糖尿病肾脏病肾精亏虚证诊断量表的制定与验证

目的制定糖尿病肾脏病肾精亏虚证诊断量表并进行验证。方法在数据挖掘的基础上建立糖尿病肾脏病肾精亏虚证症状条目池,通过德尔菲法进行调查以筛选条目,然后纳入糖尿病肾脏病患者126例,运用频率分析法、相关系数法、克朗巴赫ɑ系数法、因子分析法进一步筛选条目,并对各条目进行赋权、确定阈值以及程度分级,最终得到糖尿病肾脏病肾精亏虚证诊断量表。在此基础之上收集糖尿病肾脏病患者52例验证该量表的准确率、灵敏度和特异性。结果糖尿病肾脏病肾精亏虚证量表,共包含乏力,腰膝酸软、足跟痛、健忘、头晕、耳鸣、耳聋(听力减退)、牙齿松动、性欲减退9个条目,通过赋权计算,其诊断阈值为38.5分,38.5≤总分<62为轻度,62≤总分<124.5为中度,总分≥124.5为重度。通过临床小样本验证,量表的灵敏度95.2%、特异度80%、准确率92.3%。结论该量表可以对糖尿病肾脏病肾精亏虚证进行量化诊断,有利于进一步研究和临床推广。

芪地糖肾方对糖尿病肾病小鼠肾脏病变及血清Klotho、MMP-9/TIMP-1的影响

目的 探究芪地糖肾方对糖尿病肾病小鼠肾脏病变及血清Klotho、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)/组织金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)的影响。方法 将36只14周龄db/db小鼠随机分为模型组、缬沙坦组、芪地糖肾方组,每组12只。选取12只14周龄db/m小鼠作为正常组。缬沙坦组给予10.29 g/kg缬沙坦水溶液灌胃,芪地糖肾方组给予3.33 g/kg芪地糖肾方颗粒水溶液灌胃,正常组及模型组给予等量的生理盐水灌胃,均1次/d,连续12周。免疫酶联吸附法检测尿微量白蛋白水平,计算12 h尿白蛋白水平;称小鼠体重、左肾重,计算肾重体重比值;免疫酶联吸附法检测血清Klotho、MMP-9、TIMP-1水平,计算MMP-9/TIMP-1;电镜、光镜下观察肾脏组织病理形态。结果 与正常组比较,模型组小鼠肾重体重比值、血清Klotho水平均明显降低(P均<0.05),12 h尿白蛋白水平及血清MMP-9、TIMP-1水平和MMP-9/TIMP-1均明显升高(P均<0.05),肾脏超微结构紊乱,肾小球基底膜明显增厚(P<0.05)。与模型组比较,芪地糖肾方组小鼠肾重体重比值明显升高(P<0.05),缬沙坦组升高不明显(P>0.05);缬沙坦组、芪地糖肾方组小鼠血清Klotho水平均明显升高(P均<0.05),12 h尿白蛋白水平及血清MMP-9、TIMP-1水平和MMP-9/TIMP-1均明显降低(P均<0.05),肾脏超微结构病变较轻,肾小球基底膜厚度均明显降低(P均<0.05)。结论 芪地糖肾方可明显减少糖尿病肾病小鼠尿蛋白,改善肾脏病变,其机制可能与调节血清Klotho及MMP-9/TIMP-1平衡有关。

糖尿病肾脏病肾阳虚证与线粒体损伤指标的相关性研究

目的:探讨糖尿病肾脏病(DKD)肾阳虚证与线粒体损伤的相关性。方法:选择符合诊断标准的DKD患者56例,糖尿病(DM)患者28例,采集所有受试者临床资料,依据中医肾阳虚证诊断标准将DKD患者分为肾阳虚证组与非肾阳虚证组,采用酶联免疫吸附法检测血清线粒体损伤指标三磷酸腺苷(ATP)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA),进行统计分析。结果:与DM组相比,DKD组血红蛋白、肾小球滤过率、总胆固醇水平明显更低,血肌酐、尿素氮水平明显更高;线粒体损伤指标ATP、SOD水平随DM病情发展呈降低趋势,MDA水平呈升高趋势;ATP与SOD呈正相关,与糖化血红蛋白呈负相关,MDA与血红蛋白、白蛋白、肾小球滤过率呈负相关,与尿素氮、血肌酐呈正相关。与DKD非肾阳虚证组相比,DKD肾阳虚证组血红蛋白、血清白蛋白、肾小球滤过率水平明显更低,尿素氮、血肌酐水平明显更高;线粒体损伤指标ATP、SOD水平明显更低,MDA水平明显更高;DKD肾阳虚证积分与ATP呈负相关,与MDA呈正相关。结论:随着DM患者肾功能下降,线粒体损伤程度加重,线粒体损伤可能参与了DM到DKD的发展。肾阳虚证积分与线粒体损伤指标MDA、ATP的表达存在一定的相关性。

