体外诱导骨髓基质干细胞向神经细胞分化及蛋白的差异表达(英文)

背景:骨髓基质干细胞移植对损伤脊髓有一定修复作用,较神经干细胞移植更为理想,但疗效并不稳定,可能与其移植微环境有关。目的:拟建立体外神经细胞微环境作用下骨髓基质干细胞的分化模型,观察其分化过程中蛋白表达的差异。设计、时间及地点:蛋白水平的观察对照实验,于 2005-07/2007-05 在哈尔滨医科大学基础医学院神经生物实验室完成。材料:Wistar 成年大鼠及新生胎鼠。方法:取新生 Wistar 胎鼠脊髓,以培养神经细胞。从成年 Wistar 大鼠骨髓中分离骨髓基质干细胞进行体外培养和增殖,应用红色荧光蛋白 PKH26 标记骨髓基质干细胞。骨髓基质干细胞、神经细胞单独培养组分别将骨髓基质干细胞、神经细胞单独培养,共培养组、分层联合培养组分别将标记的骨髓基质干细胞与神经细胞在体外共培养及在双层培养皿中联合培养。主要观察指标:培养 7 d 后收集细胞分别进行神经特异性烯醇化酶和胶质纤维酸性蛋白免疫荧光检测。应用 SELDI-TOF-MS 技术筛选骨髓基质干细胞向神经细胞分化过程中变化明显的相关蛋白进行分析。结果:骨髓基质干细胞与神经细胞共培养和双层联合培养 7 d 后,骨髓基质干细胞呈类似神经细胞形态。免疫荧光检测结果示,共培养组骨髓基质干细胞的神经特异性烯醇化酶和胶质纤维酸性蛋白阳性率明显高于分层联合培养组(P < 0.05),分层联合培养组明显高于单独培养对照组(P < 0.05)。骨髓基质干细胞在向神经细胞转化过程中有 5 种蛋白表达发生明显变化:在分层联合培养组TIP39_RAT 和 CALC_RAT 表达增加,为原表达量的 5.344 和 2.805 倍;INSL6_RAT,PNOC_RAT 和 PCSK1_RAT 表达下降,为原表达量的 0.380,0.499 和 0.437 倍。结论:在体外神经细胞微环境作用下,骨髓基质干细胞与神经细胞在共培养和双层联合培养时均能诱导分化成神经细胞,接触培养比非接触培养分化率高。骨髓基质干细胞在向神经细胞转化过程中与 5 种蛋白TIP39_RAT,CALC_RAT,INSL6_RAT,PNOC_RAT 和 PCSK1_RAT 密切相关。

中西医结合治疗肠梗阻研究进展

肠梗阻作为外科常见急腹症之一,是各种原因引发肠内容物障碍疾病的总称。肠梗阻在中医学中属于"肠结""腹痛""关格"等范畴,常因饮食不节、劳累过度、瘀血滞留、热邪郁闭等导致,通降功能失调而发病,疾病是一个动态发病的过程,如果没有得到及时有效的治疗,往往会导致病情加重,危及生命。疾病的常规治疗包括胃肠减压治疗、维持水电解质平衡和预防感染治疗。近年来,中西医结合治疗肠梗阻取得显著成效,本研究主要就中西医结合治疗肠梗阻展开综述。

骨髓基质干细胞治疗脊髓损伤的体外诱导分化及相关蛋白表达

目的探讨模拟脊髓细胞环境下骨髓基质干细胞（BMSCs）的分化及蛋白差异表达。方法分离培养Wistar大鼠骨髓的BMSCs和脊髓的神经细胞，设立BMSCs自然分化组、与神经细胞共培养组和双层培养组，8d后对各组BMSCs进行神经特异性烯醇化酶（NSE）和胶质纤维酸性蛋白（GFAP）免疫荧光检测。应用表面增强激光解析离子化．飞行时间质谱技术（SELDI-TOF-MS）筛选双层培养组BMSCs变化明显的蛋白进行分析。结果BMSCs与神经细胞共培养和双层培养8d后，BMSCs呈神经细胞形态。NSE和GFAP检测结果，BMSCs与神经细胞共培养组明显高于BMSCs与神经细胞双层培养组（P〈0．05），而BMSCs和神经细胞双层培养组又明显高于BMSCs自然分化组（P〈0．05）。SELDI-TOF-MS检测到TIP39_RAT和CALC_RAT增加到原来的5．360和2．807倍，INSL6_RAT、PNOC_RAT和PCSK1_RAT减少到原来的38．0％、49．9％和43．8％。结论在脊髓神经细胞微环境下体外培养BMSCs能诱导其分化成神经细胞，而且接触培养分化率高；BMSCs在向神经细胞分化机制中与TIP39_RAT、CALC_RAT、INSL6_RAT、PNOC_RAT和PCSKI_RAT密切相关。

探讨肩关节创伤的临床诊断与治疗

目的：总结肩关节创伤的诊断和治疗原则.方法：回顾2006年1月~2010年1月收诊的肩关节创伤的30例的发病机制、病程、症状及体征.肩关节X线片,以及基于关节囊、盂唇愈合机制,采用康复治疗和前关节囊修复成形术治疗的经验,提出诊断标准和治疗原则.结果：30例肩关节前不稳定的诊断标准为：①外伤史;②肩前侧痛、无力、关节活动受限和肩周肌肉萎缩;③前惧痛征和前抽屉试验阳性;④X光拍片有骨缺损.治疗原则：①病程3个月内康复治疗;②病程3个月以上关节囊撕裂,康复治疗无效者,行手术治疗.治疗结果：30例患者平均随访15个月,临床效果满意.结论：肩关节创伤前不稳定诊断标准和治疗原则的提出,对提高肩部损伤的治疗水平以及相关理论的临床研究等具有参考价值.