腹膜透析患者营养不良的诊断及治疗

腹膜透析(PD)患者普遍存在的蛋白质-能量营养不良(PEM)是导致患者死亡的危险因素,PEM及其相关的能量消耗(PEM/W)与持续炎症状态和糖代谢异常等多种因素有关,虽然有较多评估PD患者营养状况的评估的研究较多,但尚无单一有效的评价方法,常需要结合多个营养指标。传统营养支持与食欲兴奋剂、抗炎制剂等新型营养策略相结合,为改善PEM/W提供了更好的方法。本文就PEM/W的原因,及不同原因导致PEM/W的识别和处理方法作一简述。

miR-155对肾小管上皮细胞转分化的影响及其机制研究

目的·研究miR-155在慢性肾脏疾病(CKD)患者血清中的表达情况,探讨miR-155是否通过下调Kriippel样因子4(KLF4)影响肾小管上皮细胞转分化(EMT)。方法·收集126例CKDⅠ期患者、163例CKDⅢ期患者以及130例正常体检人员的血清,通过实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测各组患者血清中miR-155的表达情况。在细胞实验中,用10μg/L TGF-β诱导肾小管上皮细胞EMT,通过转染miR-155 mimic和miR-NC至离体培养的肾小管上皮细胞中,光学显微镜下观察细胞形态变化。Transwell试验检测细胞的迁移侵袭能力,免疫印迹试验(Westernblotting)检测细胞中平滑肌α-肌动蛋白(SMα-actin)、胶原蛋白Ⅰ(collagenⅠ)、胶原蛋白Ⅳ(collagenⅣ)、钙黏着蛋白-E(E-cadherin)的表达情况。生物信息学预测miR-155潜在靶基因为KLF4,利用荧光素酶试验验证KLF4是miR-155的靶基因;再通过转染过表达KLF4的质粒至肾小管上皮细胞,检测细胞中SMα-actin、collagenⅠ、collagenⅣ、E-cadherin、KLF4的表达情况。结果·相比于正常人群组和CKDⅠ期患者,miR-155在CKDⅢ期患者血清中的表达降低。在细胞实验中,相比于空质粒组,转染miR-155 mimic后,肾小管上皮细胞中SMα-actin、collagenⅠ、collagenⅣ、KLF4的表达减少,E-cadherin表达增加;荧光素酶试验结果显示,miR-155能够显著降低含KLF4-3'-UTR序列质粒的荧光素酶活性;转染过表达KLF4质粒后,肾小管上皮细胞中SMα-actin、collagenⅠ、collagenⅣ表达增加,E-cadherin表达减少。结论·在CKD患者血清中,miR-155低表达;miR-155可以通过下调KLF4从而抑制肾小管上皮细胞EMT。

腹膜透析和血液透析对心肌损伤的影响

目的对比腹膜透析(peritoneal dialysis,PD)和血液透析(hemodialysis,HD)两种透析方式对心肌损伤的影响。方法选择2011年5月至2014年5月就诊于兰州大学第二医院肾内科的200例终末期肾病患者进行回顾性研究,按透析方式将患者分为HD组和PD组。PD组100例,男52例,女48例,透析时间为4~19个月,平均透析时间(14.2±0.9)个月;HD组100例,男48例,女52例,透析时间为4~17个月,平均透析时间(13.2±1.2)个月。所有患者均检测肌红蛋白、肌酸激酶、肌钙蛋白、B型心钠肽、乳酸脱氢酶、超敏C反应蛋白等心肌损伤标志物,比较2组上述指标的差异。结果 2组患者在随访期间无终止透析、肾移植、失访、死亡。2组患者在基线资料特征及指标中无统计学差异(P>0.05);但HD组血钾高于PD组(P<0.05),血二氧化碳结合力和血清铁蛋白低于PD组(P<0.05)。2组患者基线水平透析充分性以及在开始透析前基线水平心脏结构及心功能方面评估,无统计学差异(P>0.05)。HD组透析后肌红蛋白、肌酸激酶、肌钙蛋白、B型心钠肽、乳酸脱氢酶分别为187ng/ml、14.5ng/ml、201ng/L、245ng/L、135U/L、10.8mg/L;PD组透析后肌红蛋白、肌钙蛋白、B型心钠肽、乳酸脱氢酶分别为190ng/ml、14.7ng/ml、209ng/L、278ng/L、143U/L、10.1mg/L;随访期间2组心血管疾病发生情况无统计学差异(P>0.05)。危险因素分析提示肌钙蛋白、肌红蛋白、肌酸激酶、B型心钠肽可以反映尿毒症患者心机损伤情况。结论 HD和PD两种透析方式对尿毒症患者心肌损伤无明显差异。

