NGAL对大鼠肾脏缺血再灌注损伤作用机制的体内研究

目的:观察中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(neutrophil gelatisase-associated lipocalin,NGAL)对大鼠缺血再灌注肾损伤(I/R)的作用机制。方法:通过切除一侧肾脏,夹闭对侧肾蒂45min的方法来建立大鼠I/R模型。雄性SD大鼠随机分为对照组、I/R组、缺血再灌注给药组(NGAL组),对照组、I/R组、NGAL组实验结束时分别用HE染色观察3组动物肾组织病理变化;再灌注24h后测血肌酐(Scr)和尿素氮(Bun),TUNEL观察肾小管上皮细胞凋亡情况,免疫组化检测Bax与激活的天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3(cleaved caspase-3,CC3)的表达;Western Blot技术检测凋亡蛋白Fas、Bcl-2表达的变化。结果:与I/R组比较,NGAL组Scr、Bun分别为(63.400±11.908vs121.857±17.151)μmol/L、(14.840±2.868vs28.557±6.434)mmol/L,肾小管上皮细胞凋亡数量减少(7.800±1.924vs15.400±3.049);NGAL组肾组织Fas mRNA(2.34±0.51vs6.84±2.34)表达降低、Bax蛋白[(7.440±1.640)%vs(15.456±1.955)%]表达降低、CC3蛋白[(3.171±0.321)%vs(7.291±1.059)%]表达降低、Bcl-2蛋白(6.91±1.64vs5.30±1.48)表达升高(P<0.05)。结论:NGAL对大鼠I/R的肾小管上皮细胞有保护作用,其作用与减少细胞凋亡、改变凋亡蛋白的表达,从而减轻组织损伤,发挥肾脏保护作用有关。

中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白对大鼠肾脏缺血再灌注损伤的保护作用及机制

目的观察中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)对大鼠缺血再灌注肾损伤的保护作用及机制。方法通过切除一侧肾脏,夹闭对侧肾蒂45min建立大鼠缺血再灌注损伤模型,将30只成年雄性Sprague-Dawley大鼠随机分为假手术组、缺血再灌注组和缺血再灌注给药组,每组10只。将50μg重组大鼠NGAL溶于2mL灭菌蒸馏水中,分别于缺血前30min、缺血中、缺血后30和60min经缺血再灌注给药组大鼠尾静脉注射0.5mL,假手术组及缺血再灌注组于相同时间点给予相同剂量的0.9%氯化钠注射液。取再灌注24h后大鼠的下腔静脉血检测血清肌酐(sCr)和血尿素氮(BUN)水平;采用苏木精-伊红(H-E)染色观察肾脏的形态学变化;免疫组织化学染色检测B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白(Bax)及活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)的表达;末端转移酶标记技术(TUNEL)染色观察肾小管上皮细胞的凋亡情况。结果再灌注24h后,缺血再灌注组的sCr和BUN水平显著高于假手术组及缺血再灌注给药组(P值均<0.05)。光学显微镜下见缺血再灌注给药组的肾脏损伤情况较缺血再灌注组显著减轻。假手术组Bax和Caspase-3的蛋白阳性表达率分别为(3.72±0.48)%、(0.61±0.15)%,缺血再灌注给药组分别为(7.44±1.64)%、(3.17±0.32)%,均显著低于缺血再灌注组的(15.46±1.96)%、(7.29±1.06)%(P值均<0.05)。TUNEL染色见假手术组及缺血再灌注给药组的凋亡细胞数分别为(1.80±0.84)及(7.80±1.92)个/高倍视野,均显著少于缺血再灌注组的(15.40±3.05)个/高倍视野(P值均<0.05)。结论给予外源性NGAL可抑制Caspase-3激活,减少Bax表达,减轻组织损伤,从而发挥肾脏保护作用,为急性肾损伤的治疗提供新的靶点。

结直肠癌中SIRT5的表达与^(18)F-FDG PET/CT标准化摄取值的关系及机制研究

目的:检测结肠癌中沉默调节蛋白5(Sirtuin 5,SIRT5)表达情况并探讨其与18氟-脱氧葡萄糖(;F-fluorodeoxyglucose,^(18)F-FDG)最大标准化摄取值(the maximum standardized uptake value,SUVmax)、葡萄糖转运蛋白1(glucose trans porter-1,GLUT1)表达以及患者临床参数的关系。方法:回顾性分析78例术前行;F-FDG正电子发射型计算机断层扫描(positron emission tomography/computed tomography,PET/CT)的结直肠癌患者,免疫组化分析SIRT5、GLUT1蛋白表达,与SUVmax、临床参数、预后指标做相关分析。使用CRISPR/Cas9技术敲除SIRT5,研究其对结直肠癌细胞糖酵解以及缺氧诱导因子1α(hypoxia-inducible factor 1-alpha,HIF1α)转录活性的影响。结果:结直肠癌肿瘤组织中SIRT5较癌旁组织高表达(P <0.01),且高表达者预后欠佳(P <0.01)。结直肠癌低分化者SUVmax和SIRT5表达明显高于中高分化者(18.18±4.06 vs. 12.72±2.60,P <0.01;2.14±0.74 vs. 1.10±0.77,P <0.01)。结直肠癌患者SIRT5表达与SUVmax呈正相关(Spearman相关系数=0.648,P <0.05)。敲除SIRT5基因,抑制肿瘤细胞^(18)F-FDG摄取、GLUT1表达和HIF1α转录活性。结论:SIRT5可通过HIF1α/GLUT1促进结直肠癌^(18)F-FDG的摄取,SIRT5可能是结肠癌治疗的潜在靶点。

