《布鲁氏菌病诊断》(WS 269—2019)标准应用的调查评价

目的了解《布鲁氏菌病诊断》(WS 269—2019)(简称标准)的宣贯、实施和使用情况以及使用过程中存在的问题,为标准的修订和完善提供参考。方法采用分层抽样调查和国家布病监测防控工作系统公开广泛调查相结合的方法,对全国布病一、二、三类部分流行地区的各级疾病预防控制中心(简称疾控机构)和临床医疗机构中从事布病流行病学调查、实验室检验和临床诊治的卫生专业人员开展问卷调查和访谈。结果参与问卷调查的省份(直辖市)有16个,共调查疾控机构和临床医疗机构763家,收回问卷1479份,问卷有效率为100.00%,其中调查疾控机构261家,完成问卷调查530份;调查临床医疗机构502家,完成问卷调查949份。调查对象平均年龄为(40.29±9.62)岁,学历中本科及以上占56.19%,职称以中初级职称占比最高(占34.75%),专业以临床诊断治疗为主(占48.88%),专业年限以5年以下为主(占54.02%)。1479名调查对象中,标准知晓率为88.30%(1306/1479),其中疾控机构知晓率为92.83%(492/530),临床医疗机构知晓率为85.77%(814/949),两者差异具有统计学意义(χ2=16.391,P<0.001);布病相关实验室检验项目开展率为79.86%(1043/1306),且调查对象所在的省市级医疗机构布病相关实验室检验项目开展率最高,为88.79%(285/321),其次为县区级(87.79%,460/524)和乡镇级(64.64%,298/461)医疗机构,差异有统计学意义(χ2=102.752,P<0.001)。1.35%(20/1479)认为该标准与国家法律法规及其他相关标准、现行教材矛盾。通过问卷调查和电话回访共收集到关于布病检验、病例诊断和宣贯培训3个方面的意见和建议。结论该标准是现阶段开展布病诊断工作的唯一指导性文件,建议进一步完善和修订该标准,加强该标准的宣贯和培训,提高临床医疗机构对该标准的使用和掌握,提升布病检测水平和特异性,从而有效推进布病防治工作的开展。

榆林市布鲁氏菌病与气象因素季节性波动关联和风险评估

目的探究榆林市布鲁氏菌病(布病)与气象因素季节性波动模式,评估不同气象条件及滞后期下布病发病风险变化。方法收集2008—2020年榆林市布病发病监测数据及同期气象数据,利用正弦模型揭示二者季节性关联,构建分布滞后非线性模型分析气象因素对布病发病的作用。结果5月上旬是布病发病季节性高峰,其与气象因素存在5个月以内滞后期的季节性关联。布病与气温呈倒“U”形关联,即随着气温升高,布病发病风险到达高峰后下降。随着风速增高,发病风险在短期内持续上升,并随滞后时间延长而减弱。结论榆林市布病发病高峰与冬春季的气象条件有关,在温和气温以及较高风速时采取针对性预防措施有利于降低布病发病风险。

陕西省鼠疫耶尔森菌差异区段分型及其流行病学特征分析

目的分析陕西省鼠疫耶尔森菌差异区段分型及流行病学特征。方法对分离自陕西省鼠疫疫区获得的48株鼠疫菌应用23个DFR(差异区段)和PMT1(质粒验证)PCR扩增,进行鼠疫菌DFR基因组分型及流行病学特征分析。结果相同年份,不同染疫动物、媒介蚤分离的鼠疫菌基因组型基本一致。陕西鼠疫耶尔森菌DFR基因组型有Genomovar11、17、20共3种。1987-1988年份、2000-2001年份DFR基因组型以Genomovar17为主,2006年份以Genomovar20为主。结论不同年份疫情主导的基因组型不同,随着时间的变化,鼠疫菌DFR基因组型从Genomovar17基因缺失微进化到Genomovar20。

