木犀草素对对乙酰氨基酚诱导肝损伤的保护作用

【目的】基于内质网应激(ERS)和氧化应激途径,探讨木犀草素(luteolin)对对乙酰氨基酚(APAP)诱导的肝损伤的保护效果及其潜在的作用机制。【方法】将48只昆明小白鼠随机分为6组,分别为正常对照组(NC)、木犀草素对照组(MD)、APAP肝损伤模型组(APAP)以及木犀草素低、中、高剂量组(ML、MM、MH),每组8只小鼠,NC和MD组腹腔注射生理盐水,其余各组小鼠按300 mg/kg的剂量腹腔注射APAP注射液,每天2次,连续注射4 d,给药4 d后NC组和APAP组灌胃生理盐水,MD、ML、MM、MH小鼠分别按照100,25,50,100 mg/kg的剂量灌胃木犀草素药液,每天2次,连续灌胃3 d,最后一次灌胃12 h后,分别检测小鼠血液中的谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)活性以及肝脏中的氧化应激指标(超氧化物歧化酶(SOD)活性及过氧化氢(H 2O 2)、谷胱甘肽(GSH)和丙二醛(MDA)含量),在显微镜下观察各组小鼠肝组织的病理变化,并采用探针药物法测定肝脏微粒体细胞色素P4502E1酶(CYP2E1)活性,采用qRT-PCR检测CYP2E1 mRNA表达水平,用Western Blot检测肝组织葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、增强子CCAAT结合蛋白同源蛋白(CHOP)、CYP2E1蛋白表达水平。【结果】与NC组相比,APAP模型组的ALT和AST活性极显著升高,MD组上述2种酶活性无显著变化。与APAP模型组相比,MM、MH组ALT和AST活性显著或极显著下降。与APAP模型组相比,ML、MM、MH组的GSH含量和SOD活性均明显增加,MDA和H 2O 2含量均明显降低。小鼠肝组织病理形态显微观察结果表明,MM、MH组可以改善APAP导致的肝索消失以及肝细胞排列散乱和细胞核溶解等病理症状。探针药物法测定结果显示,0.1,0.01和0.001 mg/mL的木犀草素可以显著降低CYP2E1活性。qRT-PCR和Western Blot结果显示,木犀草素可以显著或极显著降低CYP2E1基因及其蛋白的表达水平,极显著降低GRP78和CHOP蛋白表达水平。【结论】木犀草素具有明显的抗APAP诱导的肝损伤作用,其作用机理可能是通过抑制CYP2E1的表达、减轻氧化应激和内质网应激水平,从而减轻APAP诱导的肝损伤。

孕马血清促性腺激素对小鼠肝脏组织CYP17A1和PXR表达的影响

旨在了解孕马血清促性腺激素(pregnant mare serum gonadotropin,PMSG)对小鼠肝脏细胞色素P45017A1(cytochrome P45017A1,CYP17A1)和孕烷X受体(pregnane X receptor,PXR)表达的影响。将48只雌性昆明系小鼠随机分为PMSG处理组和对照组,PMSG组小鼠腹腔注射PMSG 10 IU,注射后12、24、48 h处死12只小鼠,采血分离血清并采集肝脏组织样本;对照组腹腔注射等体积生理盐水,在注射后12、24、48 h时采集4只小鼠的血液和肝脏组织样本。酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清PMSG含量,苏木精-伊红染色(HE)观察PMSG对肝脏组织的影响,RT-qPCR和Western blot检测肝脏组织CYP17A1和PXR表达水平,免疫组织化学染色检测CYP17A1和PXR在肝脏组织中的定位。结果显示,PMSG注射后12 h小鼠血清中PMSG含量显著升高(P<0.05),24 h和48 h时逐渐降低,但仍显著高于NC组(P<0.05);PMSG注射后12、24、48 h时,肝脏细胞水泡变性明显;注射PMSG后肝脏组织中CYP17A1和PXR基因和蛋白表达均显著下调(P<0.05);CYP17A1和PXR主要定位于肝索肝实质细胞质中。研究结果证明,PMSG能够显著抑制肝脏CYP17A1和PXR表达。

