鲍曼不动杆菌外膜蛋白A通过Akt/mTOR/p70S6K信号通路引起RAW264.7细胞自噬

目的:分析鲍曼不动杆菌标准株ATCC 19606(Acinetobacter baumannii ATCC 19606)外膜蛋白A(outer membrane protein A,Omp A)对RAW264. 7细胞的自噬诱导作用。方法:建立Omp A刺激RAW264. 7细胞的模型,通过细胞免疫荧光染色、Western blot和透射电子显微镜检测Omp A对RAW264. 7细胞自噬的影响。结果:Omp A可以引起自噬蛋白LC3B-II表达升高,并抑制Akt/mTOR/p70S6K的磷酸化水平;雷帕霉素可以进一步降低mTOR和p70S6K磷酸化,并提高Omp A引起的LC3B-II表达升高。结论:鲍曼不动杆菌Omp A通过Akt/mTOR/p70S6K信号通路引起RAW264. 7细胞自噬。这为将来进一步研究鲍曼不动杆菌引起自噬的分子机制及找到对抗其感染的新方法提供理论依据。

鲍曼不动杆菌外膜蛋白A真核表达载体构建及其诱导Hela细胞不完全自噬

目的构建鲍曼不动杆菌ATCC19606(Acinetobacter baumannii ATCC 19606)外膜蛋白A(outer membrane protein A,OmpA)的真核表达载体pEGFP-OmpA,研究OmpA对Hela细胞自噬的影响。方法采用PCR方法扩增鲍曼不动杆菌ATCC19606的OmpA基因,将其克隆至真核表达载体pEGFP-N1,以构建重组质粒pEGFP-OmpA;用脂质体转染法将其转染Hela细胞;流式细胞术、细胞免疫荧光和Western blot检测OmpA表达水平;激光共聚焦显微镜检测OmpA在Hela细胞中的定位;Western blot及透射电子显微镜检测OmpA对Hela细胞自噬的影响。结果经双酶切及测序鉴定表明pEGFP-OmpA质粒构建成功;OmpA可以大量表达于Hela细胞的细胞质和细胞核中;OmpA可导致Hela细胞中自噬相关蛋白LC3BⅡ、p62和Beclin-1表达升高,而且在Hela细胞中发现自噬小体;OmpA会干扰p62降解,引发不完全自噬。结论本研究成功构建pEGFP-OmpA真核表达载体,它可以在Hela细胞中高效表达,并可导致Hela细胞不完全自噬,这为将来进一步研究鲍曼不动杆菌OmpA引起自噬的机制奠定基础。

脑组织与法医学死亡时间推断

目前,通过脑组织推断死亡时间已经成为法医学领域研究的新热点,大量研究资料表明:死亡时间与脑组织细胞DNA、RNA、ATP含量及脑温度、脑组织血管内皮生长因子等变化有高度相关性。脑CT、MR I、磁共振波谱等检查手段对死亡时间的推断也有帮助。本文对国内外相关文献进行综述,以期为相关研究提供参考。

我国目前高职高专教育培养中存在的问题

l 高职高专教育应根据岗位和岗位群设置专业l缺乏企业的支撑和与企业的联系、学校自身投入的不足以及实践课程设计的不合理是造成实践教学基地不足的主要因素l对于高职高专学生来说,应培养学生的创新能力,原创是创新。

长链非编码RNA对免疫应答调节的研究进展

lncRNA是由RNA聚合酶Ⅱ转录生成,长度大于200个核苷酸的长链非编码RNA,它没有开放读码框,不能翻译成蛋白质,曾被认为是基因组中的＂暗物质＂。目前科学家们还没有精确掌握其功能信息以及全部的二维和三维结构,所以很难对lncRNA进行分类,现在是通过lncRNA和蛋白编码基因的相对位置对其进行分类的。

防范利用远程溢出植入后门的设计与实现

缓冲区溢出是目前病毒主要利用的漏洞之一,首先分析了远程溢出攻击的基本原理,在此基础上给出了具体的远程溢出的设计与实现方法。阐述了Shellcode从高级语言到机器语言的构造过程,介绍了漏洞扫描的具体实现方法,最后给出了远程溢出的防范建议。

农用地分等土地经济系数研究浅析

近年来,随着经济社会的快速发展,土地特别是农用地供求矛盾日趋尖锐。如何充分利用土地,提高土地尤其是农用地效率成为当前土地研究领域的重点问题。代表土地效率的土地经济系数作为农用地分等指数中一个重要的参数,无论是对于分等指数的计算还是单独作为一项农用地评价成果都有很大的研究意义和应用价值。

分布式入侵检测系统设计

详细叙述了分布式入侵检测系统的设计方法,该系统主要实现分布式分析管理,捕获入侵检测的数据包,并增添了失效转移模块,保证整个系统的稳定性。对提高入侵检测系统的工作效率,细化入侵检测的分类有一定的指导意义。