陕西省一起动物鼠疫流行的实验室分析

目的分析陕西省1起长爪沙鼠鼠疫暴发流行实验室检测结果。方法参照 GB 16883-1997鼠疫细菌学检查方法,利用自制培养基分离鼠疫菌;并依据 GB 16882-1997进行间接血凝试验。结果分离鼠疫菌15株,检测出阳性血清3份。结论加强高抗动物血清学、自毙动物病原学的监测能及时发现动物疫情并能控制鼠疫流行。

陕西省黄鼠的遗传学特征分析

目的明确分布于陕西省的黄鼠的遗传学特征。方法测定COI、Cyt-b基因序列,与内蒙古科右中旗、正镶白旗达乌尔黄鼠、宁夏海原县阿拉善黄鼠同类基因序列进行比对,分析遗传距离,构建系统发育NJ树。结果陕西省定边县黄鼠COI基因序列与宁夏阿拉善黄鼠的遗传距离≤0.5%,与内蒙达乌尔黄鼠遗传距离在7.9%~9.3%之间,Cyt-b基因序列与宁夏阿拉善黄鼠的遗传距离为≤2.2%,与内蒙达乌尔黄鼠遗传距离在8.9%~11.2%之间。基于COI和Cyt-b基因的NJ系统树可见所有样本序列形成两个高支持度的单一分支,陕西定边县黄鼠与宁夏阿拉善黄鼠聚为一类,两者与内蒙达乌尔黄鼠形成两个独立分支,基于COI基因的NJ系统树显示陕西各地样本聚为一类。结论陕西省的黄鼠应为阿拉善黄鼠。

陕西省布鲁氏菌病监测点三年人间监测结果分析

目的分析陕西省2005-2007年人间布氏菌病监测点监测结果,了解全省人间布氏菌病监测点疫情动态及流行特征。方法根据《陕西省人间布鲁氏菌病监测实施方案(试行)》进行。结果连续三年,血清学检查平均阳性率为6.44%,各年份阳性率逐年提高,波动在3.49-8.79%之间;感染率为1.20%。从病人关节液中分离出羊1型布氏菌。结论人间布氏菌病疫情形势严峻,局部地区疫情活跃,出现爆发现象。

汉中市三带喙库蚊对常用杀虫剂的抗药性研究

目的了解汉中市三带喙库蚊对常用杀虫剂的抗药性水平。方法用区分剂量法进行抗性检测;测定常用药物对三带喙库蚊的LC50。结果三带喙库蚊对敌敌畏、溴氰菊酯均已达到高抗水平,对氯菊酯达到中抗水平,对氯氰菊酯、DDT较为敏感;DDT、敌敌畏、高效氯氰菊酯、氯菊酯、溴氰菊酯、氯氰菊酯、双硫磷、残杀威对三带喙库蚊的LC50分别为0.221、9.212、0.006、0.026、0.008、0.003、1.747、12.079mg/L。结论灭蚊工作避免使用敌敌畏和溴氰菊酯,应注重综合防治。

3种抗凝血灭鼠剂实验室及现场灭鼠效果比较

目的比较杀鼠迷、溴鼠灵和敌鼠钠盐3种毒饵实验室及现场灭鼠效果,为今后灭鼠工作提供科学依据。方法用单笼饲养有选择给饵法测定3种毒饵的适口性及实验室毒杀效果,计算摄食系数和实验室校正死亡率;选择定边县一养鸡场、西安市南郊2个疗养院作为灭鼠现场,用粉迹法测定鼠密度,采取一次性投饵,计算3种毒饵的现场校正灭鼠率。结果杀鼠迷、溴鼠灵、敌鼠钠盐毒饵的摄食系数分别为0.61、0.24和0.51,分别达到A级、B级和A级,实验室校正死亡率均为100%,达到A级;现场校正灭鼠率为91.34%、80.94%和88.39%,分别达到A级、B级和B级。结论3种抗凝血灭鼠剂均具有较好的适口性及实验室毒杀效果,但杀鼠迷毒饵灭鼠效果优于其他2种。

微型扦插快速繁殖辣椒试管苗的研究

用微型扦插的方法快速繁殖辣椒苗 ,通过激素在培养基中的合理配比及加入硝酸银、水解乳蛋白 ,较好地控制腋芽的伸长生长 .且实验中采用的先生根、再伸长的方法也获得了长势较好的辣椒快繁苗 .

