山羊睾丸间质细胞活力呈剂量依赖效应极显著下降(P<0.01,下同),ZEA的半数抑制浓度(IC_(50))在20μmol/L附近,故选取20μmol/L作为后续试验的处理浓度。经20μmol/L ZEA处理后,山羊睾丸间质细胞大量死亡,细胞皱缩呈圆珠状,细胞间连接松散;核膜出现破损,内质网断裂、结构模糊,线粒体破裂,形成自噬囊泡,细胞核皱缩、深染;细胞愈合能力降低,划痕培养18 h后的细胞迁移率约80%;细胞中的Bcl-2、caspase-3和SOD2基因相对表达量显著上升(P<0.05),Bax、HO-1、Nrf2、GPX1和CAT基因相对表达量极显著上升;JC-1检测发现细胞中的红色荧光数量减少,荧光强度较弱,而绿色荧光数量明显增多且荧光强度较强;ROS检测显示细胞ROS水平极显著升高,即细胞氧化应激程度加剧。【结论】ZEA通过诱导山羊睾丸间质细胞形变及线粒体、内质网等细胞超微结构损伤,降低其损伤修复能力,促使线粒体膜电位水平降低和加剧氧化应激程度,而发挥其毒性作用。

抗菌肽P3的序列分析及其抑菌活性的测定

为研究抗菌肽P3的生物学功能,试验通过在线软件分析了抗菌肽P3的理化特性、与其他抗菌肽的相似性、二级结构、剪切位点、疏水性、表面极性和抗原性,用琼脂糖扩散法测定了抗菌肽P3的抑菌活性,用倍比稀释法测定了抗菌肽P3的最小抑菌浓度和溶血性。结果表明,抗菌肽P3为疏水性的α螺旋型阳离子多肽,与APD3数据库中抗菌肽Alyteserin-2Ma有最高的相似度,可被9种酶剪切,不具有抗原性,对大肠杆菌、沙门菌、枯草芽孢杆菌、屎肠球菌和白色念珠菌有抑菌活性,对鸡红细胞有较低的溶血性。研究结果说明,抗菌肽P3有抑菌活性,可作用于细胞膜,从而导致菌体死亡。

猪源耐药性大肠杆菌的分离与鉴定

为了弄清某猪场猪腹泻的病原,试验采用染色与形态观察、培养特性观察、生化试验、16S rRNA序列比对等方法进行细菌鉴定,构建16S rRNA系统发育树,采用纸片扩散法测定分离细菌的药物敏感性。结果表明:从腹泻猪的十二指肠中分离到1株细菌,分离细菌的染色与形态特征、菌落特征、培养特性和生化特征与大肠杆菌基本符合,16S rRNA基因序列与猪肉源(CP025318株)、犬源(CP023359株、CP010134株)、人源(CP022407株、CP018948株、CP023349株)的同源性均高达99.8%,确定该分离菌株为大肠杆菌。该株大肠杆菌与猪大肠杆菌CP025753株的亲缘关系最近,对所测试的21种抗生素均耐药。说明临床中猪大肠杆菌的耐药性愈发严重。

新抗菌肽RL-8的抑菌活性及致大肠杆菌胞内物质泄露

为了解抗菌肽RL-8的抑菌活性及抗大肠杆菌的作用机制,应用生物信息学工具分析了抗菌肽RL-8的理化特征和二级结构,通过微量稀释法测定抗菌肽RL-8对部分细菌和真菌的抑菌活性,采用菌落计数法测定抗菌肽RL-8对大肠杆菌CVCC1568的杀菌动力学,利用分光光度法分析抗菌肽RL-8对大肠杆菌CVCC1568细胞壁和细胞膜的破坏作用。结果表明:抗菌肽RL-8为阳离子型α螺旋形两亲性多肽,对革兰阴性菌(大肠杆菌、沙门菌、猪胸膜肺炎放线杆菌、绿脓杆菌)的最小抑菌浓度(MIC)为6.25~200.00 mg/L,对革兰阳性菌(金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、屎肠球菌、短小芽孢杆菌)的MIC为3.12~400.00 mg/L,对白色念珠菌的MIC为200.00 mg/L。抗菌肽RL-8能在60 min内杀灭99.99%的大肠杆菌CVCC1568,可破坏大肠杆菌的细胞壁和细胞膜,造成胞内紫外吸收物质泄露。文章研究结果为抗菌肽RL-8的进一步研究和临床应用提供参考。

