脂肪干细胞与骨髓间充质干细胞成软骨能力的比较

背景:脂肪干细胞与骨髓间充质干细胞是软骨组织工程中应用较多细胞,二者在生物学特性上有诸多相似之处。目的:比较脂肪来源和骨髓来源的2种间充质干细胞的成软骨分化能力。方法:选取3月龄新西兰大白兔,取腹部脂肪,分离提取脂肪干细胞。取兔双侧股骨,采用贴壁筛选法分离提取骨髓间充质干细胞。绘制第3代脂肪干细胞和骨髓间充质干细胞的生长曲线,比较2种细胞的倍增时间。对第3代脂肪干细胞和骨髓间充质干细胞进行成软骨诱导,分别对诱导14d的2种细胞行甲苯胺蓝染色和Ⅱ型胶原免疫组化染色。结果与结论:骨髓间充质干细胞原代细胞呈聚集样生长,而脂肪干细胞原代细胞呈单个、散在生长。脂肪干细胞增殖速度要快于骨髓间充质干细胞,倍增时间短于骨髓间充质干细胞h。2种细胞成软骨诱导14d后,均表达糖胺聚糖和Ⅱ型胶原,且骨髓间充质干细胞成软骨诱导后表达Ⅱ型胶原水平高于脂肪干细胞。说明脂肪干细胞与骨髓间充质干细胞体外增殖皆迅速且稳定,但是脂肪干细胞的生长增殖速度更快。单层培养时,特定条件下,脂肪干细胞与骨髓间充质干细胞均能向软骨细胞转化,但是骨髓间充质干细胞比脂肪干细胞具有更高的潜能。

髌骨纵行骨折的机理及误诊原因探讨

报告髌骨纵行骨折20例，其中误诊12例，部分病例发生机理不能用三点挤压原理解释。作者对误诊原因和发生机理进行分析，认为对髌骨纵行骨折的认识不足，缺乏必要的体格检查，不摄髌骨轴位片是误诊的主要原因。当屈膝＜90°时，髌前方向外的暴力作用在髌骨上，先使内侧特别面与股骨内髁接触，外侧面悬起，暴力的继续作用和股外侧肌的强力收缩使髌骨外1／3纵行骨折。

卷帘式椎管扩大成形术的设计与临床应用

卷帘式椎管扩大成形术的设计与临床应用安荣泽，史可中，刘毅，蔡玉祥，何兴川，彭刚，敖竣，杨圣经后路椎管内手术如何才能既彻底去除病变，又保持后柱完整，预防术后脊柱不稳，国内外学者都在尝试［１～５］。我们应用了“卷帘式椎管扩大成形术”，自１９９０年１２月至...

改良诱导方案诱导SD大鼠脂肪源性干细胞定向分化为软骨细胞

背景:软骨组织工程是骨科研究的热点,在种子细胞的研究上由于软骨细胞存在老化现象更多的研究集中在干细胞向软骨细胞分化上。分化条件经历单细胞因子、联合细胞因子及贯续细胞因子的应用。目的:观察改良诱导方案诱导SD大鼠脂肪源性干细胞定向分化为软骨细胞的能力。设计、时间及地点:观察性实验,于2008-06/12在遵义医学院珠海校区中心实验室完成。材料:SPF级健康SD大鼠5只,鼠龄18～22d,体质量约25g,用于脂肪干细胞的培养基扩增。方法:在无菌条件下从SD大鼠腹股沟区取皮下脂肪组织约3g,Ⅰ型胶原酶消化后,1000r/min离心10min,待细胞长满瓶底80%时用2.5g/L胰蛋白酶消化,按1:2或1:3比例传代培养。加入软骨诱导培养基14d后阿新蓝染色及Ⅱ型胶原免疫组织化学检测脂肪干细胞向软骨细胞的诱导分化。主要观察指标:流式细胞仪检测大鼠脂肪干细胞表面CD44、CD45和CD49d的表达。结果:SD大鼠脂肪组织分离培养出的细胞经流式细胞仪检测CD44、CD49d表达阳性,CD45表达阴性。加入软骨诱导培养基定向诱导72h后,细胞生长缓慢,逐渐变成圆形,并渐渐有软骨结节形成;诱导分化2周后,阿新蓝染色及Ⅱ型胶原免疫组织化学检测阳性。结论:SD大鼠脂肪组织能够分离培养出脂肪干细胞,生物学特性与骨髓间充质干细胞相似,能向软骨细胞分化。

