国外人类遗传资源监管立法借鉴与启示

人类遗传资源作为一个国家或地区重要的生物资源,日益受到国际上诸多国家的重视和关注,诸多国家甚至将其上升至国家主权的维度。作为一个拥有着丰富多样性人类遗传资源的大国,中国的相关监管工作相较国外起步较晚,但发展较快。放眼世界,中国的人类遗传资源监管仍然有进一步完善和发展的空间。通过对一些国家人类遗传资源监管立法的考察,详细梳理归纳其先进经验和亮点措施,总结其深层次的立法导向,从人类遗传资源立法位阶高级化和法律效力增强化、政策法规系统化和体系化、平台和相关标准统一化、突出伦理法治理念、强化反歧视保障、重大人遗家系资源和国家特殊保护地区人类遗传资源的特别保护以及设立国际局部地区的人类遗传资源原则性共识或协定七个方面进行了详细分析和评价,以期对中国人类遗传资源监管政策和法律体系的构建提供借鉴。

BALB/c裸鼠血管瘤模型的建立及普萘洛尔对其瘤体的抑制作用

目的建立BALB/c裸鼠血管瘤模型,探讨普萘洛尔对血管瘤裸鼠移植瘤瘤体生长的影响。方法手术切除血管瘤患儿血管瘤组织,经皮肤切口移植于40只BALB/c裸鼠建立血管瘤模型。移植后第45天将40只荷瘤小鼠随机分为5组:治疗组1,腹腔注射0.01%普萘洛尔溶液0.4 mL;治疗组2,腹腔注射0.05%普萘洛尔溶液0.4 mL;治疗组3,腹腔注射0.1%普萘洛尔溶液0.4 mL;治疗组4,经口灌胃0.01%普萘洛尔溶液0.4 mL;对照组,腹腔注射无菌生理盐水0.4 mL;各组给药均为1次/d,持续1周。于干预前及干预后第7、14、21天测量各组瘤体体积和小鼠体质量并进行比较;干预第22天切取瘤体行HE染色观察对比病理变化。结果干预后第7、14、21天,治疗组1、2、3、4瘤体体积均较干预前小,且治疗组1、2、3较对照组瘤体体积小(P均<0.05)。干预后第14、21天,治疗组3较治疗组1、2瘤体体积小(P均<0.05),治疗组1较治疗组4瘤体体积小(P均<0.05)。HE染色后光镜下可见各治疗组血管瘤内皮细胞分散凌乱、界限不清,且普萘洛尔浓度越高,对内皮细胞增殖抑制作用越明显。干预后第7、14、21天,治疗组1、2、3及对照组两两相比,治疗组1与治疗组4相比,裸鼠体质量比较差异无统计学意义。结论成功建立BALB/c裸鼠血管瘤模型;普萘洛尔可抑制模型裸鼠瘤体生长,对裸鼠机体无明显损害,且腹腔注射较灌胃效果显著。

中国漠王族干标本DNA提取及部分类群发育关系

为了降低昆虫分子系统学研究中的成本,提高资源利用率,本实验利用干制标本提取基因组DNA.通过对河北大学馆藏30年的漠甲亚科不同保存期干标本与液浸标本DNA的提取和特定基因片段PCR(聚合酶链式反应)扩增,获得一致效果.通过细胞色素B(Cytb)基因片段序列信息构建系统树并与传统分类学做比较,探讨了漠王族部分种类的系统进化关系,研究结果支持Reitter(1893)建立的Platyopini和Pimeliini是2个独立族的观点,而不同意Beutle等(2005)将它们合并为1个族的观点.研究结果为利用鞘翅目昆虫干标本进行分子系统学研究提供了借鉴.