青蒿素对实验性糖尿病大鼠肾脏PDGF-B表达上调的影响

目的探讨青蒿素对实验性糖尿病大鼠肾脏血小板衍化生长因子-B(PDGF-B)表达上调的抑制作用。方法将36只雄性SD大鼠随机分为正常对照组(A组)、糖尿病非治疗组(B组)及糖尿病青蒿素治疗组(C组),B、C组采用腹腔单剂量注射链脲佐菌素(STZ)65 mg/kg建立糖尿病大鼠模型。C组给予青蒿素300 g/(kg·d)腹腔注射。于实验第3周、第6周各组分别宰杀6只大鼠,采用免疫组织化学染色法检测肾皮质PDGF-B的蛋白表达。并检测肌酐清除率(Ccr)、24 h尿白蛋白排泄率(UAER)及肾质量/体质量。肾组织制备电子显微镜切片以观察肾组织超微结构改变。结果 C组大鼠肾质量/体质量、Ccr、UAER均显著低于B组(P<0.05或0.01)。免疫组化染色发现B组大鼠肾组织PDGF-B表达显著上调(P<0.01),C组表达明显下调(P<0.01)。电镜示B组大鼠肾脏病变广泛,肾小球系膜细胞增生,系膜区增宽,基底膜增厚,脏层细胞肥大。C组大鼠肾脏超微结构异常显著减轻。结论青蒿素能减轻糖尿病大鼠肾脏病变,主要通过下调糖尿病大鼠肾组织PDGF-B表达来实现。

基于网络药理学研究连翘叶提取物通过AMPK抗恩诺沙星诱导肝损伤的作用

【目的】运用网络药理学并通过体内试验研究连翘叶提取物(Forsythia suspense leaves extract,FSLE)治疗恩诺沙星(enrofloxacin,ENR)诱导的肝损伤(enrofloxacin induced liver injury,EILI)的作用机制。【方法】采用乙醇-酶法提取连翘叶有效成分,通过液相-质谱法(LC-MS)鉴定FSLE主要的化学成分。利用PubChem、Swiss ADME和Swiss Target Prediction数据库分析预测FSLE有效活性成分及作用靶点,通过GeneCards疾病数据库搜索EILI的作用靶点。运用STRING在线网站及Cytoscape 3.8.0软件构建FSLE治疗EILI的核心靶点,借助Metascape网站进行GO功能及KEGG通路富集分析,并用Cytoscape 3.8.0软件绘制“成分-靶点-信号通路”可视化网络。通过体内试验验证FSLE抗EILI的药理作用,采用实时荧光定量PCR和Western blotting检测不同处理组腺苷酸激活蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)的表达,通过商业化试剂盒检测还原型谷胱甘肽(glutathione,GSH)、过氧化氢(hydrogen peroxide,H_(2)O_(2))和丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量及总超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)的活性。【结果】结合LC-MS与各数据库分析得出FSLE活性成分有20种,对应靶点338个;EILI疾病靶点913个;药物-疾病交集靶点124个,包含FSLE治疗EILI核心靶点12个,KEGG通路20条,其中AMPK通路与FSLE治疗EILI密切相关。动物试验结果显示,FSLE可显著降低EILI小鼠血清中谷丙转氨酶(alanine transferase,ALT)和谷草转氨酶(aspartate transferase,AST)活力(P<0.05)。FSLE可显著升高小鼠肝脏AMPK的基因和蛋白表达量水平(P<0.05)。与正常对照组相比,FSLE可显著降低小鼠肝脏组织中MDA和H_(2)O_(2)含量(P<0.05),显著升高GSH含量和SOD活力(P<0.05),抑制EILI诱导的肝脏氧化应激。【结论】FSLE可通过上调AMPK的表达抑制肝脏氧化应激发挥抗EILI的作用,对肝损伤药物的开发具有重要的意义。