抗菌肽BSN-37的抑菌活性及其稳定性分析

试验旨在研究抗菌肽BSN-37的抑菌活性和稳定性。采用微量倍比稀释法测定抗菌肽BSN-37的最小抑菌浓度(MIC),菌落计数法分析抗菌肽BSN-37对大肠杆菌CVCC1568的杀菌动力学特征,扩散法测定抗菌肽BSN-37的盐离子稳定性、酸碱稳定性、血清稳定性、胰酶稳定性、热稳定性、反复冻融稳定性、室温保持稳定性、药效保持时间稳定性。结果显示,抗菌肽BSN-37对革兰氏阴性菌(大肠杆菌和沙门氏菌)的MIC为1.5625～25μg/mL,对革兰氏阳性菌(枯草芽孢杆菌和短小芽孢杆菌)的MIC为1.5625～12.5μg/mL,对真菌(白色念珠菌)没有活性;抗菌肽BSN-37可在90min内完全杀灭大肠杆菌CVCC1568;除了Fe2+和胰酶会影响抗菌肽BSN-37的抑菌活性外,在75～100℃的高温、150～250mmol/L高浓度盐离子(Na+、K+、Ca2+和Mg2+)、20%～25%饱和浓度的Cu2+、pH 4～10、20%～25%的血清、10～12次的反复冻融、10～12d室温保存等条件下仍能保持较好的抑菌活性,药效保持时间可达7.5d。本试验结果表明,抗菌肽BSN-37具有替代抗生素成为新抗菌药物的潜力,为抗菌肽BSN-37的临床应用提供了理论依据。

鸽新城疫病毒HI抗体效价合格率与离散度的相关性分析

为了解鸽新城疫病毒血凝抑制(HI)抗体效价合格率与离散度之间的相关性,本试验采集了不同鸽舍中新城疫免疫鸽的血液,制备了免疫血清,通过血凝抑制试验检测了血清中新城疫病毒HI抗体的效价,计算了HI抗体效价的合格率和离散度,借助软件工具分析了两者之间的相关性。结果表明,不同鸽舍中鸽群的HI抗体效价合格率不同,离散度也较大,HI抗体效价合格率和离散度之间呈极显著性负相关(P<0。001)。说明提高鸽新城疫病毒HI抗体效价合格率,降低HI抗体效价的离散度对预防鸽新城疫具有重要意义。

牛源cathelicidin类抗菌肽的生物信息学分析

为研究牛源cathelicidin类抗菌肽的生物学功能,通过生物信息学方法对牛源cathelicidin类抗菌肽的理化性质、信号肽、跨膜区、亚细胞定位、二级结构和化学修饰等进行预测分析.结果表明:牛源cathelicidin类抗菌肽为阳离子型抗菌肽,等电点11.53～13.20;除了BMAP-27和Dodecapeptide为稳定的多肽外,其他抗菌肽均为不稳定多肽;BMAP-28和Dodecapeptide为疏水性多肽,BMAP-27、BMAP-34、Bac-4、Bac-5、Bac-7和Indolicidin为亲水性多肽;BMAP-27和BMAP-28由α螺旋、β折叠、β转角和无规则卷曲构成,BMAP-34主要由α螺旋和β转角构成,Bac4、Bac7、Indolicidin和Dodecapeptide由无规则卷曲构成,Bac5由β转角和无规则卷曲构成;没有信号肽、跨膜区和糖基化位点,BMAP-27、BMAP-28和BMAP-34各存在1个丝氨酸的磷酸化位点.根据分析结果推测牛源cathelicidin类抗菌肽可作用于细菌的细胞壁或细胞膜,进而导致细菌死亡.

鸽毛滴虫黏附蛋白AP33的理化特性与抗原性分析及细胞表位预测

为了解鸽毛滴虫黏附蛋白AP33的理化特性、抗原性和细胞表位的特性,通过在线工具和软件分析了鸽毛滴虫黏附蛋白AP33的理化特性、二级结构、抗原性、T细胞表位和B细胞表位。结果表明,鸽毛滴虫黏附蛋白AP33为分子质量较大、带正电荷、稳定的微疏水性蛋白,二级结构复杂,有较好的抗原性,有10条B细胞表位和14条T细胞表位,其中有4条重叠的多肽是B细胞表位和T细胞表位中的优势多肽,有5条交叉重叠的多肽是T细胞表位中的优势多肽。说明鸽毛滴虫黏附蛋白AP33能刺激机体产生细胞免疫应答和体液免疫应答,优势表位多肽将为抗鸽毛滴虫的表位疫苗研究奠定基础。

抗菌肽BSN-37对大肠杆菌胞内物质泄露的影响

为了解抗菌肽BSN-37对大肠杆菌的作用机制,通过β-半乳糖苷酶试验测定了抗菌肽BSN-37对大肠杆菌CVCC1568的抑菌活性,以菌落计数法测定了抗菌肽BSN-37对大肠杆菌CVCC1568的抑菌动力学,用分光光度法测定了抗菌肽BSN-37对大肠杆菌CVCC1568细胞壁通透性,以及胞内紫外吸收物质、蛋白及核酸的泄露量。结果表明,抗菌肽BSN-37能有效抑制大肠杆菌CVCC1568的生长繁殖,随抗菌肽浓度增加,抑制活性越高,抗菌肽BSN-37作用后的大肠杆菌CVCC1568细胞壁通透性增加,胞内紫外吸收物质、蛋白和核酸的泄露量随时间延长而逐渐增加。说明抗菌肽BSN-37能破坏大肠杆菌CVCC1568的细胞壁和细胞膜,从而表现较好的抑菌活性。

