弓形虫表面抗原SAG1截短型片段在大肠杆菌中的可溶性表达及纯化

在大肠杆菌中高效表达及纯化获得可溶性、有反应活性的弓形虫表面抗原SAG1截短型片段(tSAG1),为研制新型的弓形虫病检测试剂奠定基础。构建重组质粒pET-32a-tSAG1并将其转化大肠埃希菌BL21(DE3)表达菌株,在异丙基硫代-β-D半乳糖苷(IPTG)诱导下表达蛋白。SDS-PAGE分析表达产物的表达形式,通过降低培养温度、降低摇床转数和升高LB液体培养基pH,诱导目的蛋白在上清中表达,利用His.Bind Kit试剂盒对目的蛋白进行纯化,Western blot和ELISA检测纯化蛋白的反应原性。在IPTG为1mmol/L、温度37℃条件下,tSAG1以融合蛋白(His-tSAG1)的形式在大肠埃希菌中高效表达,表达产物以包涵体形式存在。在22℃和LB培养基pH为7.7条件下,融合蛋白主要在上清中表达。Western blot和ELISA分析纯化蛋白能被弓形虫的阳性血清所识别。tSAG1在大肠埃希菌中得到了可溶性蛋白表达,经纯化后能被弓形虫的阳性血清所识别,可用于制备检测弓形虫病的诊断试剂。

微胶囊技术在医学生物学中的应用

微胶囊是由天然或合成高分子制成的微型容器,直径一般为1～1 000μm。含固体的微胶囊形状与囊内固体相同,含液体或气体的微胶囊为球形。微胶囊有保护物质免受环境条件的影响,掩蔽不良味道、颜色和气味,控制芯材释放,降低毒性,改变物质的性质或性能,

新型钢板阻尼器的减震性能分析

通过改变钢板的平面几何形状减小应力集中,提出一种利用钢板平面内受力屈服耗能的新型钢板耗能阻尼器,并对其进行有限元数值计算,计算结果表明这种阻尼器初始刚度较大、滞回曲线饱满、耗能效果较好。为了利用有限元软件ABAQUS实现对安装有该类钢板阻尼器的整体结构模型进行计算分析,提出该类钢板阻尼器的双线型恢复力模型及其在软件中的简化计算方法。在此基础上,对安装与未安装该类钢板阻尼器的框架结构进行地震作用下动力有限元计算,从加速度反应和位移反应两方面对安装与未安装该类钢板阻尼器的框架结构的计算结果进行分析比较,结果表明该类钢板阻尼器在水平方向上对结构具有良好的减震效果,是一种有效的减震装置。

基于通用有限元软件ABAQUS的子结构拟动力试验研究

通过OpenFresco试验协调系统,实现通用有限元软件ABAQUS与MTS电液伺服加载系统的数据传递,采用子结构拟动力试验方法开展单层单跨钢结构框架在地震作用下的反应分析。通过有限元软件模拟结果与试验结果的对比,证明该试验方法的结果与模拟结果一致。采用OpenFresco试验协调系统不仅能够实现结构构件层次上的子结构拟动力试验,而且能够使计算子结构部分进入塑性,极大地扩展了拟动力试验的功能。

衰老动物模型的研究进展及应用

衰老是生物随着时间的推移、自发的必然过程,表现为机能衰退,适应性和抵抗力减退。从古至今,人们一直在寻找各种延年益寿的方法和药物,以期能在遗传学上所界定的寿限内延迟衰老或提高生命质量。1939年第一个衰老研究协会（the Club for Research in Aging）成立,从此科研工作者开始对衰老进行真正系统的研究。

