颅内出血和窒息及肺炎新生儿血浆TSP-1含量检测与分析

目的探讨血小板反应蛋白-1(TSP-1)在新生儿颅内出血、窒息及肺炎等疾病中的含量及其意义。方法选取2019年1月至2020年3月期间西安交通大学第一附属医院新生儿科收治的109例新生儿,其中颅内出血组34例,窒息组26例,肺炎组32例;选取同期入院的晚期早产儿或足月新生儿,均未合并颅内出血、窒息、肺炎及其他严重合并症的17例患儿为对照组。采用酶联免疫吸附法测定各组的血浆TSP-1含量,并比较各组血小板计数的变化情况。结果与对照组比较,颅内出血组血浆TSP-1含量显著降低(t=3.937,P<0.001),窒息组血浆TSP-1含量显著升高(t=2.826,P<0.01),肺炎组血浆TSP-1含量显著升高(t=9.711,P<0.001)。另外,各病例组患儿血小板数量与对照组比较差异均无统计学意义(P>0.05)。对照组、颅内出血组、窒息组、肺炎组的血浆TSP-1水平与血小板计数均无相关性(r分别为0.166、0.298、0.215、0.194,P>0.05)。结论血浆TSP-1含量可能对预测新生儿颅内出血风险、评估窒息脑损伤程度及辅助肺炎早期诊断有一定的指导意义。

成纤维细胞生长因子2(FGF-2)诱导大鼠骨髓间充质干细胞骨架重塑

目的探讨成纤维细胞生长因子2(FGF-2)对大鼠骨髓间充质干细胞(BMSC)形态和骨架的影响。方法采用大鼠动脉内皮细胞(RAEC)和BMSC的TranswellTM隔离共培养体系,通过扫描电镜和罗丹明标记的鬼笔环肽染色观察BMSC的形态和骨架变化,ELISA检测细胞上清中的FGF-2含量;实时定量PCR检测单独和共培养后两种细胞的FGF-2 mRNA水平,共培养体系中添加FGF-2受体的抑制剂NVP-BGJ398,阻断FGF-2受体观察其对BMSC骨架的影响;单独BMSC培养基中添加重组FGF-2,验证外源性FGF-2的作用效果。结果与RAEC共培养后,BMSC逐渐拉伸、收缩,产生大量丝状伪足;在共培养体系中FGF-2含量增加且主要由RAEC分泌;FGF-2受体的抑制剂NVP-BGJ398可显著阻断BMSC骨架重塑,细胞多为短梭形,呈旋涡状排列。外源性FGF-2则促进BMSC胞体收缩、边缘拉伸,产生丝状伪足交错分布。结论RAEC分泌FGF-2诱导BMSC骨架重塑。

Sox2通过Wnt信号通路对宫颈癌侵袭及迁移能力的影响

目的探讨干细胞转录因子Sox2对宫颈鳞癌SiHa细胞侵袭及迁移能力的影响及其机制。方法采用RTPCR及Western blot方法分别检测本实验前期构建的稳定高表达Sox2的SiHa-Sox2细胞及对照组SiHa-EGFP细胞中Sox2的表达情况;细胞划痕实验及Transwell小室实验观察Sox2对SiHa细胞侵袭及迁移能力的影响;Western blot检测两组细胞中Wnt信号通路关键基因β-catenin的表达情况。结果稳定表达Sox2的SiHa-Sox2细胞中Sox2的mRNA及蛋白表达均明显增加;SiHa-Sox2组细胞侵袭及迁移能力增强;Western blot检测结果显示β-catenin表达上调。结论 Sox2通过上调β-catenin的表达激活Wnt信号通路,使宫颈鳞癌SiHa细胞的侵袭及迁移能力增强,从而促进宫颈鳞癌的发生发展。

Sox-2及Wnt信号通路蛋白在宫颈癌中的表达及相互作用

目的探究干细胞相关基因Sox-2和Wnt信号通路蛋白在宫颈鳞癌中的表达及二者的相关性。方法采用免疫细胞化学方法检测Sox-2、β-catenin及C-myc在宫颈癌细胞系HeLa、SiHa、C33A中的表达;采用免疫组织化学法检测其在30例正常宫颈组织及43例宫颈鳞癌组织中的表达。结果 Sox-2在SiHa、C33A的细胞核中表达,在HeLa中未见表达;β-catenin及C-myc在HeLa、SiHa及C33A中均有表达。在宫颈鳞癌组织中Sox-2、β-catenin和C-myc的表达明显高于正常宫颈组织(P<0.05);Sox-2表达与宫颈鳞癌病理分级相关(P=0.049),与临床分期、淋巴结转移、年龄无相关性(P>0.05),β-catenin和C-myc的表达与病理分级、临床分期、淋巴结转移及年龄均无关(P>0.05)。在宫颈鳞癌中,Sox-2与β-catenin的表达呈正相关(P<0.001,r=0.567),与C-myc的表达也呈正相关(P=0.030,r=0.331)。结论干细胞相关基因Sox-2与宫颈癌的发生相关,其机制可能通过调控Wnt/β-catenin信号通路参与肿瘤的发生发展。

不同保存方式对小鼠股骨力学性能的影响

本文比较了不同保存方式对小鼠股骨力学性能的影响,以期从生物力学的角度寻找样品最佳保存方式。研究选择12周龄健康雌性C57BL/6J小鼠20只,手术分离获得完整的左、右股骨,随机分为新鲜对照组、4%多聚甲醛固定组、4℃冷藏组、-20℃冷冻组、-80℃冷冻组,其中后三组低温保存组分别在各自不同温度储存1周、2个月、6个月,复温后行三点弯曲测试,记录载荷挠度等变化。结果显示:相对于新鲜对照组的测试结果而言,4%多聚甲醛固定组,弹性模量和挠度全部明显下降;4℃冷藏组保存1周后,样品最大载荷和弹性模量有所降低;-20℃保存2个月,力学性能接近于新鲜对照组,6个月后,最大载荷降低;而-80℃冷冻组在弹性载荷、最大载荷、弹性模量等方面的力学属性未发生明显变化。因此基于本文研究结果得出结论,-80℃冷冻保存对骨组织的力学性能影响较小,适合长期保存。

Sox2对宫颈鳞癌细胞增殖能力影响的研究

目的探讨干细胞转录因子Sox2对宫颈鳞癌细胞增殖能力的影响及其机制。方法将质粒pIRES-EGFP-Sox2转染宫颈鳞癌SiHa细胞系,采用G418筛选构建稳定表达Sox2的SiHa细胞克隆(SiHaSox2),MTT法检测Sox2表达对宫颈鳞癌细胞增殖能力的影响;流式细胞术检测细胞周期的变化;Western blot检测细胞周期相关蛋白CyclinD1表达变化。结果 pIRES-EGFP-Sox2转染SiHa细胞后(SiHa-Sox2组),细胞Sox2基因和蛋白均高表达(P均<0.01);SiHa-Sox2组细胞增殖速度加快;细胞周期中S期细胞比例明显增加;Western blot检测CyclinD1表达上调(P<0.05)。结论 Sox2基因通过上调CyclinD1蛋白的表达加速细胞周期进程,促进宫颈鳞癌细胞的增殖,从而促进宫颈鳞癌的发生发展。