草木樨状黄芪和光棘豆细胞悬浮培养的最佳培养基

利用不同培养基进行草木樨状黄芪和光棘豆愈伤组织的细胞悬浮培养,筛选出适合这两种植物细胞悬浮培养的最佳培养基S_(12),该培养基能抑制褐化,维持细胞的胚性生长。

豆科植物组织培养的研究

本文采用A和B两种基本培养基,对15属31个种的豆科植物进行组织培养并得到再生植株。同时,探讨了培养基成分(大量元素、微量元素、有机成分和激素)、光照、温度及种子萌发率对愈伤组织分化的影响。对于多数豆科植物来说,A和B两种培养基的大量元素,B5培养基的微量元素和有机成分,1500—2500 lx自然光为主的光照和18—27℃的变温条件,以及当年采集的豆科植物种子,比较适合于愈伤组织的分化。根据豆科植物愈伤组织分化时形态结构特征上的变化,可将其分为a、b、c、d 4种基本类型,同属植物的愈伤组织基本上属于同一类型,不同属植物的愈伤组织往往属于不同类型。

帕金森病与细胞凋亡

帕金森病的病因和发病机制尚不十分清楚,最近的研究表明细胞凋亡可能在帕金森病的黑质多巴胺能神经元死亡中起重要作用。充分理解帕金森病中的细胞凋亡机制,有助于寻求神经保护的新方法和延缓神经退行性疾病的进程。本文综述了近年的相关研究进展。

天蓝苜蓿单细胞培养植株再生

采用了改良K8p和Ay3两种培养基,对天蓝苜蓿进行单细胞培养并得到再生植株。来自天蓝苜蓿胚轴愈伤组织的细胞系,在单细胞培养中的愈伤组织分化率明显高于来自子叶愈伤组织的细胞系。改良K8p培养基较之Ay3培养基更利于天蓝苜蓿单细胞培养。生物素、泛酸钙和葡萄糖对细胞系的细胞分裂、愈伤组织诱导和分化有促进作用。赤霉素促进再生幼芽向植株发育。

细叶黄芪叶肉原生质体植株再生

从细叶黄芪(Astragalus tenuis)外植体愈伤组织分化出的再生苗叶片分离原生质体。原生质体培养在改良 K8p 培养基中形成了愈伤组织。增殖后的愈伤组织转入分化培养基中分化出苗。幼苗在生根培养基中长出不定根,再生成为完整植株。再生苗叶肉原生质体在 AY培养基中,种子无菌苗叶肉原生质体在改良 K8p 或 AY 培养基中均不能形成愈伤组织。较低的2,4-D 浓度有利于原生质体愈伤组织的形成和分化,过高的2,4-D 浓度对愈伤组织的形成和分化有不利的影响。

hTR基因反义表达质粒构建及序列分析

从人的脐带血管内皮细胞中提取基因组 DNA,通过 PCR方法扩增得到了人端粒酶RNA成分 ( human telomere RNA,h TR)的基因片段 ,扩增产物经酶切克隆到逆转录病毒载体p LNCX上 ,构建了 h TR基因的反义表达质粒 .序列分析结果表明 ,PCR扩增得到的 h TR基因的 DNA序列与所发表的序列完全一致 .构建的反义表达载体中的目的基因正确地反向插入到逆转录病毒载体 p LNCX的克隆位点上 ,构成了 h

利用RAPD技术快速鉴定番茄杂种纯度

从两个番茄杂种Ｌ４０２、Ｌ４０４及它们的亲本共６份材料的叶片中提取ＤＮＡ，使用国产ＰＣＲ仪，建立了适合番茄ＲＡＰＤ分析的ＰＣＲ条件，进一步在１００个随机引物中找到了５个可用于鉴定这两个杂种纯度的引物，其中ＯＰＫ１４引物可同时用来鉴定两个杂种。利用该法鉴定杂种纯度不仅简单、迅速、可靠，而且因ＤＮＡ的用量少，不影响被检植株的后期生长。