进口奶牛犬新孢子虫病血清学抗体及流产胎儿病原分子生物学检测

采用间接免疫荧光抗体试验对随机抽取的3批进口奶牛1 238份奶牛血样进行牛新孢子虫病的流行病调查。随后用乳胶凝集对牛新孢子虫抗体阳性样品进行弓形虫抗体检测。并用已建立的牛新孢子虫病巢式PCR(Nested-PCR)对第一批进口奶牛的数十头流产胎儿进行牛新孢子虫病的病原分子生物学检测。结果表明,3批进口奶牛的新孢子虫整体感染率为6.54%,所有奶牛犬新孢子虫抗体阳性血清的弓形虫抗体全部为阴性。新孢子虫血清抗体阳性母牛流产的胎儿经Nested-PCR检测,60%胎儿为阳性,而抗体阴性母牛流产的胎儿经Nested-PCR检测均为阴性。

功能性寡糖及其作用机理

本文介绍了功能性寡糖的概念、种类,并阐述了果寡糖、甘露寡糖、异麦芽寡糖和木寡糖等对动物的作用及其机理,还对其应用提出了展望。

奶牛隐孢子虫Nested PCR-RFLP方法的建立及初步应用

为快速检测并准确鉴别奶牛隐孢子虫种,以隐孢子虫18S rRNA基因的特殊区域为基础,设计内、外引物,并根据软件分析确定相应的内切酶EcoT14I,采用Nested PCR-RFLP方法进行虫种种型鉴别分析。在Nested PCR两次PCR反应中,以微小隐孢子虫(Cryptosporidium parvum,C.p)和安氏隐孢子虫(Cryptosporidium andersoni,C.an)卵囊提取的DNA为模板,均能扩增出长约800bp和500bp的明亮条带,且特异性强,其他虫种不能扩增出条带,该方法最低可检测到5个卵囊/g粪便;对于由内引物扩增出的500bp的条带,C.an的PCR产物能被内切酶EcoT14I酶切,酶切后的片段分别为416bp和92bp,C.p的PCR产物不能被此酶酶切。用所建立的Nested PCR-RFLP法对上海奶牛389头和进口奶牛200头的共计589份粪样进行检测,Nested PCR的结果表明上海奶牛和进口奶牛的隐孢子虫阳性率分别为19.02%和3.5%,RFLP的结果表明上海奶牛感染的主要是C.p和C.an,进口奶牛感染的主要是C.p。研究结果表明,本研究建立的检测奶牛粪便中的隐孢子虫的Nested PCR-RFLP法,可用于奶牛隐孢子虫流行病学调查并有效鉴别奶牛隐孢子虫种。

油源断裂输导油气能力定量评价与油气聚集——以南堡凹陷东一段为例

为了研究南堡凹陷东一段油气成藏规律,在输导油气机理和能力影响因素分析的基础上,利用所建立的断裂输导油气能力评价方法,对其油源断裂分布及输导油气能力进行了定量评价。结果表明:研究区发育有大量的油源断裂,在柳赞、高尚堡、老爷庙、南堡1号、南堡2号及其以东地区、南堡4号及其以南地区、南堡5号以东地区,油源断裂输导油气的能力相对较强,这有利于下伏沙三段或沙一段—东三段源岩生成的油气在上覆东一段中聚集成藏。目前,在这些地区的东一段找到了大量油气,证明了使用该方法来研究油源断裂输导油气能力是可行的。

产前添加过瘤胃胆碱对围产期奶牛生产性能和肝脏功能的影响

为探讨产前添加过瘤胃胆碱对围产期奶牛生产性能和肝脏功能的影响,选取产前30~40 d的经产干奶牛20头,随机分为对照组和试验组。在产前21 d至分娩阶段,对照组饲喂基础日粮,试验组基础日粮中添加过瘤胃胆碱(30 g/d);分别于预产期前7 d及产后0、7、14 d采血并分离血清,检测血清生化指标和其他代谢物浓度;于产后1~15 d记录产奶量,产后30 d时采集乳汁并分析乳成分。结果表明:产前添加过瘤胃胆碱增加了奶牛产后1~15 d的日均产奶量(P<0.05),降低了血清丙氨酸氨基转移酶、天门冬氨酸氨基转移酶和乳酸脱氢酶活性(P<0.05),降低了血清总蛋白、球蛋白和胆固醇水平(P<0.05)。上述结果表明,产前21 d至分娩时添加过瘤胃胆碱30 g/d能显著提高奶牛泌乳早期的产奶量,改善肝脏功能。