高脂饲料喂养时间对2型糖尿病肾病大鼠模型的影响

目的探索不同高脂饲料喂养时间对诱发型2型糖尿病肾病(DN)大鼠模型血糖、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)及尿白蛋白排泄率(UAER)等的影响。方法采用单侧肾动脉结扎+高脂饲料喂养+小剂量链脲佐菌素(STZ)腹腔注射的方法造模,结扎单侧肾动脉后,DN1组及DN2组分别予高脂饲料喂养4周或8周,其后予STZ 30 mg/kg腹腔注射,比较两组大鼠在STZ注射4周后及实验结束时的UAER,观察两组大鼠血糖、体重、HOMAIR、肾指数及肾脏病理等情况。结果 STZ注射4周后,两组大鼠均可出现UAER的升高,且DN2组UAER明显高于DN1组(P<0.01)。第12周末,DN1组与DN2组肾组织HE染色均可见肾小球毛细血管袢肥大,系膜基质增多;肾小囊腔狭窄等病理改变。DN2组体重高于DN1组(P<0.01),肾指数低于DN1组(P<0.01),而血糖、血清胰岛素水平、HOMA-IR及UAER与DN1组相比差异无显著性(P>0.05)。结论延长高脂饲料喂养时间能够加重DN肾损害,但有可能会推迟干预时间,因此在试验中应权衡选择。

金匮肾气丸隐藏的治肾法则

金匮肾气丸组方隐藏着仲景的几大治肾原则,而被世人所忽视。肾虚的早期肾气虚、肾阴虚、肾阳虚多单见,后期肾气、肾阴、肾阳均化源不足,亏虚多合并出现,背后隐藏的病机是肾精不足。肾气丸即是通过填补肾精以治本,重用地黄八两体现了竣补肾精法,臣以涩精的山药、山茱萸体现了涩补精气法,佐以茯苓、泽泻、牡丹皮利湿活血体现了通补精气法,选用牡丹皮既可活血又清浮游相火体现了清补法,大剂量厚润之品配以少量温燥之品体现了辛润补肾法。金匮肾气丸的治肾思路与四逆汤等温肾的附子剂有着本质的区别,明晰了附子、肉桂辛燥之品不能作为补肾方药长期使用的机理所在。

芪地糖肾颗粒通过调节ERK信号通路减轻2型糖尿病肾病大鼠足细胞损伤的作用研究

目的:观察芪地糖肾颗粒(QDTS)对2型糖尿病肾病(DN)大鼠蛋白尿的治疗作用,并通过对足细胞标志性蛋白nephrin、PCX的表达及细胞外信号调节激酶(ERK)信号通路活化水平的检测探讨QDTS可能的作用机制。方法:建立2型DN大鼠模型,采用缬沙坦和QDTS干预4周,通过比较各组大鼠的尿微量白蛋白水平来判定疗效。采用WB法检测各组大鼠肾组织中足细胞标志性蛋白nephrin、PCX及ERK、p-ERK的表达水平。结果:与正常组相比,DN模型组的血糖及尿微量白蛋白水平均有显著升高(P <0. 01)。肾组织中nephrin、PCX的表达水平显著降低(P <0. 05),并伴有ERK磷酸化水平的升高(P <0. 01)。干预后,缬沙坦组及QDTS组大鼠的尿白蛋白水平明显降低(P <0. 05)。QDTS还能够提高DN大鼠肾组织中nephrin、PCX的表达(P <0. 05),并且降低ERK的磷酸化水平(P <0. 01)。结论:QDTS可以通过抑制ERK信号通路的过度活化来缓解DN足细胞损伤。