人乳铁蛋白基因克隆及细胞表达研究

通过PCR法直接克隆了 2 .36 6kb的人乳铁蛋白基因cDNA序列及 80 0bp的山羊 β.M乳球蛋白基因 5′端调控序列 ,并连接到表达载体pLNCX中。利用脂质体包裹含人乳铁蛋白基因cDNA的重组质粒pLNCXHLF ,并导入到小鼠乳腺癌细胞株MA.M 782中 ,G418及PCR筛选获得阳性单克隆细胞 ,增殖后 ,转染细胞利用海藻酸钠固定化包埋培养 ,经激素诱导 ,培养液上清通过Western印记检测证明 ,转染细胞表达并分泌出人乳铁蛋白 ,分子质量为34kDa;ELISA法测出 ,每升培养基 (含 10 5个细胞 )重组蛋白最高表达量为 6 5mg ;抗菌实验表明 ,所获得的重组人乳铁蛋白具有抑制大肠杆菌生长的作用 ,而且比人乳铁蛋白标准品作用更强。

用SSR探针进行番茄品种的DNA指纹分析

用放射性同位素γ－３２Ｐ－ＡＴＰ标记人工合成的简单重复序列（ＧＡＴＡ）４，与经ＤｒａⅠ酶切的８个番茄品种的ＤＮＡ进行Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交，得到的ＤＮＡ指纹在品种间差异很大，在品种内单株间无差异。经统计计算，任意两个品种间具有完全相同ＤＮＡ指纹的概率为１．１×１０－４，呈现了高度的品种特异性。

大连蛇岛蝮蛇类凝血酶基因在毕赤酵母中的克隆表达及分离纯化(英文)

根据同源性分析设计引物 ,通过RT PCR方法从大连蛇岛蝮蛇毒腺总RNA中合成扩增出类凝血酶基因 ,之后将该基因克隆到表达载体 pPIC9K中 ,经电激转化后整合至毕赤酵母细胞基因组中 .经筛选得到甲醇快速生长型转化子His+ Mut+ 在 5 0 0ml摇瓶中培养 ,甲醇诱导分泌表达 .上清液中重组类凝血酶是通过两步柱层析得到 :QSepharoseFF和Benzamidine Sepharose 4BCL .与天然蛇毒类凝血酶一致 ,分泌表达的重组类凝血酶具有较强的酯酶活性 ,但精氨酸甲酯如TAME的水解活性较弱 .此重组类凝血酶在 37℃中性溶液中保存过夜将分解成小肽 ,但在 0℃下很稳定 .该酶的最适pH为 8 0 .

喜树愈伤组织诱导及喜树碱的产生

喜树碱是继紫杉醇后又一很有发展前途的植物性抗癌药 .利用喜树的幼叶为外植体诱导出喜树愈伤组织 ,在SH培养基上 (附加 5mg/L的NAA及 0 2mg/L的 6-BA ,3 0 g/L的蔗糖 )诱导出的愈伤组织有根的分化 ,用TLC法能鉴定其中含有喜树碱 ,用HPLC法确定其喜树碱的含量最高可达到0 0 0 2 4 5% ,为原植株的 1 / 2 0 .在Hela细胞的抗癌实验中 ,喜树愈伤组织乙醇提取物表现出较强的抗癌活性 .

转BADH基因玉米的获得及其耐盐性

利用花粉管通道技术将甜菜碱醛脱氢酶(BADH)基因导入玉米,以提高玉米的耐盐性.对1 286株转化玉米进行PCR检测,共有16株呈阳性,转化率为1.2%.Southern Blot进一步证明BADH基因已经整合到玉米基因组.将阳性植株的后代(T3)用含1.2%NaCl的Hogland营养液每日1次浇灌,14 d后对玉米叶片的相对电导率和叶绿素含量进行测定.结果表明在同样的盐胁迫条件下,转基因植株所受到的盐伤害明显较对照植株轻,说明转入的BADH基因可以提高玉米的耐盐能力.

大鼠脑内caveolin-1蛋白的表达及其在分辨学习中的作用

Caveolin-1(Cav-1)蛋白作为细胞质膜结构小窝(caveolae)的标志蛋白,在胆固醇运输、膜组装、信号转导和细胞转化过程中扮演重要的角色。为了探讨Cav-1蛋白在中枢神经系统可塑性及学习记忆中的作用,本文以Sprague-Dawley大鼠为实验对象,利用蛋白质免疫印迹杂交方法观察了Cav-1蛋白在不同年龄大鼠脑内表达的特征,并研究了Y-迷宫训练前后Cav-1蛋白表达的变化。结果表明:(1)大鼠不同脑区Cav-1蛋白表达的年龄特征不同。海马内的表达属青年鼠最高,其次是老年鼠和幼年鼠;皮层内的表达属幼年鼠最高,其次是老年鼠,青年鼠最低;小脑内的表达无明显年龄差异。(2)Y-迷宫训练引起青年鼠海马和前额叶皮层内Cav-1蛋白的表达显著增加。结果提示,Cav-1蛋白与动物脑发育和学习记忆有密切关系,可能参与中枢可塑性的调节。