青蒿素对糖尿病大鼠肾组织NF-κB的DNA结合活性升高的抑制作用

目的探讨青蒿素对实验性糖尿病大鼠肾组织核因子-κB(NF-κB)的DNA结合活性升高的抑制作用。方法选择雄性SD大鼠15只,随机分成正常对照组(A组)、糖尿病组(B组)及青蒿素治疗组(C组),采用腹腔单剂量注射链脲佐菌素(STZ)65 mg/kg方法建立糖尿病大鼠模型。C组给予青蒿素300 mg/(kg·d)腹腔注射。于实验第4周应用电泳迁移率改变分析(EMSA)法检测3组大鼠肾皮质细胞NF-κB的DNA结合活性,并观察实验大鼠肾脏的病理学变化。结果 B组大鼠肾细胞NF-κB的DNA结合活性显著上调;C组NF-κB的DNA结合活性显著较B组下降,肾脏组织的病理学损伤亦减轻。结论青蒿素可明显改善糖尿病大鼠肾脏组织病理学改变,通过抑制糖尿病大鼠肾脏组织细胞NF-κB的DNA结合活性上调可能是相关作用机制之一。

青蒿素对糖尿病大鼠肾组织c-jun及c-fos基因表达上调的抑制作用

目的探讨青蒿素对糖尿病大鼠肾组织c-jun及c-fos基因表达上调的抑制作用。方法 15只大鼠分成正常对照组(A组)、糖尿病非治疗组(B组)及糖尿病青蒿素治疗组(C组),B组、C组应用腹腔单剂量注射链脲佐菌素(STZ)65 mg/kg制备糖尿病大鼠实验模型,C组大鼠给予青蒿素300 mg/(kg·d)腹腔注射。在实验进行到第4周时每组处死大鼠,留取右侧肾脏部分皮质,采用免疫组化及RT-PCR方法分别检测大鼠肾细胞c-jun mRNA、c-fos mRNA及其蛋白表达情况,并观察肾组织细胞的病理改变。结果 B组大鼠肾细胞c-jun mRNA、c-fos mRNA及其蛋白表达显著增加;C组上述指标表达水平分别对2组患者,大鼠肾脏组织病理学改变明显改善。结论青蒿素可通过抑制糖尿病大鼠肾组织细胞c-jun及c-fos基因表达上调而缓解糖尿病大鼠肾脏功能损伤及病理学改变。

青蒿素对实验性糖尿病大鼠肾脏蛋白激酶C移位活化的抑制作用

目的探讨青蒿素对实验性糖尿病大鼠肾脏蛋白激酶C(PKC)由细胞浆到细胞膜移位活化的抑制作用。方法将实验大鼠随机分为对照组(A组)、糖尿病非治疗组(B组)及糖尿病青蒿素治疗组(C组),B组、C组采用腹腔单剂量注射链脲佐菌素(STZ)65 mg/kg的方法建立糖尿病大鼠模型,造模后C组采用青蒿素300 mg/(kg·d)腹腔注射。于实验进行到第3周、第6周时分别宰杀大鼠6只,测算肌酐清除率(Ccr)、24 h尿白蛋白排泄率(UAER)及肾脏系数(肾脏质量/体质量);采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定PKC的活性。结果 B组大鼠Ccr、UAER、肾脏细胞膜PKC活性及肾脏系数均较A组明显升高(P<0.05或0.01);C组大鼠上述指标均较B组明显下降(P<0.05或0.01)。结论青蒿素通过抑制糖尿病大鼠肾脏细胞PKC移位活化而对糖尿病大鼠早期肾脏病变起到保护作用。

