基于网络毒理学及实验验证探讨槟榔对口腔黏膜下纤维化的影响

目的基于网络毒理学方法和体内实验验证探讨槟榔对口腔黏膜下纤维化的影响及作用机制。方法通过TCSMP和Swiss数据库筛选槟榔潜在活性成分对应靶点,利用GeneCards、Disgenet数据库得到口腔黏膜下纤维化(oral submucosal fibrosis,OSF)疾病相关靶点。将交集靶点上传至STRING数据平台构建蛋白质-蛋白质相互作用(protein-protein interaction,PPI)网络,再采用Metascape数据平台进行基因本体(gene ontology,GO)功能和京都基因与基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)通路富集分析。采用槟榔水提取液低、中、高浓度干预大鼠口腔黏膜,大鼠开口度、病理形态学、免疫组织化学等检测对网络毒理学结果进行验证。结果网络毒理学结果表明槟榔52个成分中含有587个相关靶点,OSF相关靶点761个,二者交集靶点72个。PPI网络分析结果显示,白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)、基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)、细胞凋亡调节因子Bcl-2(apoptosis regulator Bcl-2,BCL2)、表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)、细胞肿瘤抗原p53(cellular tumor antigen p53,TP53)可能是槟榔影响OSF的关键靶点。KEGG通路富集分析获得PI3K-Akt信号通路、AGE-RAGE信号通路、松弛素信号通路、EGFR酪氨酸激酶抑制剂耐药等信号通路。动物实验结果显示,中、高剂量组开口度值较对照组、低剂量组差异有统计学意义(P<0.05),HE染色、Masson染色表明中、高剂量组出现不同程度的纤维化病变,免疫组织化学结果提示槟榔水提取液上调IL-6、TNF-α等炎性因子,且呈一定的剂量相关性。结论槟榔可能通过上调IL-6、TNF-α等关键炎性因子以介导炎症反应诱导口腔黏膜下纤维化的发生。

血府逐瘀汤对冠心病血瘀模型家兔氧化应激的影响

为观察血府逐瘀汤对冠心病(CHD)血瘀模型家兔氧化应激的影响,将清洁级健康家兔随机分为对照组,模型组,假手术组,血府逐瘀汤低剂量、中剂量、高剂量6组,每组8只。模型组、低剂量、中剂量、高剂量组采用左冠状动脉放置缩窄环方法,制备冠心病模型。低剂量、中剂量、高剂量组以血府逐瘀汤按10、20、40g/kg体重灌胃,每天1次,连续21d。对照组、模型组、假手术组则给予等体积生理盐水。检测血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、活性氧(ROS)、肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)、总抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)水平、NADPH氧化酶亚型2(NOX2)表达。结果表明,与对照组比较,模型组AngⅡ、ROS、CK、LDH、MDA水平显著或极显著升高(P<0.05或P<0.01),TAOC、SOD、GSH水平显著或极显著下降(P<0.05或P<0.01),NOX2表达增多。与模型组比较,中剂量、高剂量组AngⅡ、ROS、CK、LDH、MDA水平显著或极显著降低(P<0.05或P<0.01),而T-AOC、SOD、GSH水平显著或极显著升高(P<0.05或P<0.01),NOX2表达减少。提示血府逐瘀汤具有减轻心肌细胞氧化损伤作用,可能是其治疗CHD的部分起效环节。

从水通道蛋白4探讨附子理中汤温阳健脾祛湿的作用

目的:从水通道蛋白4(AQP4)探讨附子理中汤温阳健脾祛湿的分子作用机制。方法:清洁级Wistar大鼠随机分为空白对照组(对照组)、假手术组、模型组和附子理中汤高、中、低剂量组。采用“肩胛骨间棕色脂肪组织切除术+高脂饲料喂养+隔日寒冷环境刺激”方法造模。高、中、低剂量组以附子理中汤灌胃,连续干预30 d,HE染色观察回肠组织形态学变化,ELISA检测心房利尿钠肽(ANP)含量和炎症因子水平,Real-time PCR检测AQP4 mRNA表达,常规生化法检测血肌酐、尿素氮、尿肌酐含量。结果:与模型组比较,给药组回肠组织病理学变化均有不同程度的改善,ANP、炎症因子水平、AQP4 mRNA表达、血肌酐、尿素氮、尿肌酐含量得到纠正。结论:附子理中汤通过AQP4作用,一方面减轻胃肠组织炎症反应,另一方面经由ANP途径调控水液代谢,从而发挥其温阳健脾祛湿作用。