脂质体介导人骨形态发生蛋白2基因转染对兔脂肪干细胞生长增殖的影响

背景:脂质体对细胞具有毒副作用,而外源性基因的胞内导入亦在细胞的代谢方面有所影响,因此脂质体介导人骨形态发生蛋白2基因转染脂肪干细胞对其在生长、增殖方面有无显著影响值得探讨。目的:观察脂质体介导的人骨形态发生蛋白2基因转染对兔脂肪干细胞生长、增殖的影响。方法:从兔脂肪组织中提取脂肪干细胞,体外培养传代,取第4代细胞分别转染人骨形态发生蛋白2基因和增强型绿色荧光蛋白基因,倒置显微镜下连续观察转染后的细胞形态变化及生长情况。荧光显微镜下计数转染后48h可发绿色荧光细胞的个数估算瞬时转染效率,MTT法绘制染后细胞的生长曲线,并计算群体倍增时间。结果与结论:转染后48h,细胞体积变大,胞浆丰富,部分呈圆形或椭圆形改变。荧光显微镜下计数瞬时转染率为(18.0±0.42)%。MTT法绘制细胞生长曲线发现:转染后细胞较未转染的细胞生长速率略慢,但转染与未转染组细胞的生长曲线大致一样,均呈"S"形,且两者的总体趋势变化不大。转染后人骨形态发生蛋白2组的细胞群体倍增时间为55.51h,EGFP组群体倍增时间约为53.58h,未转染组的群体倍增时间46.10h,差异无显著意义(P>0.05)。提示脂质体可以介导人骨形态发生蛋白2基因和绿色荧光蛋白基因转染兔脂肪干细胞,并对细胞的生长、增殖无明显影响。

汉防己甲素治疗急性脊髓损伤的实验研究

目的 探讨汉防己甲素 (Tetrandrine ,Tet)对急性脊髓损伤 (Acutespinalcordinjuries,AS CI)的保护作用。方法 74只Wistar大鼠随机分为 4组 ,用改良Allen’s打击法制备大鼠截瘫模型 ,造模前各组分别投给相应的药物 ,伤后 1h、4h取损伤区脊髓组织进行形态学观察和生化指标测定。结果 汉防己甲素能明显降低组织钙总量和MDA含量 ,防止镁总量和SOD含量的下降 ,稳定 6 Keto PGF1a/TXB2 的比值 ,减轻组织病损。结论 Tet对ASCI有保护作用 ,其作用机制为①扩张微血管 ,改善微循环 ,逆转ASCI后早期缺血倾向 ;②抗氧自由基 ,减轻组织过氧化损伤 ,稳定生物膜性结构 ;③减少ASCI后钙内流 ,从而阻断继发性损伤的链式反应。

卷帘式椎管扩大成形术41例报告

本文报告作者使用的一种能保留后柱完整的经后路椎管成形术。方法是将带角度的平凿将椎板从两侧斜行切断，连用棘上韧带、棘间韧带、棘突一起向上翻起，然后对椎管狭窄者行扩大成形，肿瘤者摘除病灶，去除病变后将椎板复位固定。临床使用41例近期效果满意。作者认为新手术有如下优点；①保持术后后柱完整，避免脊柱失稳。②减少硬膜周围疤痕形成。③器械简单，方法简便。作者强调：原有脊柱不稳者要作椎体间植骨，对椎管内肿瘤、凿开椎板时一定要小心仔细。

关节滑膜软骨瘤病

本文叙述12例滑膜软骨瘤病的病因、病理,临床表现,诊断与鉴别诊断及治疗方法,经随访,疗效满意。滑膜软骨瘤病是一种滑膜疾病,主要表现为关节滑膜化生形成多数软骨小体,偶见于滑囊或腱鞘内,软骨小体不断生长,或脱落入关节腔,逐渐长大,部分发生钙化或骨化,故亦称滑膜骨软骨瘤病。本病应尽早诊断,手术为本病唯一有效的的治疗方法,效果良好,取出游离体及切除病变滑膜,避免了游离体长期存在于关节内引起的继发性病变,给病人造成难以弥补的伤害。

