人前脑啡肽原基因修饰的永生化大鼠星形胶质细胞株的构建

目的构建人前脑啡肽原(hPPE)基因修饰的永生化大鼠星形胶质细胞株。方法采用DNA重组技术将质粒pCMVhPPE.SEQ中的人前脑啡肽原基因克隆至真核表达载体pcDNA3.1(+)上,经酶切鉴定和测序分析后,采用脂质体介导法将重组质粒pcDNA3.1(+)hPPE和空质粒pcDNA3.1(+)分别转染永生化大鼠星形胶质细胞株(IAST)。经G418(600μg/ml)筛选,挑选阳性克隆并扩大培养。采用免疫细胞化学法、RTPCR和放射免疫法检测转染细胞亮氨酸脑啡肽(LEK)的表达及分泌,同时检测Neo基因的存在以证实转染成功。结果重组质粒经酶切后分别出现5.4kb和950bb片段,测序分析与文献报道结果一致,表明重组质粒pcDNA3.1(+)hPPE亚克隆成功。Neo基因检测显示重组质粒和空质粒已成功转染至IAST中,筛选获得IAST/hPPE和IAST/Neo两个细胞株,LEK免疫染色均阳性,但平均光密度结果显示IAST/hPPE的LEK表达明显强于IAST/Neo和IAST(P<0.01)。IAST/hPPE细胞与IAST/Neo和IAST细胞相比,hPPEmRNA表达水平和培养上清液中LEK的分泌量明显增高(P<0.01),而IAST与IAST/Neo细胞相比无显著性差异(P>0.05)。结论成功构建了人前脑啡肽原基因修饰的永生化大鼠星形胶质细胞株(IAST/hPPE),为该细胞移植用于镇痛的研究奠定了基础。

浅谈医疗服务价格调整的机遇与挑战

通过分析医疗服务价格政策调整变迁的历史原因、制定过程、目前医疗服务价格及价格管理存在的主要问题,提出《全国医疗服务价格项目规范(2012版)》给价格调整带来的机遇与挑战。

对重庆市医疗服务价格改革的体会

2015年3月25日重庆市推出《重庆市医疗服务项目价格（2014年版）》（以下简称《2014年版》）,但短短七日就＂闪电＂收场,并成为全国关注的焦点。笔者有幸参与《2014年版》从制定到出台的全过程,就此谈一些自己的看法。一、背景及形成过程重庆市医改是在国家有关精神和原则指导下进行的,同时依据重庆市政府《完善医疗服务体系改革实施方案》和《深化区县公立医院综合改革方案》开展的工作。

浅谈“药品零加成”后医疗服务项目的合理定价

改革药品加成政策、实行药品零差率销售是各方较为关注的新＂医改＂政策之一。从分析当前医院医疗收入构成情况看,取消药品加成,客观上要求财政补助和医疗服务价格政策作相应调整,以维持医院正常运转。

丙泊酚对体外循环中致炎细胞因子IL-8及呼吸指数影响的临床研究

目的 观察丙泊酚对体外循环 (CPB)中致炎细胞因子白细胞介素 8(IL 8)及呼吸指数 (RI)的影响 ,探讨致炎细胞因子IL 8在CPB相关急性肺损伤中的意义及丙泊酚保护作用的机制。方法 选取ASAⅡ～Ⅲ级 ,风湿性心脏瓣膜患者 2 0例。随机分成两组 :丙泊酚组和对照组 (每组 10例 )。除丙泊酚组在麻醉诱导和维持中加用丙泊酚外 ,其它术中用药两组均相同。两组分别于麻醉诱导后CBP前 (T1) ,主动脉阻断后 30min(T2 ) ,主动脉开放后 10min(T3 ) ,30min(T4) ,2h(T5) ,4h(T6) ,6h(T7)分别采集肝素抗凝桡动脉血检测动脉血浆丙二醛 (MDA) ,IL 8的含量和呼吸指数。结果 两组T3 ～T7RI ,MDA及IL 8均明显升高 (P <0 .0 5 ) ;两组RI ,MDA和IL 8在T5达峰值 ;T3 ～T7丙泊酚组RI,MDA和IL 8显著低于对照组 (P <0 .0 5 ) ;两组血浆IL 8与MDA ,IL 8与RI及MDA与RI的关系在T5时间点呈正相关。结论 丙泊酚通过抑制致炎细胞因子IL 8的产生 ,有效地平抑组织炎症反应 。

对手术费、诊疗费定价合理性的探讨

目前,我国医疗服务项目及其价格确定存在着与医学发展和社会经济发展不适应、医疗服务价格计算方式不完善和没有体现技术难度等问题。本文就手术、诊疗项目定价方法及依据,现行手术、诊疗项目定价实际及价格标准的历史变迁进行分析,提出改革医疗服务项目成本测算方法、定期调整医疗服务收费价格、建立多元化医疗服务价格形成机制等建议。