填精通络方对糖尿病肾病大鼠肾小管损伤的治疗作用

目的:探讨填精通络方(TJTLF)对链脲左菌素(STZ)诱导2型糖尿病肾病(DN)肾小管损伤的保护作用。方法:采用单侧肾结扎+高脂饲料喂养+小剂量STZ腹腔注射的方法制备2型DN大鼠模型,并用中药TJTLF进行干预。ELISA法检测大鼠尿液β_2微球蛋白(β_2-MG)、中性粒细胞明胶酶相关载脂蛋白(NGAL)含量,光学显微镜观察大鼠肾小管细胞结构及肾小管损伤指数变化,比较干预前后大鼠肾小管损伤情况。结果:DN模型组大鼠肾小管腔内可见脱落细胞碎片,部分肾小管空泡样变性;尿液β_2-MG、NGAL较正常组明显升高(P<0.05)。中药TJTLF干预后,大鼠肾小管损伤指数降低(P<0.01),尿液β_2-MG、NGAL含量降低(P<0.05)。结论:TJTLF能够减轻2型DN大鼠的肾小管损伤,对肾小管具有一定的保护作用。

柳红芳教授治疗痛风性肾病临床经验撷要

痛风性肾病是指嘌呤代谢紊乱导致高尿酸血症,尿酸盐沉积于肾脏引起肾损伤的一种疾病。柳红芳教授经过多年临床实践,认为热、浊、瘀为痛风性肾病发病的病理基础,脾肾阳虚为发病之本,强调标本兼治、补虚泻实,扶正以温补脾肾为主,攻邪以清热通络化浊为要。并遵从张景岳阴阳精气命门理论,善用大剂量熟地填补肾精,对治疗痛风性肾病导致的蛋白尿、血尿、血肌酐升高等效果显著。另附病案予以佐证。

芪地糖肾颗粒对糖尿病肾病大鼠模型炎症因子IL-6、IL-18、TNFα、CRP的影响

目的:探讨芪地糖肾颗粒对糖尿病肾病大鼠模型炎症因子IL-6、IL-18、TNFα、CRP的影响。方法:健康雄性Wistar大鼠分为正常组、模型组、芪地糖肾颗粒高、中、低剂量组以及缬沙坦组。各组按照体重喂以同容积的药物,正常组和模型组给予羧甲基纤维素(CMC);芪地糖肾颗粒高、中、低剂量组用CMC+芪地糖肾颗粒配制成三种不同浓度的药液给药;缬沙坦组用CMC+缬沙坦。各组均给药治疗12周后,HE染色观察大鼠肾脏病理,并检测大鼠肾组织肿瘤坏死因子α(TNFα)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-18(IL-18)、血清CRP蛋白水平。比较六组大鼠肾脏病理形态及炎症因子IL-6、IL-18、TNFα、CRP水平差异。结果:与正常组相比,模型组炎症因子IL-6、IL-18、TNFɑ、CRP水平均升高,肾小管呈空泡样改变,病变明显。与模型组相比,缬沙坦组IL-6水平较模型组明显降低(P<0.01),各中药组CRP均有明显改善(P<0.01),中剂量组TNFɑ、IL-6、IL-18水平较模型组均降低有统计学意义(P<0.05),低剂量组IL-18水平较模型组降低(P<0.05),各给药组肾小管病变明显减轻。结论:芪地糖肾颗粒可降低多种炎症因子水平,提示其能够改善糖尿病肾病大鼠模型的微炎症状态,从而降低糖尿病肾病大鼠模型尿蛋白水平。

金匮肾气丸在慢性肾功能不全治疗中应用探讨

金匮肾气丸中隐藏着张仲景的几大治肾原则,蕴含了《黄帝内经》"化不可代"思想,其组方思路可很好指导慢性肾功能不全的治疗,厘正了祛邪要服从于扶正的关系。慢性肾功能不全患者肾虚是五脏亏虚的基础,肾虚又以肾精亏虚为核心,肾气、肾阳、肾阴化生乏源,进一步引起痰湿、瘀血留滞肾络,具有因虚致实,虚气留滞的病机特点。金匮肾气丸组方思路启示慢性肾功能不全治疗应竣补肾精以治形质,补肾应结合涩补精气,佐以利湿化瘀以通补精气,结合清浮游相火以清补肾气。