产前体况评分对围产期奶牛生产性能和血钙水平的影响

为了探讨产前体况评分对围产期奶牛的影响,识别导致奶牛代谢紊乱进而发生生产性疾病的风险因子,选取临床健康的经产干乳期奶牛,根据体况评分标准,将奶牛分为正常组(3.0≤BCS<3.5;n=10)和肥胖组(BCS≥4.0;n=10)。所有试验牛均在同等条件下饲喂和管理。于产后11d至40d每天记录产奶量;于产前14d、7d、4d、2d、1d、产后0d、1d、2d、4d、7d、14d采集血液并分离血清,检测血钙浓度;于产后30d采集新鲜乳,检测乳成分。结果显示,肥胖牛在泌乳早期的日均产奶量要低于正常牛;与正常组相比,肥胖牛的乳脂率、乳脂蛋白比和乳干物质含量较高;所有试验奶牛在产前2d至产后2d的血钙浓度均低于2.0mmol/L,与正常组相比,肥胖牛的血钙水平处于更低水平。以上结果表明,产前肥胖(高BCS)奶牛在泌乳早期过多动用体脂,并增加了发生产后低血钙症的风险。

悬取回转轨道改造

悬臂取料机是现代工业连续装卸散状物料的重要设备,对于提高工作效率,减轻工人劳动强度有着重要意义。但在实际应用中,由于悬臂取料机的使用效率极高,作业过程中回转轨道承受着极大的压力,通常在2~3年内就会被压溃。为了提高悬臂取料机回转轨道的使用寿命,我公司以R5-1、R6-1悬臂取料机为例,就回转轨道的改型进行了研究和实践应用,有效的延长了回转轨道的使用寿命,节省了维修费用,为保证悬臂取料机安全顺利的完成生产任务提供了有力的支持,取得了较好的效果。

弓形虫SAG1单抗的研制及其初步应用

为开展弓形虫免疫诊断及抗弓形虫感染的相关研究,利用可溶性表达的弓形虫表面抗原SAG1截短型重组蛋白(trSAG1)研制单克隆抗体,筛选出能够稳定分泌高滴度抗体的杂交瘤细胞株,所分泌的单抗不仅适用于在虫体定位该蛋白,而且具有一定的小鼠体内保护作用。共筛选出4株(6H1、6G12、7B4和7A12)特异性好的单抗分泌株,经亚型测定,4株单抗重链均为IgG1,轻链均为κ链。抗体经纯化后测定效价为1∶8 000～1∶25 600;Western blot结果显示4株单抗能够同时识别重组表达及天然弓形虫SAG1抗原。筛选得到的2株抗SAG1单抗(6H1和7B4)可用于间接免疫荧光检测SAG1蛋白在虫体中的表达定位和分布。小鼠被动免疫保护试验表明,6H1和7B4两株单抗分别或联合使用可稍微延长被弓形虫感染的小鼠的存活时间。本试验研制的弓形虫SAG1单克隆抗体对将来研究弓形虫蛋白定位、弓形虫感染的诊断及防治具有一定的应用价值。

石家庄省会体育中心体育场结构设计

针对石家庄省会体育中心体育场结构方案,取三种计算模型进行分析比较:下部混凝土结构分缝单独计算、上部钢结构罩棚单独计算模型;下部混凝土结构分缝与上部钢结构罩棚不设缝整体计算模型;下部混凝土结构分缝与上部钢结构罩棚分缝分段整体计算模型。同时考虑抗震性能化设计,针对结构构件重要程度的不同区别对待。而且体育场的平面尺寸较大,由于罩棚和看台均处于露天环境,温度应力需要引起足够重视。