微滴式数字PCR技术用于生物样品种属鉴定和绝对定量

目的运用微滴式数字PCR技术进行生物样品的种属鉴定和绝对定量。方法选择人mtDNA两个编码基因ND4和16S rRNA,设计特异性引物与探针,用人来源及常见动物样本验证种属特异性,再用重组质粒和2组共16份人来源生物检材,倍比稀释。使用微滴式数字PCR技术进行种属检验和绝对定量,验证其灵敏度和稳定性。结果人重组质粒FAM(ND4)可进行人来源样品的检测,其检测结果与各级稀释梯度基本吻合,微滴式数字PCR技术可以检测出反应体系中低至单拷贝的DNA。结论微滴式数字PCR技术可以进行生物样品的种属鉴定和绝对定量,并具有很高的灵敏度和特异性,可应用于日常法医物证检验。

SHP文件数字水印的研究

在全球信息化、数字化的今天,各种各样的数字化产品也应运而生,同时也丰富着人们的生活,在各类产品中,地理信息数据作为国家的基础设施性数据和地理科学研究的重要成果,其重要地位不容小视,因此地理信息数据的安全问题也日益突出出来,数字水印作为信息安全的重要手段,对地理信息数据的安全性起着至关重要的作用,可以防止数据被其他不法分子非法窃取、盗用,以谋取利益或其他用途等。

Wistar大鼠肺功能参考值范围测定

目的建立Wistar大鼠肺功能各项指标的参考值。方法用创体描法小动物肺功能检测仪检测大鼠肺功能各项指标,根据肺功能指标检测结果,通过统计分析,确定其参考值范围。结果 Ri（吸气阻力）为1.81（0.94~4.10）cm H2O/（mL·s）,Re（呼气阻力）为1.83（0.71~3.57）cm H2O/（mL·s）,Cl（肺顺应性）为0.15（0.05~0.29）mL/cm H2O,MVV（最大通气量）为144.65（77.28~256.20）mL/min,FVC（用力肺活量）为8.49（5.82~12.70）mL,Fev0.2（第0.2秒用力呼气容积）为5.72（3.62~7.01）mL,Fev0.2/FVC（第0.2秒用力呼出容积占用力肺活量百分比）为8.12（39.14~85.28）%,FEF（25~75）%（用力中期呼气流速）为34.11（28.25~46.87）mL/min。PEF（用力最大呼气流速）为38.28（30.75~50.25）mL/min。结论 Wistar大鼠肺功能指标的参考值范围可为临床和科研工作以及未来制定国家标准和规范提供参考依据。

多囊卵巢综合征患者控制性超促排卵下体内凝血相关指标的研究

目的观察控制性超促排卵(COH)下多囊卵巢综合征(PC()S)患者血浆同型半胱氨酸(homocysteine,HCY)、凝血因子Ⅷ(FⅧ)、凝血因子X(FX)和D-D二聚体与对照组有何差异,以及这些指标对移植成功率、妊娠结局有无影响。方法选择30例因排卵障碍需体外受精-胚胎移植(IVF-ET)助孕治疗的PCOS患者,同期选择67例因输卵管因素接受IVF治疗的患者为对照组,两组均采用标准长方案促排卵,于完全降调节日、注射人绒毛膜促性腺激素(HCG)日、取卵后第3天(移植日)清晨空腹采集静脉血,检测HCY、D-D二聚体、FⅢ和FX水平。结果两组间体重指数(BMI)、移植胚胎数、移植日内膜厚度、胚胎着床率以及临床妊娠率均无显著性差异,PC()S组平均年龄和正常受精率显著低于对照组(P<0.01),基础睾酮、基础雄烯二酮、LH/FSH比率、直径大于1 4 mm卵泡数、获卵数、优质胚胎数均显著高于对照组(P<0.05)。在完全降调节后,PCOS组除FX显著高于对照组(P<0.01),两组间HCY、FⅧ、D-D二聚体以及激素水平均无显著性差异;HCG日,PCOS组FX和雌二酵(E_2)水平显著高于对照组(P<0.05);移植日,PC()S组FⅧ水平显著低于对照组(P=0.012),FX和E_2水平显著高于对照组(P<o.01)。结论虽然PCOS患者获卵数较多,但其正常受精率仍较低,临床妊娠率也呈降低趋势,在围着床期,相对于正常女而言,PCOS患者体内处于相对高凝状态,间接提示PCOS患者可能存在子宫内膜灌注不良,从而成为影响IVF-ET替床率和临床妊娠率的重要因素。

基于可变形全卷积神经网络的冬小麦自动解译研究

以高分二号遥感影像为研究对象进行冬小麦多元特征的提取,在U-Net模型基础上进行改进,将一种可变形全卷积神经网络(DFCNN)模型引入到遥感影像自动解译领域。为提高网络模型对几何变化特征的提取能力,引入可变形卷积的思想,将可训练的二维偏移量加入到网络中的每个卷积层前,使卷积产生形变,并获得对象级语义信息,从而增强了模型对不同尺寸及空间分布的冬小麦特征的表达。使用DFCNN模型对数据集进行训练及微调,得到最优的网络模型,其像素精度为98.1%,解译时间为0.630 s。采用FCNN模型、U-Net模型及RF算法得到的冬小麦自动解译像素精度分别为89.3%、93.9%、90.0%,说明基于DFCNN模型的冬小麦自动解译精度相对较高,且对复杂的几何变化特征有较好的表达,具有较好的泛化能力。