DNA条形码技术在陕西省鼠形动物鉴定中的应用

目的探究应用DNA条形码技术进行分子生物学鉴定的可行性,弥补形态学鉴定缺陷。方法结合鼠疫监测工作,使用样方法、5 m夹笼法、夹夜法采集鼠形动物标本,所有标本形态学初步鉴定后基于线粒体细胞色素C氧化酶I亚基基因(COI基因)进行分子鉴定,计算遗传距离,构建系统发育树。结果获得709只鼠形动物的COI基因序列,隶属于3目10科24属38种。COI基因序列显示种内遗传距离在3.6%以内,平均为1.4%,种间遗传距离大于5.6%,种间遗传距离显著大于种内遗传距离,属间、科间遗传距离界限不明显,对多只鼠形动物形态学鉴定结果进行了纠正。系统发育树显示同种个体聚为高支持度的单一分支,发现索氏仓鼠和中国仓鼠2个隐存种。结论DNA条形码技术可对鼠形动物进行有效的鉴定,但因数据库的不完善,仍需将传统的分类学鉴定方法和现代分子生物学鉴定方法结合,以保证鉴定结果的准确性。

铜川市淡色库蚊对3种杀虫剂的抗药性研究

目的了解铜川市淡色库蚊对高效氯氰菊酯、双硫磷及溴氰菊酯的抗药性现状,为制定防治对策提供科学依据。方法采用浸渍法,测定Ⅳ龄期幼虫的半数致死浓度(LC50)。结果铜川市淡色库蚊对高效氯氰菊酯、双硫磷、溴氰菊酯的抗性倍数分别为1.1、2.0和2.5倍。结论铜川市淡色库蚊对3种杀虫剂均产生了不同程度的抗药性,属于低抗水平。

陕西省韩城市布鲁氏菌病暴发疫情流行病学调查

目的调查陕西省韩城市2011年布鲁氏菌病(以下简称布病)局部暴发疫情状况及影响因素,评价控制措施,为以后疫情处置提供依据。方法对重点人群进行流行病学调查和实验室检测,掌握畜间感染情况,分析疫情暴发因素,采取相应控制措施。结果调查重点人群152人,采集血样33份,阳性6人,阳性率18.18%,罹患率3.29%;对所有存栏羊43只、牛1头抽血化验,检出阳性羊9只,全部扑杀、深埋和无害化处理,疫情得到控制。结论本次布病暴发疫情传染源为病羊,传播途径主要为饲养、接产等密切接触传播,今后应加强畜间检疫和病畜淘汰等综合性防制措施,加大宣传教育力度,严防疫情暴发流行。

