外源腐胺对连翘两个变种愈伤组织诱导、增殖及褐化的影响

目的:研究外源腐胺对药用连翘愈伤组织诱导、增殖及褐化的影响,为细胞培养技术直接生产药效成分提供支撑。方法:以垂枝连翘和三叶连翘为试材,以MS为基本培养基,添加不同浓度腐胺处理,对叶片、花瓣和果实3种外植体进行接种培养,调查愈伤组织的诱导、增殖及褐化情况。结果:添加适宜浓度的腐胺均能显著提高外植体的愈伤组织诱导率和增殖率,明显减轻褐化。垂直连翘和三叶连翘的叶片外植体添加腐胺的最佳浓度分别为5 mg/L、10 mg/L,诱导率达到最高分别为43.49%、51.59%,增殖率亦最高分别为3.85倍、3.90倍,褐化指数0级;花瓣外植体添加腐胺的最佳浓度均为15 mg/L,诱导率达到最高分别为53.49%、56.07%,增殖率亦最高分别为4.05倍、4.11倍,褐化指数0级;果实外植体添加腐胺的最佳浓度均为25 mg/L,诱导率达到最高分别为59.76%、63.10%,增殖率亦最高分别为4.16倍、4.38倍,褐化指数0级。叶片、花瓣外植体均表现腐胺低浓度的促进作用和高浓度促进作用减弱的效应,叶片较花瓣促进作用减弱更为明显。果实外植体均未出现高浓度促进作用减弱的现象。添加腐胺对3种不同外植体的愈伤组织诱导率、增殖率影响效果依次为果实最高,花瓣次之,叶片最低,且三叶连翘诱导、增殖效果好于垂枝连翘。结论:外源腐胺能有效促进连翘愈伤组织诱导率、增殖率,并不同程度地减轻或抑制褐化,可为药用连翘的细胞大量培养生产药效成分提供指导。