菟丝子提取物在PC12细胞株中的神经营养因子样活性

以常用的PC12细胞株为实验模型 ,考察了菟丝子提取物诱导PC12细胞分化及对相关激酶活性的影响 .发现该提取物在诱导PC12细胞分化的同时 ,可明显提高有丝分裂原激活的蛋白激酶 (MAPK)磷酸化 .MAPK激酶的特异抑制剂PD980 5 9,能够有效地抑制菟丝子提取物诱导PC12细胞中MAPK的磷酸化和突起的延伸 ,表明该提取物诱导PC12细胞分化可能与MAPK途径有关 .同时还发现 ,该提取物能一定程度地抑制去血清引起的细胞凋亡 。

水杨酸对喜树细胞次级代谢的诱导作用

将水杨酸(SA)应用于喜树细胞培养体系中.通过添加不同浓度的水杨酸,研究了它对喜树细胞过氧化物酶(POD)活力、超氧化物歧化酶(SOD)活力、可溶性蛋白含量、细胞活力以及细胞生长和代谢产物积累的影响.结果表明,SA可以提高POD和SOD的活力以及可溶性蛋白的含量,增强喜树细胞的次级代谢作用,有利于代谢产物喜树异碱A和喜树异碱B的合成.

红松RAPD实验中各组成成份含量对实验结果的影响

本文采用Ｐｒｏｍｅｇａ的ＰＣＲ反应系统，以从红松幼叶中提取的总ＤＮＡ为模板，进行随机扩增多态ＤＮＡ（ＲＡＰＤ）实验，分别测试了镁离子、ｄＮＴＰ、模板ＤＮＡ，引物和ＤＮＡ聚合酶含量对反应结果的影响，通过各因子的组合实验，确定了红松最佳的ＲＡＰＤ反应体系。

精子干细胞转染法制备转基因兔的研究

采用直接注射的方法 ,将脂质体包裹的含人乳铁蛋白基因重组质粒 pLNCXHLF注入兔睾丸组织中 ,一个月后与正常雌兔交配。所产仔兔经PCR、Southern检测证明获得了转基因兔 ,转基因阳性率平均为 35 %。实验结果表明 ,通过注射可将外源基因导入到曲细精管中 ,进而完成对精子干细胞的转染 ,获得携带外源基因的成熟精子 ,受精后可得到转基因动物。该方法是一种简捷、有效的新途径 ,既节省时间又降低了成本 ,为利用精子载体制备转基因动物的研究提供了很有价值的参考。

植物跨膜离子转运蛋白与其耐盐性关系研究进展

盐胁迫下植物吸收过多的N a+,使植物体内的离子平衡受到破坏,为了维持其正常生长细胞内的各种离子就必须保持平衡,而这一过程主要是由位于质膜和液泡膜上的离子转运蛋白完成的,并在植物耐盐性方面起关键作用。本文主要对响应盐胁迫的几种跨膜转运蛋白如:K+/N a+离子转运蛋白、N a+/H+逆向转运蛋白以及与其相关的H+-ATPase等,在植物耐盐分子生物学方面的研究进展进行综述。

基因枪法转化水稻(Oryza sativaL.)获得可育的转抗虫基因水稻再生植株

应用基因枪 ( particlebombardment)转化技术成功地将豇豆胰蛋白酶抑制剂(cowpeatrypsininhibitor,CpTI)基因分别导入三个水稻粳稻栽培品种 (OryzasativaL .,japonica)中花 8、中花 10和中作 32 1的幼胚和胚性愈伤组织中 ,并由此获得了可育的再生植株 ,抗性植株的筛选频率为 6.1%～ 12 .2 4 %。经PCR、Southernblot分子检测和ELISA检测等证实所获得的潮霉素抗性植株为转基因植株。抗虫性分析结果表明 ,部分转基因水稻植株对玉米螟虫 (Ostrinianubilalis)

人参皂苷生理活性的研究进展

综述了人参皂苷生理活性作用的最新研究成果 ,简单介绍了人参皂苷的结构。