黄芪单体毛蕊异黄酮对血管内皮细胞前列环素和血栓素A_2的影响

目的观察黄芪单体毛蕊异黄酮对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导体外培养的人脐静脉内皮细胞(HU-VECs)合成前列环素(PGI2)、血栓素A2(TXA2)的影响。方法以HUVECs为研究对象,用L-DMEM培养基在5%CO2、37℃条件下对HUVECs进行传代培养,至足够数量后对其进行分组处理:(1)空白对照组(不加入任何干预因素);(2)AngⅡ组(加入AngⅡ至终浓度为1×10-6 mol/L);(3)AngⅡ+毛蕊异黄酮不同剂量组(10、1、0.1mg/L),分别培养0、6、12、18、24 h后收集细胞上清进行PGI2、TXA2的检测,检测方法采用ELISA。结果 (1)与空白对照组比较,AngⅡ可以诱导HUVECs合成PGI2和TXA2,并且都具有时间依赖性(r=0.891,P=0.043;r=0.95,P=0.013);(2)与AngⅡ组比较,毛蕊异黄酮0.1 mg/L可以抑制AngⅡ诱导PGI2和TXA2的合成(P<0.05);1 mg/L可以促进AngⅡ诱导的PGI2合成,抑制TXA2合成(P<0.05);10 mg/L可以促进AngⅡ诱导的PGI2和TXA2合成(P<0.05)。结论黄芪单体毛蕊异黄酮可以影响AngⅡ所诱导的HUVECs PGI2和TXA2的合成。

MiR-155与KLF4的靶向结合对肾小管上皮细胞MMPs表达的影响

目的研究miR-155是否通过下调靶基因Kruppel样因子4(KLF4)影响肾小管上皮细胞中基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase 2,MMP-2)和MMP-9的表达。方法首先验证miR-155是否可以抑制肾小管上皮细胞中MMPs的表达和活性及其对KLF4表达影响:miR-155-mimic、miR-155mimic-对照(空质粒)、空白培养基转染离体培养的肾小管上皮细胞,6h后,荧光定量RT-PCR检测miR-155表达,免疫印迹试验(Western blot)检测细胞MMP-2、MMP-9、KLF4的表达,明胶酶谱检测细胞中MMP-2和MMP-9的活性。生物信息学预测miR-155潜在靶基因为KLF4后,验证miR-155是否是通过靶向抑制KLF4发挥其作用:肾小管上皮细胞用过表达miR-155的质粒转染后,再进一步转染KLF4过表达质粒或空质粒,6h后Western blot和明胶酶谱法再次检测上述指标。另取细胞,分别构建包含KLF4-3′-UTR野生型和突变型序列的荧光素酶质粒,与miR-155-mimic或者空质粒对照共转染肾小管上皮细胞,24h后荧光素酶试验检测miR-155对KLF4基因的靶向抑制。结果相比转染miR-155mimic-对照的细胞,转染了miR-155-mimic的细胞miR-155表达上调,KLF4的表达受到抑制,MMP-2、MMP-9的表达和活性下降。相比于转染miR-155质粒和转染miR-155+空质粒,转染过表达KLF4+miR-155质粒的细胞KLF4表达上调,MMP-2、MMP-9的表达和活性增加。荧光素酶试验验证miR-155可与KLF4靶向结合。结论 MiR-155可以通过靶向作用下调KLF4,从而抑制肾小管上皮细胞中MMP-2、MMP-9的表达和活性。