青蒿素对糖尿病大鼠肾组织AP-1的DNA结合活性升高的抑制作用

目的探讨青蒿素对实验糖尿病大鼠肾组织转录因子活化蛋白-1(AP-1)的DNA结合活性升高的抑制作用。方法将75只实验大鼠分成正常对照组(A组)、糖尿病非治疗组(B组)及青蒿素治疗组(C组),B、C组应用腹腔单剂量注射链脲佐菌素(STZ)65 mg/kg建立糖尿病大鼠模型。C组给予腹腔注射青蒿素300 mg/(kg·d)。于实验进行到第4周时处死各组大鼠,取部分右肾皮质,应用电泳迁移率改变分析(EMSA)法观察青蒿素对实验糖尿病大鼠肾组织AP-1的DNA结合活性的影响,并制备病理切片以观察肾组织的病理学变化。结果 B组大鼠肾细胞AP-1的DNA结合活性较A组显著上升,C组大鼠对肾细胞AP-1的DNA结合活性有显著抑制作用,并显著改善糖尿病大鼠肾脏组织的病理变化。结论青蒿素通过下调糖尿病大鼠肾组织AP-1的DNA结合活性上调而改善糖尿病大鼠肾脏组织病理改变。

青蒿素对糖尿病大鼠肾脏保护作用机制研究

目的探讨青蒿素对糖尿病大鼠肾基质金属蛋白酶-2(MMP-2)及其抑制物金属蛋白酶-2组织抑制物(TIMP-2)表达的调节作用。方法将大鼠随机分为对照组(A组)、糖尿病非治疗组(B组)及糖尿病青蒿素治疗组(C组),采用腹腔单剂量注射链脲佐菌素(STZ)65 mg/kg方法以建立糖尿病大鼠模型。C组给予青蒿素300 g/(kg·d)腹腔注射。实验进行到第3周、第6周时3组分别宰杀大鼠6只,检测肾质量/体质量、24 h尿白蛋白排泄率(UAER)及肌酐清除率(Ccr)。用免疫组化染色方法分别检测肾小球Ⅳ型胶原、TIMP-2、MMP-2和纤维连接蛋白(FN)表达情况。结果 C组大鼠Ccr、UAER、肾质量/体质量均显著低于B组(P<0.05或0.01)。免疫组化染色证明糖尿病大鼠肾小球Ⅳ型胶原、FN和TIMP-2表达都明显上调(P<0.05或0.01),C组上述指标的表达都被显著抑制(P<0.05)。MMP-2在B组大鼠肾小球的表达显著下调(P<0.01),C组其表达显著上调(P<0.05)。结论青蒿素通过抑制糖尿病大鼠肾小球TIMP-2表达及增加MMP-2表达,从而保护糖尿病实验大鼠肾脏功能。

茶树油对三种常见致病菌的体外抑菌活性研究

为了确定茶树油的体外抑菌敏感度和最低体外抑菌浓度,本试验抑菌剂选择茶树油,供试菌选择沙门氏菌、大肠杆菌和金黄色葡萄球菌,进行体外抑菌试验,并测定茶树油原液的抑菌圈以及不同稀释度的茶树油和1.5×10^(8)cfu/ml菌悬液混合培养后在600 nm波长处的光密度值。试验结果表明,茶树油在3种细菌中对金黄色葡萄球菌最为敏感,对沙门氏菌和大肠杆菌次之,对3种菌的抑制培养最大突变区间分别为金黄色葡萄球菌2^(-3)×10^(-1)~2^(-2)×10^(-1)、沙门氏菌2^(-4)×10^(-1)~2^(-3)×10^(-1)和大肠杆菌2^(-7)×10^(-1)~2^(-6)×10^(-1)。

家庭环境对高血压合并高血脂症降压调脂患者心理健康的影响

目的探讨家庭环境对苯磺酸氨氯地平联合辛伐他汀治疗高血压合并高血脂症患者心理健康的影响。方法选择医院2013年至2014年应用苯磺酸氨氯地平联合辛伐他汀治疗的高血压合并高血脂症患者100例,根据症状自评量表(SCL-90)将所有患者按心理健康状况分为不健康组和健康组,比较不同心理健康高血压合并高血脂症患者家庭环境量表(FES-CV)评分及家庭环境,并分析高血压合并高血脂症患者心理健康与家庭环境的相关性。结果不健康组患者亲密度、情感表达、独立性、成功性、娱乐性得分均明显低于健康组(P<0.05);不健康组患者平均月收入、受教育年限明显低于健康组(P<0.05),但丧偶患者百分比明显高于健康组(P<0.05)。躯体化、恐怖与独立性呈正相关;社交敏感、抑郁、焦虑与丧偶呈正相关;社交敏感、焦虑、精神病性、敌对、躯体化、恐怖与亲密度、情感表达等因素呈负相关(P<0.05)。结论家庭环境中存在多种因素影响苯磺酸氨氯地平联合辛伐他汀治疗高血压合并高血脂症患者的心理健康,通过积极改善相关因素,可使患者保持良好的心理状态,促进其病情治愈与恢复。