全饥饿状态对大鼠脑损伤及复食后学习记忆功能的影响

目的通过测定血清S100B蛋白,NSE的浓度探讨全饥饿状态对大鼠脑损伤的影响及大鼠复食后对其学习记忆的影响。方法采用饥饿大鼠模型,将80只成年健康雄性SD大鼠按体质量随机分成分为两组,即全饥饿组(A组:n=40),复食组(B组:n=40)组。 A组又分为5个亚组:A-Ⅰ组为正常对照组,A-Ⅱ、A-Ⅲ、A-Ⅳ、A-Ⅴ组分别为全饥饿3d、5d、7d、9d组,每组n=8。 B组也分为5个亚组:B-Ⅰ组为正常对照组,B-Ⅱ、B-Ⅲ、B-Ⅳ、B-Ⅴ组分别为全饥饿3d、5d、7d、9d后给予恢复进食组组,每组n=8。结果 A-Ⅱ组、A-Ⅲ组大鼠饥饿后,血清中S100B蛋白含量与NSE含量比较A组均下降,下降幅度 A-Ⅲ组>A-Ⅱ组。其中A-Ⅱ组与对照A-Ⅰ组比较无明显差别(P>0.05),A-Ⅲ组与A-Ⅰ组比较有差异性(P<0.05)。 A-Ⅳ组、A-Ⅴ组血清中S100B蛋白含量与NSE含量比较A-Ⅰ组均上升,但A-Ⅳ组与A-ⅠA组比较无明显差异(P>0.05),A-Ⅴ组与A-Ⅰ组比较差异明显(P<0.05),有统计学意义。水迷宫实验中,前6 d定位航行试验中B-Ⅱ、B-Ⅲ组与对照B-Ⅰ组比较其上台前平均时间均缩短,其中第1 d和第2 d与对照组比较有明显差异(P<0.05)。其余无明显差异(P>0.05)。 B-Ⅳ组与对照B-Ⅰ组比较上台前时间均延长但无明显差异(P>0.05)。 B-Ⅴ组对照B-Ⅰ组比较上台前时间均延长,其中第1、4 d上台前时间与对照B-Ⅰ组比较有明显差异(P<0.05)。饥饿后复食组平均速度与对照组无差异(P>0.05)。第7 d空间搜索试验中撤平台后B-Ⅱ、B-Ⅲ组其站台穿越次数大于对照B-玉组,但是无差异(P>0.05),站台停留时间百分比大于对照B-Ⅰ组但是无差异(P>0.05)。B-Ⅳ、B-Ⅴ组其站台穿越次数小于对照B-玉组,但是无差异(P>0.05)。站台停留时间百分比小于对照B-Ⅰ组并且有统计学意义(P<0.05)。结论大鼠饥饿3 d、5 d、7 d后无脑损伤发生,饥饿9 d后有脑损伤发生。复食7d后对其学习记忆有一定的影响。

2008-2018年陕西省人间布鲁氏菌病流行特征分析

目的了解2008-2018年陕西省人间布鲁氏菌病的发病特征及流行态势,为进一步制定布鲁氏菌病防控措施提供科学依据。方法采用描述性流行病学方法,对2008-2018年陕西省布病疫情资料进行统计分析。结果2008-2018年陕西省共报告布鲁氏菌病病例10007例,年发病率在1.55/10万~4.08/10万之间,平均发病率为2.41/10万,不同年份发病率差异有统计学意义(P<0.001),无死亡病例;病例主要集中在陕北和关中地区,以榆林市、延安市和渭南市为多发地区,占86.23%,陕南地区病例数较少;全年均有报告,4~7月为发病高峰;发病以40~59岁年龄组为主,占发病总数的50.19%;男性多于女性,男女发病比为3.57∶1;职业分布以农民为主,占89.44%。血清学平均阳性率为4.21%。布病发病至诊断时间间隔的中位数是22 d。结论陕西省布鲁氏菌病防控形势依然严峻,流行在未来一段时间呈持续状态,应加强传染源的管理,加大布鲁氏菌病监测力度,做好布鲁氏菌病的防控工作。

2020年陕西省一起布鲁氏菌病暴发疫情的调查分析

目的调查2020年陕西省泾阳县一起家庭布鲁氏菌病(布病)暴发疫情的原因,明确传染源和传播途径,为阻断疫情传播提供科学依据。方法对报告病例开展布病流行病学调查,并对病例和牲畜进行布病检测和布鲁氏菌分离培养鉴定种型,对结果进行描述和分析。结果共发现7例确诊病例和6例隐性感染者;确诊病例发病时间为3月18日至5月7日,临床表现以发热为主;经分析,病例发病与食用牛肉无关联(OR=0.48,95%CI:0.08~2.85),与去过首发病例家有关(OR=141.00,95%CI:17.15~1159.28);13例病例、2只羊和2只公犬布鲁氏菌抗体检测阳性,血清抗体滴度从1∶100(++)到1∶800(++++)以上;从2例病例、2只羊和1只公犬血液中共分离到5株布鲁氏菌,均为羊种3型,MLVA-16基因型均为(1-5-3-13-2-2-3-2-4-41-8-6-4-3-4-5)。结论该起布病家庭暴发疫情的原因为公犬叼食了布病阳性羊只的流产物而感染布病,继而人通过与病犬直接接触以及接触被病犬污染的水等生活物质而发病。