脾阳虚模型大鼠“运”“化”功能的增龄性变化

目的:探讨脾阳虚模型大鼠"运""化"功能的增龄性变化。方法:将新出生40只Wistar大鼠,体质量(5.6±0.5)g,采用肩胛骨间棕色脂肪组织切除术及高脂饮食隔日寒冷环境刺激造模,术后随机分为8周龄模型组、16周龄模型组、32周龄模型组、64周龄模型组4组,每组10只。另外40只大鼠用来设立相对应的同周龄的对照组4组,每组10只。到了相应的周龄后,检测胃肠动力学指标,采用免疫组化检测胃促生长素表达,酶联免疫吸附法和放射免疫法检测血清胃促生长素、胃泌素、瘦素、神经肽Y水平。结果:32周龄模型组、64周龄模型组分别与同周龄对照组比较,在胃肠动力学指标差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01),血清胃泌素、瘦素、神经肽Y水平差异也均有统计学意义(P<0.05或P<0.01),免疫组化检测结果显示胃促生长素表达有增龄性递减趋势。结论:脾阳虚模型大鼠"运""化"功能随增龄减弱,与胃促生长素调节胃肠运动和调控胃泌素、瘦素、神经肽Y水平通路机制有关。

从AQP4角度探讨脾主运化与水液代谢

水通道蛋白4(AQP4)是一种位于细胞膜上的蛋白质家族之一,在细胞膜上组成"孔道",可控制水液在细胞的进出。中医学认为脾是一个功能系统,主要功能体现在运化水谷、免疫等。其中的运化功能很重要,通过对脾运化功能以及与脾相关性病变的论述,思考水通道蛋白与脾运化功能的相关性,为进一步研究脾藏象理论与中西医结合治疗脾相关疾病提供参考。

更年期妇女失眠症中医临床治疗概述

通过文献查找和归纳,总结近年来关于更年期妇女失眠症中医药临床治疗的内容,从中药治疗、针灸治疗、贴敷法治疗和其它治疗四个方面综述了其中医药临床治疗的最新进展,为更年期妇女失眠症的治疗和研究提供文献参考依据。

大鼠冠心病心肌梗死模型制备的新方法

目的通过结扎大鼠左心室回旋支末梢血管,探索一种制作大鼠心肌梗死模型的新方法。方法将90只SD大鼠随机分为对照组(10只)和模型组(80只),大鼠经腹腔注射10%水合氯醛麻醉后,颈部行气管切开插管术,呼吸机维持呼吸。对照组只开胸不结扎;模型组开胸结扎左心室回旋支末梢血管,术后笼中饲养4周,观察大鼠形态、行为学、呼吸改变,心电图、梗死心肌表现,组织病理学HE切片,并对其成活率进行统计,描述模型制作成功的标准。结果经过上述方法造模后,模型组大鼠形态、行为学、呼吸改变符合冠心病心力衰竭特征,心电图表现符合冠心病心肌梗死的动态演变过程,梗死心肌表现符合心肌梗死室壁瘤特征,组织病理HE染色示心肌坏死符合冠心病心肌梗死特征。且术后成活率(即造模成功率)达到83.75%,各项指标符合临床冠心病心肌梗死标准。结论结扎大鼠左心室回旋支末梢制作大鼠心肌梗死模型,方法简单、稳定快速,造模成功率高、可控性好,与临床冠心病心肌梗死相似度高,是一种理想的造模新方法。