髂骨骨膜移植股骨头软骨再造

我院自1989年起开展骨膜移植股骨头软骨再造术．早期均以肋骨做骨膜源，可取量小，且有穿破胸膜之忧。为此，我们设计了同一切口内的髂骨骨膜移植股骨头软骨再造术。临床使用16例表明有如下优点：①同一切口，就近取材，不增加创伤②骨膜可取量大③无重要脏器、血管、神经损伤之虞。④髂骨骨膜可大片取下，亦是其它大关节软骨再造（如髌骨）良好的骨膜源。

重组pcDNA3.1-hBMP-2转染兔脂肪干细胞体外诱导的成骨分化

背景:骨形态发生蛋白2具有很强的诱导干细胞成骨活性。目的:构建人骨形态发生蛋白2基因真核表达载体,探讨其转染脂肪干细胞后的成骨效果。方法:通过噬菌斑原位杂交筛选人混合细胞cDNA文库获得人骨形态发生蛋白2基因,与真核表达载体pcDNA3.1-连接,构建重组质粒pcDNA3.1-hBMP-2。利用脂质体LipofectamineTM2000分别介导人骨形态发生蛋白2基因、EGFP基因转染第4代脂肪干细胞,并经G418进行筛选。结果与结论:酶切鉴定及DNA测序结果证实重组质粒pcDNA3.1-hBMP-2构建成功。经计算脂质体介导的脂肪干细胞瞬时转染率为(18.0±0.42)%,并经过G418筛选后获得了稳定转染的细胞。细胞生长曲线表明转染后对脂肪干细胞生长、增殖无明显影响。ELISA检测发现人骨形态发生蛋白2组的人骨形态发生蛋白2因子表达量均高于EGFP组及未转染组,且能够稳定表达。经人骨形态发生蛋白2基因转染的脂肪干细胞的Ⅰ型胶原含量、碱性磷酸酶活性以及钙结节数目均比EGFP组及未转染组有明显升高。

非公有制社区卫生服务机构参与公共卫生服务补偿机制研究

目的调查珠海市非公有制卫生服务机构参与公共卫生的基本情况,总结政府补偿的经验。方法采用描述性统计分析方法,对珠海市非公有社区卫生服务中心(站)、农村卫生站和医疗机构提供公共卫生服务的种类与数量及补偿情况进行了分析。结果 (1)非公有制社区卫生服务中心开展了6大项公共卫生服务全部项目,所有农村卫生服务机构基本上只开展公共卫生中的医疗项目及很少的预防服务,非公有制医院参与6大项公共卫生服务部分项目,但工作量极少仅占总量的3.42%,未参与预防服务。但都参与了突发性公共卫生事件处理如禽流感、非典和三聚氰氨奶粉等检查、治疗和预防。(2)政府对城市社区开展公共卫生服务的情况进行了部分补偿,补偿幅度与公有社区相当,但对农村社区和公有制医疗机构参与公共卫生服务补偿教少。结论珠海市非公有制社区卫生服务中心(站)农村卫生站和医疗机构在公共卫生服务中承担着重要的角色和作用,政府在补偿城市社区参与的公共卫生方面已经初步探索出成功的经验,但尚无对医疗机构、农村社区参与公共卫生服务的补偿政策。

无X线定位经椎弓根螺钉脊柱内固定的探讨

在无X线监视下行经椎弓根螺钉脊柱内固定术48例,置钉214枚。术后X线片检查置钉位置优良149枚(69.6％),差65枚(30.4％),错0枚。作者认为熟悉椎弓根的定性定量解剖是正确置钉的基础,“盲目”置钉法对无X线监护条件的医院开展本术式有一定的实用价值。

