非洲爪蟾孵化酶的cDNA结构及其部分生物化学特性的研究

以ＵＶＳ．２为探针从第２５期非洲爪蟾胚胎头背部的ｃＤＮＡ文库中筛选出了一个１８ｋｂ的孵化酶基因（ｘｈｅ），其转录产物最早出现于第１７期胚胎的头背部，在第３０期转录量达到高峰，随后便逐渐减少。该基因含有编码５１４个氨基酸的一个开框阅读框架，含有信号肽和原酶序列。所推测出的成熟蛋白有４２５个氨基酸，包括位于Ｎ端的含有２００个氨基酸的金属蛋白酶序列和位于Ｃ端的两个各１１０个氨基酸的ＣＵＢ重复区。而ＵＶＳ．２只代表该基因Ｃ端大约３／４的部分。同时还发现该酶分子量为６０ｋＤａ，是一种胰蛋白酶类型的金属蛋白酶。它很不稳定，在纯化过程中极易降解为４０ｋＤａ分子。６０ｋＤａ分子具有很强的卵黄膜溶解活性和蛋白酶活性。其中ＣＵＢ重复区很可能在介导卵黄膜和４０ｋＤａ分子中起着重要作用，而４０ｋＤａ分子很可能是在纯化操作过程中，由６０ｋＤａ分子发生降解或自身降解丢失了两个ＣＵＢ重复区而形成的，它只是６０ｋＤａ分子中的一个金属蛋白酶主功能区，所以它没有卵黄膜溶解活性，尽管仍具有很强的蛋白酶活性。