连翘叶酶-醇提取物抗药物性肝损伤作用研究

【目的】研究连翘叶酶-醇提取物(FLEAE)抗药物性肝损伤(DILI)的作用及其机制。【方法】将48只昆明小鼠随机分为6组,每组8只,分别为正常对照组(NC)、FLEAE对照组(FC)、DILI模型组(DILI)及FLEAE高、中、低剂量治疗组(HFC、MFC、LFC),其中NC组和FC组小鼠腹腔注射生理盐水,其余各组小鼠腹腔注射300 mg/kg APAP注射液,每天2次,连续注射4 d,第5天开始NC组和DILI组小鼠灌胃生理盐水,FC、HFC、MFC和LFC组小鼠分别灌胃FLEAE 600,600,400和200 mg/kg,每天2次,连续灌胃3 d。最后1次灌胃12 h后,检测各组小鼠谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)水平及氧化应激指标谷胱甘肽(GSH)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢(H_(2)O_(2))和丙二醛(MDA)水平,肝组织切片苏木精伊红(HE)染色观察肝损伤情况。用网络药理学方法构建FLEAE调控DILI的靶点集,GO和KEGG分析靶点的基因功能及通路,筛选FLEAE抗DILI的核心靶点。qRT-PCR和Western Blot检测核心靶点PIK3CA及其下游凋亡抑制分子B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)基因和蛋白的表达水平。【结果】FLEAE可显著降低DILI组小鼠血液中的ALT和AST水平,改善药物性肝损伤。FLEAE可显著降低DILI小鼠的GSH和SOD水平,提高H_(2)O_(2)和MDA水平。网络药理学分析表明,FLEAE抗DILI靶点与凋亡过程的负调控、氧化应激等有关,主要富集于PI3K/Akt信号通路,可能通过PIK3CA发挥作用;qRT-PCR和Western Blot结果显示,FLEAE可能通过提高PIK3CA基因和蛋白的表达发挥抗DILI及抑制细胞凋亡的作用。【结论】FLEAE通过上调DILI中PIK3CA的表达抑制细胞凋亡和改善氧化应激,发挥抗DILI的作用。

连翘提取物对对乙酰氨基酚诱导小鼠肝损伤的保护作用

试验旨在探究连翘提取物(FSE)预防性干预对对乙酰氨基酚(acetaminophen,APAP)诱导小鼠肝损伤的保护作用及其潜在作用机制。采用半仿生-生物酶法提取连翘有效成分,使用APAP构建小鼠肝损伤模型。随机将60只雌性昆明小鼠分入正常对照(NC)组、APAP肝损伤模型(LD)组、连翘提取物(FSE)对照组、连翘提取物高剂量(HFSE+LD)组、连翘提取物中剂量(MFSE+LD)组和连翘提取物低剂量(LFSE+LD)组,每组10只。HFSE+LD组、MFSE+LD组、LFSE+LD组分别按每天200、100、50μg/g灌胃给予连翘提取物,NC组和LD组分别灌胃等量生理盐水,每天2次,连续给药6 d。预防性给药3 d后,腹腔注射APAP,每天1次。末次给药12 h后,试验小鼠眼球采血并快速取出肝脏,检测血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天门冬氨酸氨基转移酶(AST)活性,以评价肝损伤程度;检测肝脏匀浆液中还原型谷胱甘肽(GSH)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和过氧化氢(H2O2)水平,以评价肝脏氧化应激程度;制作肝脏病理切片,经苏木精伊红(HE)染色后观察肝脏病理变化;采用探针药物法测定肝脏线粒体细胞色素P4502E1(CYP2E1)活性;采用实时荧光定量PCR检测肝脏线粒体CYP2E1 mRNA表达水平;采用Western blotting法检测肝脏CYP2E1蛋白表达情况。结果表明:与NC组相比,LD组小鼠血清中ALT、AST活性均显著增加(P<0.05);肝脏SOD活性、GSH含量均显著降低(P<0.05),MDA、H2O2含量,CYP2E1 mRNA及蛋白表达水平均显著升高(P<0.05),成功构建小鼠肝损伤模型。200、100和50μg/g的连翘提取物可显著降低肝损伤小鼠血清ALT和AST活性(P<0.05),显著提高肝脏中SOD活性(P<0.05);200、100μg/g连翘提取物可显著提高肝脏中GSH水平(P<0.05),显著降低肝脏中MDA、H2O2水平及CYP2E1的mRNA和蛋白表达量(P<0.05)。以上结果表明,连翘提取物可减轻APAP诱导的小鼠肝损伤程度且呈剂量依赖性,其潜在作用机制可能与所含活性物质的抗氧化作用以及对CYP2E1酶活性和表达的抑制有关。