冠心病血瘀证的代谢组学及蛋白质组学研究进展

冠心病是威胁人类健康的一种心血管疾病。古代中医文献并没有冠心病的病名,目前认为冠心病心绞痛、心肌梗死属中医学厥心痛、真心痛、卒心痛等范畴。中医认为本病与痰浊、瘀血等病理产物阻滞心脉有关,因此血瘀证是冠心病重要的中医证候。近年来,医学家们为进一步了解冠心病血瘀证的发病及证候演变机制,利用代谢组学技术和蛋白质组学技术,从代谢产物和蛋白质差异揭示冠心病血瘀证的证候本质,揭示活血化瘀中药的作用靶点,为今后新药物研发提供依据,为冠心病血瘀证基础研究提供参考。

冠心病心肌缺血血瘀证动物模型分型综述

总结近几年冠心病心肌缺血血瘀证动物模型分型研究的相关文献,从气虚血瘀、痰瘀互结、寒凝血瘀、阳虚血瘀四个方面综述了其现代动物模型的制备和其相关指标的最新进展,为冠心病心肌缺血血瘀证动物模型的建立和研究提供文献参考依据。

附子理中汤对脾阳虚大鼠AQP4-ANP-pGC轴的影响

目的:从水通道蛋白4-心房利尿钠钛-非可溶性鸟苷酸环化酶(aquaporin4-atrial natriuretic peptide-particulate guanylate cyclase,AQP4-ANP-p GC)通路探讨附子理中汤温阳健脾祛湿的作用机制。方法:选清洁级Wistar大鼠120只,分为空白组、假手术组、模型组和附子理中汤高、中、低剂量组共6个组,每组20只。空白组常态饲养。假手术组与模型组采用"肩胛骨间棕色脂肪组织(brown adipose tissue,BAT)切除术+高脂饲料喂养+隔日寒冷环境刺激"方法造模(假手术组只找到BAT但不切除)。术后第1天始喂高脂饲料共30 d。在模型组基础上,高、中、低剂量各组分别予附子理中汤40,20,10 g·kg^(-1)·d^(-1)灌胃,其他组给予等体积的生理盐水灌胃。于给药30 d后(其中模型组于造模成功后第1天)取材,苏木素-伊红(HE)染色观察大鼠胃窦与回肠组织病理形态学变化;酶联免疫吸附法(ELISA)检测ANP含量;实时荧光定量PCR(Real-time PCR)法检测AQP4 mRNA表达情况;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测AQP4含量。结果:大鼠胃窦与回肠组织HE染色光镜下观察可见,附子理中汤各剂量组大鼠胃肠组织病理学改变均有不同程度的减轻,以高剂量组效果明显。与空白组和假手术组相比,模型组AQP4,ANP含量及AQP4 mRNA相对表达量降低(P<0.05,P<0.01)。与模型组相比,中、高剂量组AQP4,ANP含量及AQP4 mRNA相对表达量升高(P<0.05,P<0.01)。结论:附子理中汤可能通过影响AQP4-ANP-p GC通路中AQP4,ANP含量及AQP4 mRNA表达以参与脾阳虚证大鼠水液代谢的调节。

壮通饮对冠心病心肌缺血血瘀证大鼠氧化应激的影响

目的观察壮通饮对冠心病心肌缺血血瘀证大鼠氧化应激的影响。方法将SPF级Wistar大鼠随机分为空白组、假手术组、模型组、阳性对照组、壮通饮(ZTY)低、中、高剂量组7组,其中模型组、阳性对照组、壮通饮(ZTY)低、中、高剂量组建立冠心病心肌缺血血瘀证模型,假手术组只开胸不结扎左冠状动脉。术后,ZTY低、中、高剂量各组给予剂量依次为6.8,13.6,27.2·kg^(-1)·d^(-1)灌胃,阳性对照组给予复方丹参滴丸80mg·kg^(-1)·d^(-1)灌胃,于灌胃给药第4周末取材检测大鼠血清超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)。结果与空白组、假手术组相比,模型组、阳性对照组和壮通饮低、中、高剂量组大鼠血清的SOD、GSH-Px均降低,MDA升高(P<0.05);与模型组比较,中、高剂量组均能升高大鼠血清SOD、GSH-Px,降低血清MDA(P<0.05)。结论壮通饮能改善大鼠氧化应激状态,延缓冠心病心肌缺血进展。