布鲁氏菌可视化环介导等温扩增方法的建立及应用

布鲁氏菌病(简称布病)是一种由布鲁氏菌引起的人畜共患疾病,影响了畜牧业的健康发展,甚至威胁到了人类的健康安全,造成了较严重的经济社会损失。因此,对布鲁氏菌病的防控十分必要。本研究主要基于布鲁氏菌保守基因Omp2a,利用在线网站设计3对引物,并优化其反应条件与反应体系,建立了一种检测布鲁氏菌的可视化LAMP方法。同时,将建立好的LAMP方法与聚合酶链式反应(PCR)检测方法相比较,并交由陕西省疾病预防控制中心进行实际样本检测。结果表明,基于羟基萘酚蓝(HNB)指示剂,LAMP扩增的结果可凭肉眼观察。建立的LAMP检测方法能准确区分布鲁氏菌与非布鲁氏菌,检测限为2.56×10^(-4) ng/μL。在实际样品检测中,LAMP检测方法相对于常规分离鉴定方法的敏感性和特异性均为100%。因此,本研究建立的LAMP检测布鲁氏菌方法具有特异性强、灵敏度高等优点,扩增45 min即可肉眼观察到检测结果,适用于现场和基层检测。

陕西省布鲁氏菌菌株多位点序列分析研究

目的对陕西省分离的77株布鲁氏菌菌株进行遗传多态性分析,了解其遗传特征及进化关系。方法应用多位点序列分型(Multiple locus sequence typing,MLST)技术,测定77株陕西省地区布鲁氏菌分离株的7个管家基因、1个外膜蛋白基因及1个基因间区的序列,确定各菌株序列型(STs),运用BioNumerics(Version 7.6)构建最小进化树,分析菌株间遗传进化关系。结果74株分离株(47株羊种3型、10株羊种1型、7株羊种2型、10株羊种变异型)序列型为ST8型,2株分离株(牛种生物型)序列型为ST2,1株分离株(猪种1型)序列型为ST14型。结论不同生物型布鲁氏菌的MLST分型结果稳定,羊种3型(ST8型)布鲁氏菌是陕西省主要流行菌株;MLST分型作为传统生物分型的技术补充,建立了陕西省布鲁氏菌基因分型数据库,对本省今后人间布病的防控具有科学指导意义。

2016-2020年陕西省榆林市人间布鲁氏菌病流行特征与时空聚集性

目的分析2016-2020年陕西省榆林市布鲁氏菌病(简称布病)发病的流行特征和时空聚集性,为制订布病防控策略提供依据。方法通过中国疾病预防控制信息系统收集2016-2020年陕西省榆林市布病发病数据,进行描述性流行病学分析,同时利用ArcGIS 10.8、GeoDa 1.6、SaTScan 9.4.1软件分别进行三维分析、空间自相关分析和时空扫描分析。结果2016-2020年陕西省榆林市共报告布病病例1773例,年均发病率为10.40/10万。病例报告以5-8月为主,病例性别比为3.53∶1(1382/391),年龄以45~64岁人群为主(占60.46%),职业以农民为主(占89.57%)。三维趋势分析显示榆林市布病发病率呈现由北向南、由西向东逐渐升高。空间自相关分析显示,2016-2020年榆林市布病发病率Moran's I值分别为0.4780、0.4440、0.2890、0.3220、0.2603,局部Moran's I系数检验发现榆林市布病发病有2个“高-高”聚集县区和3个“低-低”聚集县区。时空扫描分析显示,2016-2020年榆林市布病发病扫描到1个一类时空聚集区和1个二类时空聚集区,聚集时间为2019年。其中一类聚集区(LRR=57.97,RR=2.49,P<0.001)以米脂县为中心,半径为51.62 km,涉及5个县区。结论2016-2020年榆林市布病呈现明显的时空聚集性,应结合布病发病流行高峰期、发病人群、时空聚集区、羊只存栏量等情况,采取分区域、有重点、人畜同步联防的布病防控策略。