发酵莲花花瓣美白功效提升及作用机制研究

随着现代生物工程技术快速发展,利用发酵技术提高草药提取物在食品和化妆品添加剂领域的生物活性已成为新趋势。在本研究中,以蘑菇酪氨酸酶活性和黑色素形成为评价指标,对5种益生菌的莲花提取物(LPE)发酵产物进行活性筛选。结果显示植物乳杆菌CGMCC 1.124发酵产物(FLPE)具有酪氨酸酶抑制活力;在A-MSH诱导的小鼠黑色素瘤细胞(B16F10)美白模型中,经50μg/mL FLPE处理的B16F10黑色素含量为模型对照组的86%±4.6%。为进一步阐明FLPE主要活性成分,利用HPLC,NMR和LC-MS对莲花提取物发酵前后产物中的主要黄酮类化合物进行定性定量分析。结构分析和生物活性评价结果表明,山奈酚-3-O-β-D-葡萄糖苷(49.8%,94.22 mg/g)和槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖醛酸(13.6%)生物转化为两个生物活性苷元-槲皮素(14.4%,26.43 mg/g)和山奈酚(60.9%,70.76 mg/g)。在这些单体中,槲皮素通过调节酪氨酸酶活性、黑素发生相关酶(TYR,TRP-1和TRP-2)和小眼畸形相关转录调控因子(MITF)的表达抑制黑素形成。总体而言,利用植物乳杆菌CGMCC 1.124发酵提高了莲花提取物美白功效,转化生成的槲皮素是植物乳杆菌发酵产物抑制黑色素合成的物质基础之一。

鹧鸪花果实trichilin-type柠檬苦素化学成分研究

通过常压硅胶、凝胶、反相柱色谱和高压反相柱色谱等色谱技术对楝科植物鹧鸪花果实的化学成分进行研究,从鹧鸪花(Trichilia connaroides)果实乙醇提取物中分离获得4个trichilin-type柠檬苦素,包括2个新化合物和2个已知化合物3α-deacetylamoorastatin (3)和mesendanins K (4)。通过综合运用HR-ESI-MS、1H NMR、13C NMR、HSQC、HMBC和ROESY等多种光谱分析方法确定了新化合物1、2的平面结构和相对构型。通过对分离获得的化合物进行肿瘤细胞毒活性研究,结果表明新化合物1、2和已知化合物4对宫颈癌细胞(HeLa)具有微弱的细胞毒活性。

1株蓝藻来源真菌Aspergillus sp.的次生代谢产物研究

目的对1株采自中国三亚蓝藻(Lyngbyamajuscula)来源的真菌Aspergillus sp.的次生代谢产物的分离纯化、结构鉴定及其生物活性评价进行研究。方法利用硅胶色谱、HPLC等色谱学分离方法对真菌As-pergillus sp.的次生代谢产物进行分离纯化,结合NMR、MS等波谱学方法对分离得到的化合物进行结构鉴定;并采用CCK8法,用人肺癌细胞株A549和人乳腺癌细胞株MCF7评价了这6个化合物的细胞毒活性。结果从真菌Aspergillus sp.的代谢产物中分离得到6个化合物:methyl asterric acid(1),methyl 3-chloroaste-rric acid(2),methyl 3,5-dichloroasterric acid(3),dihydrogeodin(4),benzomalvinB(5)和benzomalvinE(6)。结论化合物5和6为首次从Aspergillus属真菌中获得,化合物1～6在40μmol/L浓度下没有显著的细胞毒活性。

一株海洋来源真菌Aspergillus flavipes次生代谢产物研究

目的:探究海洋来源真菌Aspergillus flavipes次生代谢产物的化学成分。方法:综合运用硅胶色谱、凝胶色谱(sephadex LH-20)、ODS柱色谱(octadecyl silan)、半制备型高效液相色谱(high performance liquid chromatography,HPLC)等分离技术对该菌株的大米发酵产物进行分离纯化;通过核磁共振氢谱(1H nuclear magnetic resonance,1H NMR)、核磁共振碳谱(13C nuclear magnetic resonance,13C NMR)、电喷雾电离质谱(electrospray ionization-mass spectrum,ESI-MS)和X-ray单晶衍射等方法鉴定了6个化合物的化学结构;并采用cell counting Kit-8(CCK-8)法,用宫颈癌细胞株HELA、人肺癌细胞株PC9和黑色素瘤细胞株A375评价了化合物的细胞毒活性。结果:从Aspergillus flavipes中分离得到6个化合物:Cyclo(glycyl-L-tryptophyl-Lprolylglycyl-L-valylglycyl-β-hydroxy-L-tyrosyl)(1),aspersymmetide A (2),geodin hydrate (3),methyl chloroasterrate (4),2,4-dichloroasterric acid (5)以及questin (6)。结论:其中首次从黄炳曲霉属Aspergillus flavipes中分离得到具有中心对称结构的环肽类化合物(2),并首次通过X-ray单晶衍射实验确定化合物2的平面结构和绝对构型。细胞毒活性显示化合物1~6在20μmol·L-1浓度下对宫颈癌细胞株HELA、人肺癌细胞株PC9和黑色素瘤细胞株A375无明显细胞毒活性,化合物2对顺铂耐药胃癌细胞株SGC7901有细胞毒活性,其半抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC50)为15. 31μmol·L-1。