带旋髂深血管骨膜骨瓣移植治疗青壮年股骨颈骨折

目的 :探讨青壮年股骨颈骨折采用AO加压螺纹钉内固定 ,带旋髂深血管骨膜骨瓣移植的疗效。方法 :经髋关节S -P切口 ,股骨颈骨折行切开复位 ,3枚加压螺纹钉固定 ,带旋髂深血管蒂骨膜骨瓣移植于股骨颈骨折处 30例。结果 :随诊 2 9例 ,时间 1～ 8年 ,2 7例疗效良好 ,优良率达 93%。 1例股骨头缺血坏死 ,1例骨折不愈合。结论 :AO加压螺钉内固定加带旋髂深血管蒂的髂骨骨膜骨瓣移植术是治疗青壮年股骨颈骨折的有效方法 ,局部血供丰富 ,骨折愈合率高 ,减少了并发症的发生。

肩胛盂骨折后方手术入路的解剖及临床应用

目的 :为肩胛盂骨折切开复位内固定提供一种较好的手术入路 ,并为临床应用提供解剖学基础。方法 :利用 2 0具经动脉灌注红色乳胶的成人上肢标本 ,对肩关节后方的有关解剖结构 ,即三角肌后部、冈下肌、小圆肌、大圆肌的形态、比邻及其间的神经界面等进行了观测 ,临床应用 4例。结果 :三角肌和冈下肌与小圆肌之间存在神经界面。沿小圆肌上缘与冈下肌之间进入 ,可避免损伤腋神经和旋肱后、旋肩胛血管。结论 :后方入路对肩胛盂横行、纵行和粉碎骨折都适合 ,是肩胛盂骨折的最好手术途径。

经喙突和肩峰行肩关节外固定术的应用解剖

目的 :通过对喙突和肩峰的解剖学观测探讨经喙突和肩峰行肩关节外固定术的可行性和可靠性 ,为临床治疗肩关节疾病提供一种新的手术方法。方法 :利用 18具经动脉灌注红色乳胶的成人上肢标本 ,对喙突和肩峰的宽度、厚度、长度、轴线的倾斜角度及进钉深度等做了解剖学观测。结果 :喙突宽 ( 17.65± 1.82 )mm ,厚 ( 13 .11± 2 .11)mm ,长 ( 4 5 .43± 4.5 2 )mm ,外倾角 ( 3 0 .2± 8.5 45 )° ,下倾角 ( 2 2 .9± 4.2 2 9)°。肩峰宽 ( 2 4.71± 3 .75 )mm ,厚 :外侧 ( 8.67± 1.3 4)mm ,内侧 ( 11.81± 1.3 3 )mm ,长 ( 4 8.2 1± 4.68)mm ,外倾角 ( 10 .81± 4.3 3 6)° ,上倾角 ( 16.3 16± 6.3 95 )°。结论 :肩关节外固定术效果可靠 ,喙突和肩峰可以接受直径 5mm的螺钉 ,其形态学资料有助于合理选择外固定器、准确确定进钉点的位置和方向、保证肩关节外固定术的成功。

汉防己甲素对大鼠急性脊髓损伤的作用及意义

目的:探讨汉防己甲素(Tet)对急性脊髓损伤(ASCI)的保护作用及作用机制。方法:81只大鼠随机分为三组:生理盐水对照组(NS组)、汉防己甲素治疗组(Tet组)和甲基强松龙治疗组(MP组),每组27只。用加速型Allen's打击法制成脊髓急性损伤模型,监测大鼠ASCI后及用药后的血压变化,测定损伤区脊髓Ca2+、MDA含量;采用氢清除法测定脊髓伤区血流量(SCBF)的变化;连续观测6周ASCI后运动功能评分情况;ASCI后4h、8h、6周取伤区标本进行组织病理检查。结果:ASCI后10s各组动物的MABP显著升高,1min内迅速降至正常水平,之后Tet组舒张压、平均动脉压明显降低(P<0.05),而收缩压降低不明显(P>0.05);ASCI后SCBF下降,但Tet组和MP组的SCBF较NS组高(P<0.05);损伤区Ca2+及MDA含量Tet组和MP组均较NS组低,神经功能评分均较NS组高。结论:Tet能改善微循环,防止SCBF的减少;抗脂质过氧化损伤,减少脂质过氧化物MDA的生成;减轻Ca2+的局部积聚,防止钙超载,阻断继发性损伤的链式反应,减轻组织继发性损伤。对实验性急性脊髓损伤有保护作用。