张家口坝上杨树防护林退化原因分析

文章介绍了张家口坝上地区杨树防护林的基本情况和杨树防护林的退化情况,对杨树退化死亡原因进行了分析,得出林木生理老化是主要原因,干旱、密度大、后期管护、造林方式或断根苗木使用也对森林退化有一定促进作用,其中可控因素密度、后期管护、苗木选择等原因的提出对于今后改进坝上防护林设计、营造和经营具有一定的指导意义,可以提高坝上防护林的营造经营水平,提高防护林的生态效益体现。

林业育苗技术及苗期管理研究

林业作为实现我国环境保护和可持续发展的重要产业,近年来受到了极大关注。同时随着科学技术的不断发展,我国现阶段在对林木进行培育过程中已经实现了较大水平的提高,但是不可否认的是依然存在一些问题有待解决。就林业育苗技术以及苗期管理相关问题进行了研究。

浅谈中国传统文化中蒙学教育所体现的德育理念

中国传统文化在历史发展过程中,包含了思想观念、思维方式、价值取向、道德情操、文学艺术等诸多层面的丰富内容。蒙学作为传统文化的一个重要组成部分,充分体现了传统文化中对于良好道德情操、积极思想观念的教化启发作用。中国自古至今都视教育为民族生存的命脉,在"发展教育,优先德育"的教育发展理念中,蒙学教育对当代社会德育的借鉴和发展,提供了丰富的知识理论来源。本文通过对传统文化中蒙学教育所体现的道德情操的教育思想,在传统文化发展中去伪存真,阐述了蒙学教育中优秀的德育理念及其在当代社会的作用。

林业管理与虫害防治技术探究

随着人们对生态平衡的关注度不断提高,林业的发展成为一项重要的工作任务,通过虫害防治来提高林业管理的质量和效率,对人与自然的可持续发展具有重要意义,是现代化进程中必不可少的一项内容。

孤立性远端深静脉血栓的诊治现状

孤立性远端深静脉血栓(IDDVT)是一种常见的临床疾病,目前对该病的认识取得了一定的进展,但也存在不少争议。本文首先介绍了IDDVT在不同研究中观察到的颇具异质性的发病率,回顾了有关该病自然病程的研究,发现IDDVT仍然具有较低的进展为近端深静脉血栓(PDVT)和肺栓塞(PE)的风险。对比多种诊断方法后认为,血管加压超声(CUS)检查是IDDVT的最佳诊断方式,且对疑似IDDVT患者可选择动态近端CUS检查或全腿CUS检查,可有效监测IDDVT进展情况并指导临床治疗。综合IDDVT的治疗研究和国内外临床指南,目前建议对于高风险IDDVT患者,采用与PDVT/PE相同的抗凝治疗方案;而对于低风险IDDVT患者,则采用动态CUS检查。