地理科学专业野外实践教学改革与实践

地理科学专业的野外实践教学既是理论联系实际的关键环节,又是培养学生专业素质和专业技能的重要途径。文中从应用型本科院校地理科学专业实践教学的视角,分析了地理野外实践教学存在的问题,提出以市场和社会需求为先导、以能力培养为中心,改革野外实践教学的课程体系、教学内容、教学模式及评价机制,并将其成果应用于河北师范大学汇华学院,取得了较好的效果。

鲍曼不动杆菌外膜蛋白34的表达纯化及其生物活性分析

通过基因克隆方法制备鲍曼不动杆菌ATCC 19606(Acinetobacter baumannii ATCC 19606)外膜蛋白34(Outer membrance protein 34,Omp34),并分析其生物结构及对HEK293细胞的凋亡作用。采用PCR方法扩增鲍曼不动杆菌ATCC19606Omp34基因,并将其克隆到表达载体p ET28a(+)以构建重组质粒pET28a(+)-Omp34,转化大肠杆菌BL21,IPTG诱导蛋白表达并用镍柱亲和层析纯化蛋白,使用L-精氨酸和还原型谷胱甘肽/氧化型谷胱甘肽(GSH/GSSG)可使Omp34蛋白正确复性,生物信息预测Omp34生物结构,利用圆二色谱(Circular dichroism CD)技术测定Omp34的二级结构,通过流式细胞术和Western blot检测Omp34对HEK293细胞的凋亡作用。成功构建表达载体p ET28a(+)-Omp34,并在原核表达体系中高效表达,通过复性得到可溶蛋白。生物信息预测Omp34为β桶状蛋白,圆二色谱证实Omp34结构为β折叠结构,其中α-螺旋含量为12%、β-折叠为39%、β-转角为22%、无规则卷曲为27%。复性的Omp34可使HEK293细胞发生凋亡。通过分子克隆技术成功获得了鲍曼不动杆菌外膜蛋白34,并解析出其二级结构,证实其可以导致HEK293细胞凋亡,这为将来进一步研究鲍曼不动杆菌外膜蛋白34的生物学功能及其耐药机制奠定了基础。

豚鼠支气管哮喘气道重塑动物模型复制的研究

选择相同或相近的雄性豚鼠30只,随机分为对照组、6周实验组、10周实验组各10只,以腹腔注射10%卵清蛋白和1%卵清蛋白雾化吸入复制哮喘气道重塑动物模型。6周和10周时分别采集相应实验组动物的动脉血液,检测血气指标及钾、钠、钙、镁、磷、氯等。结果表明,6周时模型组钙、磷升高较对照组显著(P<0.05),镁降低较对照组显著(P<0.05);10周时模型组动物出现血氧分压降低趋势。由此可见,支气管哮喘气道重塑动物模型的复制中,离子指标的变化在6周时已明显,而血气指标的变化要在10周后才出现。

PLC梯形图程序的顺序控制设计法

介绍了可编程控制器（ＰＬＣ）梯形图程序的顺序控制设计法，顺序功能图的基本结构及其转换实现的基本规则。在实际工程中，采用起动－保持－停止电路的顺序控制梯形图的设计方法设计的控制程序具有实现方便、容易掌握、可读性强等优点，可用来设计复杂系统的梯形图及用于各种型号的ＰＬＣ。

放射免疫体内应用的发展

放射免疫体内应用的发展安志远综述尹伯元审校自从放射免疫问世以来，一直应用于体外分析。单克隆抗体的出现，逐步替代了放射免疫分析中使用的多克隆抗体，提高了特异性和灵敏度，使传统的ＲＩＡ发展成了ＩＲＭＡ（Ｉｍｍｕｎｏｒａｄｉｏｍｅｔｒｉｃａｓｓａｙ）。由于...

催化重整工艺技术进展分析

为了促进石油石化行业的健康发展,对历年来催化重整行业的技术与发展进程进行分析。主要对国内外重整工艺技术的发展与应用状况进行了分析,同时对国内外重整催化剂的研发进展,以及在重整工业的应用状况进行阐述,为催化重整技术以及重整催化剂的研究方向进行指导。

石家庄市耕地时空变化与生态安全分析

本文遵循科学性、整体性、动态性原则,从耕地数量、质量、生态环境变化机理,选取10个因子构建指标体系,运用人工神经网络模型,对河北省石家庄市各县(市、区)2010-2016年耕地生态安全状况从时间和空间2个角度进行评价。结果表明,石家庄西部山区各县(市、区)耕地生态安全指数减少最多的是井陉县,增加最多的是赞皇县;东部平原区各县(市、区)耕地生态安全指数减少最多的是无极县,增加最多的是高邑县。同时,本文提出石家庄市耕地生态安全保护对策。