糖尿病肾病微量蛋白尿期的炎症水平与中医证型相关性

目的:观察糖尿病肾病微量蛋白尿期的微炎症水平,分析糖尿病肾病微炎症状态与单纯糖尿病患者是否存在差异,并分析其与患者中医证型的相关性。方法:收集单纯糖尿病患者(26例)、糖尿病肾病微量蛋白尿期患者(40例)的一般资料,用酶联免疫吸附法检测上述患者血清肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、IL-18、C反应蛋白(C-reaction protein,CRP)水平。分别比较糖尿病组和糖尿病肾病组患者一般资料和血清TNF-α、IL-6、IL-18、CRP水平的差异;探讨TNF-α、IL-6、IL-18、CRP的水平与患者肾虚证、湿热证、痰浊证、血瘀证的相关性。结果:两组患者糖化血红蛋白、空腹血糖、血肌酐、尿素氮、三酰甘油、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇、IL-18、TNF-α比较,差异无统计学意义(P>0.05);糖尿病肾病组IL-6水平显著高于糖尿病组(P<0.05)。在相关性分析中,IL-18与湿热评分呈正相关,差异有统计学意义(P<0.05);TNF-α与湿热评分呈正相关,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:与糖尿病患者比较,糖尿病肾病微量蛋白尿期患者IL-6较高;相关性分析显示,IL-18、TNF-α与中医湿热证相关。

芪地糖肾颗粒对糖尿病肾病模型大鼠尿蛋白水平的影响

目的:探讨芪地糖肾颗粒对糖尿病肾病模型大鼠尿蛋白水平的影响。方法:采用单次腹腔注射链脲佐菌素55 mg·kg^-1制造1型糖尿病模型大鼠。将造模成功的大鼠随机分为6组,分别为正常组、模型组、中药高、中、低剂量组以及缬沙坦组。各组大鼠分笼饲养,自由饮食进水,按照体质量喂以同容积的药物。中药高、中、低剂量组用羧甲基纤维素(carboxymethyh cellulose,CMC)以5.24 g·kg^-1、2.62 g·kg^-1和1.31 g·kg^-1剂量配制成3种不同浓度的药液给药。模型组和正常组分别给予等剂量的CMC灌胃。缬沙坦组给予CMC配制的缬沙坦溶液,剂量为8 mg·kg^-1,各组均给药治疗12周。给药前及给药后的每4周留取大鼠24 h尿液,检测24 h尿微量白蛋白定量。给药第12周末取材,检测大鼠血肌酐(serum creatinine,Scr)、三酰甘油(triglyceride,TG)、胆固醇(cholesterol,CHO)、血糖、总蛋白等。HE染色光镜观察大鼠肾脏病理改变,Masson染色光镜观察肾小管及间质病理改变。结果:给药第12周,与正常组相比,模型组大鼠尿蛋白水平明显升高(P<0.01),与模型组相比,中药高剂量、中剂量组尿蛋白水平明显减少(P<0.01),且中药高剂量组效果明显优于缬沙坦(P<0.05)。与模型组比较,中药高剂量组各生化指标明显下降,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:芪地糖肾颗粒对糖尿病肾病模型大鼠有明显降低尿蛋白的作用。

从“肾藏精”探讨补益肾精法在糖尿病肾病中的应用

糖尿病肾病(diabetic kidney disease,DKD)以阴虚燥热、气阴两虚为基本病机,日久则耗伤人体阴精,"久病必穷肾",且肾又是精气之居所,肾精虚损,"肾藏精"功能失常,无以主津液代谢产生肢体水肿、舌苔厚腻等湿浊内滞之象,无以固摄精微产生蛋白尿、夜尿频多等精不敛固之象,无以化阳助气产生气短乏力、畏寒等阳虚之象,无以充润阴液产生口干、目涩等阴虚之象,故肾不藏精是DKD的核心病机之一。在"肾藏精"理论指导下,补益肾精法为DKD的治疗提供了重要的思路与方法。填补肾精是补益肾精之基石,补气生精是在填补肾精基础上的补充治法,固涩敛精是益精治法之藩篱,通补肾精是益精治法之御守,调摄养精则是益精治法之土壤。补益肾精法环环相扣,内恤外护共达填精、生精、固精、养精之功,肾精之耗损方可恢复。