劳动教育与高中思想政治课程融合的意义探究

劳动教育与高中思想政治两者有其历史渊源,劳动教育是高中思想政治教学内容和价值观引导的重要组成部分,高中思想政治课程是传递劳动精神的重要途径之一。所以高中思想政治课程与劳动教育相结合,可以从思想政治课程发展意义:促进学科协同发展、提高课堂教学效率、发扬传统美德,及学生成长意义:培养高中生劳动素养、高中生实现知行合一的途径和符合时代发展的新需求等进行探究。即在教学中通过德育与劳育并举发展,帮助高中生树立劳动光荣、自觉劳动的价值取向。

放射性核素标记的凋亡显像剂的研究进展

细胞凋亡存在于多种病理过程中，包括神经系统变性疾病、缺血性损伤、自身免疫性疾病和多种肿瘤等。凋亡检测的可视化对疾病的诊断、新的治疗方法的开发与疗效评价具有重要意义。传统的凋亡检测方法包括光学显微镜观察、原位末端标记法分析、流式细胞仪检测等，但其侵入性方式限制了之后的随访研究。而活体内凋亡显像有助于无创观察、直观了解凋亡发生的体内过程。PET与SPECT的发展，以及新的针对靶点的放射性核素标记显像剂的合成，使核医学进入了分子影像学的新时代。近年来，细胞凋亡PET与SPECT显像剂的研发应用，使活体内无创PET与SPECT检测细胞凋亡成为现实。笔者主要介绍用于在体凋亡显像的放射性标记探针及其最新研究应用进展。

^(18)F-FDG PET/CT对皮肌炎抗MDA5抗体及预后的预测价值

目的:分析抗黑色素瘤分化相关基因5(MDA5)抗体阳性皮肌炎患者的肌肉FDG代谢、肿瘤发生率以及肺间质性改变在^(18)F-FDG PET/CT的影像特征及其鉴别抗MDA5抗体阳性皮肌炎的价值。 方法:回顾性分析2016年6月至2019年7月在上海交通大学医学院附属仁济医院接受^(18)F-FDG PET/CT检查的75例(34例抗MDA5抗体阳性,41例抗MDA5抗体阴性)皮肌炎患者[男21例、女54例,年龄(52.3±14.3)岁]和30名健康对照者[男10名、女20名,年龄(53.5±11.8)岁]的影像和临床资料,测定并计算肌肉SUV max及肌肉SUV max平均值(mSUV max);统计皮肌炎患者合并肿瘤性病变的情况;测定皮肌炎合并间质性肺炎患者肺炎病灶的SUV max。采用两独立样本 t检验、单因素方差分析、SNK检验和 χ^(2)检验分析数据;行ROC曲线分析肌肉mSUV max鉴别抗MDA5抗体阳性皮肌炎的诊断效能。 结果:健康对照者、抗MDA5抗体阳性和抗MDA5抗体阴性皮肌炎患者的肌肉mSUV max分别为0.39±0.05、0.66±0.21和0.87±0.29( F=39.93, P<0.001);皮肌炎患者的肌肉mSUV max均高于健康对照者( q值:6.76、12.63,均 P<0.001);抗MDA5抗体阴性患者高于抗MDA5抗体阳性患者( q=5.79, P<0.001)。ROC AUC为0.74,当肌肉mSUV max取最佳阈值0.75时,在皮肌炎中鉴别出抗MDA5抗体阳性的准确性为74.7%(56/75)。抗MDA5抗体阴性患者中,恶性肿瘤6例(14.6%,6/41);抗MDA5抗体阳性患者中,无恶性肿瘤病例(0/34;χ^(2)=5.41, P=0.020)。抗MDA5抗体阴性伴发间质性肺炎11例(26.8%, 11/41),抗MDA5抗体阳性伴发间质性肺炎33例(97.1%, 33/34;χ^(2)=37.81, P<0.001);抗MDA5抗体阳性患者肺炎FDG代谢高于抗MDA5抗体阴性患者(SUV max:3.65±1.83和2.38±1.27;t=2.13, P=0.039)。 结论:抗MDA5抗体阳性皮肌炎患者的肌肉FDG代谢高于健康对照者,但低于抗MDA5抗体阴性患者。抗MDA5抗体阳性患者肿瘤性病变发生率低于抗MDA5抗体阴性患者。抗MDA5抗体阳性患者发生间质性肺炎的比例和严重程度均高于阴性患者。^(18)F-FDG PET/CT对于鉴别抗MDA5抗体阳性皮肌炎具有一定价值。