鸽毛滴虫病预防与治疗研究进展

鸽毛滴虫病一直是危害养鸽业的一种重要的寄生虫性疾病。文章简要介绍了鸽毛滴虫及鸽毛滴虫病的危害,主要综述了鸽毛滴虫病预防和治疗的研究进展,希望为临床生产时间中鸽毛滴虫病的控制提供一些参考。

未免疫乳鸽嗉囊鸽乳和血清中新城疫病毒抗体的检测

为了解未免疫乳鸽嗉囊鸽乳和血清中新城疫病毒抗体的变化,本研究采集了1日龄、5日龄和10日龄未免疫鸽的血清和嗉囊鸽乳,通过血凝抑制试验检测了血清和嗉囊鸽乳中新城疫病毒抗体,并分析了其相关性。结果表明,未免疫鸽血清中新城疫病毒抗体水平随时间增加而缓慢下降,而嗉囊鸽乳中新城疫病毒抗体水平随时间增加而极具下降,5日龄时绝大多数和10日龄时所有的未免疫乳鸽嗉囊鸽乳中未检测到新城疫病毒抗体,嗉囊鸽乳和血清中的抗体之间没有相关性。说明应及时跟踪检测未免疫鸽血清中新城疫病毒抗体水平以确定新城疫病毒疫苗的初免时间,而鸽乳来源的新城疫病毒抗体消失很快,不能提供很好的保护。

抗菌肽对猪肠道菌群的影响

抗菌肽是宿主先天免疫系统的一种重要成分,也可经人工设计、合成而获得。抗菌肽因其抗菌谱广、耐热、不易形成耐药性,被认为是最好的抗生素替代品。肠道菌群在维持动物机体健康方面具有重要意义。文章简述了抗菌肽应用后猪肠道菌群方面的变化,旨在为抗菌肽在养猪市场中的应用提供参考。

母鸽新城疫病毒血清抗体和卵黄抗体的检测及其相关性分析

为了解母鸽新城疫病毒血清抗体和卵黄抗体检测结果的相关性,试验采集了新城疫疫苗免疫母鸽的血液和卵黄,通过血凝抑制试验检测了新城疫病毒的抗体,利用GraphPad Prism软件中的Spearman Analysis分析了血清抗体效价和卵黄抗体效价的相关性。结果表明:绝大多数样品提取的卵黄液抗体效价低于血清抗体效价,而绝大多数样品的卵黄原液抗体效价高于血清抗体效价。血清抗体效价、提取的卵黄液抗体效价与卵黄原液抗体效价两两之间呈显著或极显著正相关(P<0.05或P<0.01),提取的卵黄液抗体效价与血清抗体效价之间的相关系数最高。说明鸽新城疫病毒血清抗体和卵黄抗体有明显的相关性,提取的卵黄液可代替血清用于母鸽新城疫病毒抗体的检测。

动物胰岛素抵抗的发生机制及治疗

胰岛素抵抗(insulin resistance,IR)是2型糖尿病、心血管疾病等慢性代谢性疾病的主要诱因,常与糖脂代谢紊乱、氧化应激、相关细胞因子含量变化、内质网应激等因素有关,严重影响动物健康生长且降低畜牧业经济效益。明确动物胰岛素抵抗的发生机制及影响因素对寻找有效改善胰岛素抵抗的药物和治疗方法具有重大意义。文章从胰岛素抵抗的发生机制、影响因素和治疗措施等方面进行论述,以期为有效缓解胰岛素抵抗及治疗相关疾病提供参考。

鸡抗菌肽NK-lysin的B细胞表位、剪切位点、疏水性及进化分析

为了解鸡抗菌肽NK-lysin的B细胞表位、剪切位点、疏水性、同源性及进化等内容,试验选择鸡抗菌肽NK-lysin的氨基酸序列通过网络在线软件IEDBAnalysisResource、PeptideCutter、ProtScale、BLAST、DNAStar进行分析。结果表明:鸡抗菌肽NK-lysin存在5个B细胞表位,可被20种酶和化学物质剪切,亲水性大于疏水性,与鸡颗粒溶素的同源性为100%,在进化上与珍珠鸡类皂化蛋白C最为接近。说明鸡抗菌肽NK-lysin为亲水性蛋白,具有抗原性,有很多剪切位点,与珍珠鸡类皂化蛋白C有较高的亲缘关系。