黄芪单体毛蕊异黄酮对TNF-α损伤人脐静脉内皮细胞ET-1／NO的影响

目的探讨黄芪单体毛蕊异黄酮对TNF—α诱导的人脐静脉内皮细胞（ECV-304）的一氧化氮（NO）、内皮素-1（ET-1）的影响。方法用DMEM培养液在37℃、5％CO2条件下对ECV304细胞株进行扩增至足够数量后，调细胞密度为1×10^5，并分为7组：A组：空白组，不加任何诱导剂；B组：TNF—α（40ng／ml）诱导组；C组：TNF—α（40ng／m1）＋氯沙坦钾（105mol／1）；D组：TNF—α（40ng／m1）＋毛蕊异黄酮（0．1mg／ml）；E组：TNF—α（40ng／ml）＋毛蕊异黄酮（1mg／ml）；F组：TNF—α（40ng／ml）＋毛蕊异黄酮（10mg／ml）；G组：TNF—α（40ng／ml）＋毛蕊异黄酮（20mg／ml）。分别于孵育6小时、24小时后时收集上清液，用ELISA检测上清液中一氧化氮（NO）、内皮素1（ET-1）的含量。结果①与空白组比较，TNF—α降低了ECV-304NO水平（P〈0．001）、提高了ET—1水平（P〈0．001）；②氯沙坦钾提高了ECV-304NO水平（P〈0．001）、降低了ET—1水平（P〈0．001）；③毛蕊异黄酮（0．1mg/ml～10mg／ml）能够促进ECV-304细胞NO的产生（P〈0．001）、降低ET—1的产生（P〈0．001）；④氯沙坦钾和毛蕊异黄酮（20mg／ml）对ECV-304细胞ET-1和NO水平的影响无明显差异（（P〉0．05）；⑤毛蕊异黄酮浓度（在0．1mg／ml-20mg／ml内）与ECV-304ET—1的分泌呈负相关性（r=-0．02、P〈0．001）；与ECV-304NO的分泌呈正相关性（r=0．0075、P〈0．001）。结论黄芪毛蕊异黄酮单体可以促进TNF—α诱导的内皮细胞NO分泌，抑制ET—1分泌，并在一定浓度内（0．1mg／ml-20mg／ml）呈浓度依赖性。

黄芪毛蕊异黄酮对转化生长因子β1诱导内皮细胞转分化的影响

目的:探讨黄芪单体毛蕊异黄酮对转化生长因子β1(TGF-β1)诱导人脐静脉内皮细胞转分化的影响,以阐明黄芪毛蕊异黄酮对肾脏纤维化的保护作用。方法:人脐静脉内皮细胞系ECV-304为研究对象,体外培养ECV-304细胞株,分为正常对照组,TGF-β1组(10μg/L),TGF-β1+毛蕊异黄酮低、中、高剂量组(0.1、1、10mg/L)。各组细胞培养72h后,采用荧光倒置相差显微镜观察细胞形态学变化,Western Blot检测肌成纤维细胞标志物α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达变化。结果:与正常对照组相比,TGF-β1组细胞从原有典型的上皮细胞形态转变为长梭形肌成纤维细胞形态,TGF-β1明显促进α-SMA蛋白的表达(P<0.01);毛蕊异黄酮与TGF-β1共培养后可明显抑制TGF-β1诱导的细胞形态学改变及α-SMA的表达(P<0.05),高剂量组比低、中剂量组有更强的抑制效应,低剂量组抑制效应最弱。结论:黄芪单体毛蕊异黄酮可以抑制TGF-β1诱导的内皮细胞(ECV-304)向肌成纤维细胞转化,具有保护内皮细胞的作用,从而为防治慢性肾脏病提供了依据。

肾脏复发的IV型狼疮肾炎临床特点及预后分析

狼疮肾炎（LN）患者肾脏复发（renalflare）非常常见，是导致患者致残率和病死率增加的重要原因之一。我们回顾性分析本中心15年来IV型LN肾脏复发患者临床资料，总结肾脏复发的发生率、复发时间、复发时的临床表现、复发前后的诱导治疗及维持期治疗、预后及风险因素，加强同行们对LN肾脏复发的认识。

血Pin1与慢性肾脏病继发性甲状旁腺功能亢进的关系

肽酰脯氨酰顺反异构酶1（peptidyl—prolyl cis-transisomerase 1，Pin1）属于肽酰脯氨酰同分异构酶家族Pin1型亚家族，具有高度保守性和特异性，能特异性地催化磷酸化的丝／苏-脯氨基酸基序发生异构，使得底物蛋白构象改变而调节他们的功能。

红细胞生成素及其与心肾综合征关系的研究进展

红细胞生成素（erythropoietin,EPO）是肾脏产生的重要激素,在红细胞的成熟过程中发挥重要作用.重组人红细胞生成素（rhuEPO）是纠正肾性贫血的重要药物.不仅如此,近年来研究还表明,EPO与心肾综合征（severe cardiorenal syndrome,SCRS）的发生和发展具有一定关系.SCRS是指机体在病理状态下通过肾素～血管紧张素系统（RAS）、一氧化氮与活性氧（NO-ROS）平衡、炎症以及交感神经系统（SNS）四者之间相互作用,导致心脏和肾脏功能衰竭的一个病理过程,预后较差.研究发现,EPO可以通过减少炎症反应、降低RAS系统活性、调节NO和ROS以及改变SNS兴奋性等改善心、肾功能.本文就EPO和SCRS之间的关系以及对细胞保护机制的认识作一综述.