肝内胆管癌细胞X染色体耦联锌指蛋白的表达及复方苦参注射液的调控作用

目的探讨X染色体耦联锌指蛋白(ZFX)在肝内胆管癌(ICC)细胞中的生物学作用和复方苦参注射液对ICC细胞的生长控制。方法采用组织微阵列技术、免疫细胞化学(IHC)、逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、蛋白质印迹(WB)法检测ZFX在ICC癌组织及相应癌旁肝组织中的表达状况;通过培养ICC细胞、慢病毒介导RNA干扰技术平板克隆、CCK-8细胞增殖检测分析ICC细胞中ZFX的功能。结果癌组织中的m RNA显著高于其对应癌旁组织和正常肝组织(P<0.05);ZFX在癌组织中表达状态很高,对应的癌旁组织出现相应阳性染色区域,但癌旁组织中ZFX蛋白高低表达无明显差异;慢病毒介导的shRNA感染癌细胞能完全阻止ZFX的表达;正常培养条件下,ZFX蛋白的干扰对LM3细胞和RBE细胞的生长无影响;在培养基中除去糖成分可阻止干扰细胞和对照细胞的繁殖;将培养基中的血清降低至3%时,干扰ZFX的细胞增殖能力显著高于对照细胞(P<0.05);干扰ZFX蛋白的细胞在低血清环境下增殖和存活能力较强;p-JNK,p-p38,p-ERK在干扰细胞的磷酸化水平高于对照细胞(P<0.05)。结论ZFX蛋白在ICC癌组织中呈现高表达状态,对ICC细胞的增殖和对抗凋亡等生物行为产生影响,从而影响ICC的进程。复方苦参注射液可通过影响ZFX在MAPKs的信号通路来抑制胆管癌细胞的生长。