构建大鼠前甘丙肽原基因修饰永生化星形胶质细胞株对镇痛研究的意义

目的:转基因细胞移植镇痛是慢性疼痛治疗的新方向,构建大鼠前甘丙肽原基因修饰的永生化大鼠星形胶质细胞株,为转甘丙肽基因细胞移植镇痛的研究提供理论依据。方法:实验于2003-05/2004-10在华中科技大学同济医学院附属同济医院麻醉学研究室完成。采用DNA重组技术将质粒pBSKS(+)-前甘丙肽原中的大鼠前甘丙肽原基因克隆至真核表达载体pcDNA3.1(+)上,经酶切鉴定和测序分析后,采用脂质体介导法将重组质粒pcD-NA3.1(+)-前甘丙肽原和空质粒pcDNA3.1(+)分别转染永生化大鼠星形胶质细胞株,经G418(600mg/L)筛选,挑选阳性克隆并扩大培养。采用免疫细胞化学法、反转录-聚合酶链反应和放射免疫法检测转染细胞大鼠甘丙肽的表达及分泌,同时检测Neo基因的存在以证实转染成功。结果:重组质粒经酶切后分别出现5.4kb和521bp片段,测序分析与文献报道结果一致,表明重组质粒pcDNA3.1(+)-前甘丙肽原亚克隆成功。Neo基因检测显示重组质粒和空质粒已成功转染到星形胶质细胞株中,筛选获得星形胶质细胞株/前甘丙肽原和星形胶质细胞株/Neo两种细胞株。星形胶质细胞株,星形胶质细胞株/前甘丙肽原和星形胶质细胞株/Neo的前甘丙肽原免疫染色均阳性,平均光密度分析结果显示星形胶质细胞株/前甘丙肽原的前甘丙肽原表达明显高于星形胶质细?

现行医疗服务价格的合理性浅析——基于《重庆市医疗服务项目价格(2014年版)》测算结果

通过介绍《重庆市医疗服务项目价格(2014年版)》临床手术治疗项目测算过程,将测算结果与现行价格进行对比分析,评析现行手术价格与医疗成本、医学发展的适宜性,提出临床手术治疗项目成本测算应注意的问题。

面瘫膏配体针治疗陈旧性面瘫50例

面瘫膏配体针治疗陈旧性面瘫５０例安珂（甘肃省中医院，兰州市７３００７０）主题词面神经麻痹／中医药疗法，中药外敷陈旧性面瘫是指病程在６个月以上尚未恢复的茎乳突孔内非化脓性面神经炎，亦称周围性面神经麻痹。笔者１９９０～１９９５年采用自制面瘫膏外敷配合体针...

生物细胞的永生化和去永生化在细胞镇痛中的应用进展

慢性疼痛和晚期癌痛的治疗研究一直是生命科学的重要课题之一,传统的药物止痛有着诸多不可避免的缺陷。目前,细胞镇痛在动物实验研究方面获得了大量的资料和经验,虽然生物细胞的永生化可暂时解决镇痛细胞的来源和存活等问题,但因其潜在的致瘤性,限制了其推广应用。迄今,随着可诱导的Cre-LoxP重组酶系统在细胞去永生化中的应用,在镇痛细胞的来源、存活和安全性等方面取得了突破性进展,为细胞镇痛的临床应用奠定了基础。

医疗服务项目定价合理性评析

就现行医疗服务项目定价情况及其历史变迁进行分析,归纳存在的问题并分析原因,提出改革医疗服务项目成本测算方法、定期调整医疗服务收费价格、建立多元化医疗服务价格形成机制等建议。

矩阵针灸配穴方案设计的数学和物理学基础

从数学和物理学的基础理论方面对矩阵针灸的科学性作一些说明,为矩阵针灸的临床应用提供理论基础。

甘丙肽及其受体在痛觉调控中的作用

甘丙肽广泛分布于外周和中枢神经系统,具有广泛的神经生物学功能,是一种内源性镇痛物质,脊髓水平的甘丙肽及其受体参与神经系统伤害性信息的调控。

周围性面瘫定位诊断与针刺疗效关系

探讨周围性面瘫定位诊断与针刺疗效关系 ,为针刺治疗周围性面瘫的预后判断提供临床和理论依据。将 87例面神经炎患者按面神经损伤平面定位而分型为单纯性面神经炎、Bell氏面瘫、Hunt氏面瘫进行治疗。通过临床观察 ,提示疗效与定位的相关规律是面神经的损伤平面越低 ,疗效越佳 ,否则反之。

针刺治疗突发性耳聋37例

目的:观察针刺治疗突发性耳聋的疗效。方法:对37例经电测听力等检查确诊为突发性耳聋患者采用针刺进行治疗,同时设对照组37例,对两组的疗效及治疗时间进行观察和比较。结果:针刺组在疗效和治疗时间上均优于对照组(P<0.01)。结论:针刺疗法是治疗突发性耳聋的有效方法,值得临床推广引用。

矩阵针灸蕴涵的信息通道学说思想

矩阵针灸是金安德主任医师以中医理论为指导 ,结合长期的临床实践而创建的。矩阵针灸包含着现代系统论及控制论中关于“信息通道”学说的观点 ,是信息通道学说在针灸临床的应用 ;它通过矩阵化配穴组合 ,体现多“信道”取穴思想 ,以增强其治病的信息输入量 ,聚集针灸“能量” ,以增强其疗效。