鲍曼不动杆菌院内下呼吸道感染患者发生多重耐药的危险因素分析

目的调查鲍曼不动杆菌引起的院内下呼吸道感染患者的病原菌药敏谱及发生多重耐药的危险因素。方法收集2017年院本部确诊为鲍曼不动杆菌引起的院内下呼吸道感染标本184例,其中31例非多重耐药鲍曼不动杆菌(N-MDRAb)作为病例组,153例多重耐药鲍曼不动杆菌(MDRAb)作为对照组。通过病例对照研究的多因素分析,找到发生多重耐药的独立危险因素,为更好地防控院内多重耐药菌感染发生提供参考。结果单因素显示:秋冬季感染、感染前入院>4 d、感染前留置导尿管和感染前使用抗生素者NMDRAb检出率高,差异有统计学意义(P<0.10);2组间其他一般临床资料均具有可比性,差异无统计学意义(P>0.05)。多因素分析秋冬季比春夏季更容易发生NMDR感染,是AB-NP患者发生NMDR的独立易感因素。2组均对头孢哌酮舒巴坦、米诺环素和复方新诺明中度敏感,对多粘菌素B高度敏感。结论在鲍曼不动杆菌引起的院内下呼吸道感染患者中,多粘菌素B为治疗首选药物,在春夏季加强消毒灭菌力度作为今后有效控制院内多重耐药的工作重心。

耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌院内肺炎的易感因素研究

目的探讨如何针对耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(carbapenem-resistant Klebsiella pneumoniae,CRKP)院内肺炎感染的易感因素进行有效的防控。方法以性别、年龄±2岁作为匹配因素,采用1∶1个体匹配病例对照研究,随机抽取2018年确诊的CRKP引起的院内肺炎成年患者85例作为病例组,并筛选同期肺炎克雷伯菌(Klebsiella pneumoniae,KP)引起的院内肺炎中对碳青霉烯类(carbapenem,CA)敏感的成年患者85例作为对照组。利用电子病历收集发生院内肺炎感染前的易感因素进行调查。采用二分类Logistic回归筛选出引起感染的独立易感因素。结果病例组患者主要分布在麻醉ICU病房,占32.94%。单因素分析结果显示:病例组冬季感染、呼吸机使用时间≥4 d、导尿管留置时间≥4 d、中心静脉置管时间≥4 d、双联非CA抗生素使用时间≥4 d占比高于对照组(P均<0.05)。二分类Logistic回归分析结果显示,冬季、呼吸机使用时间≥4 d、导尿管留置时间≥4 d和中心静脉置管时间≥4 d为病例组的独立易感因素(均P<0.05)。病例组对阿米卡星和复方新诺明敏感性较好(耐药率均<60.00%);对替加环素敏感性最好(耐药率均为0.00%)。对照组对头孢哌酮舒巴坦、美罗培南、哌拉西林他唑巴坦和替加环素的敏感性较好(耐药率均<10.00%);对亚胺培南、比阿培南、头孢替坦和阿米卡星的敏感性最好(耐药率均为0.00%)。结论医务人员应在冬季,针对使用呼吸机、导尿管留置和中心静脉置管时间均≥4 d的住院患者做好两个卫生(严格执行手卫生和增加环境消毒次数)、两个检测(做好患者检测和环境检测)和两个隔离(执行接触隔离和患者隔离),一旦发现病例组患者,应结合抗菌药物的耐药,选取敏感的抗菌药物积极治疗。

普萘洛尔通过长链非编码RNA核旁丛组装转录本1靶向微小RNA-194-5p调控血管瘤内皮细胞增殖

目的探讨普萘洛尔通过长链非编码RNA核旁丛组装转录本1(lncRNA NEAT1)靶向微小RNA(miR)-194-5p调控血管瘤内皮细胞(HemECs)增殖的作用。方法收集2021年3月至2022年8月在河北医科大学第二医院小儿外科手术切除的血管瘤标本20例,根据Mulliken标准分为增生期组和消退期组。采用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)方法检测两组瘤体中NEAT1和miR-194-5p水平。制备HemECs,细胞计数试剂盒(CCK-8)试验检测敲低和过表达NEAT1对HemECs增殖影响。双荧光素酶酶报告基因实验及RT-qPCR验证miR-194-5p与NEAT1之间的相互作用。不同浓度普萘洛尔给药后,CCK-8试验检测细胞活性,5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核苷(EdU)法检测细胞增殖,RT-qPCR方法检测NEAT1和miR-194-5p水平。两组间比较采用独立样本t检验进行分析,多组间比较采用单因素方差分析和重复测量方差分析,采用Spearman分析确定各指标间相关性。结果RT-qPCR结果显示增生期血管瘤NEAT1表达高于退化期血管瘤(17.43±5.38比8.82±3.70,t=4.176,P<0.01);而增生期血管瘤miR-194-5p表达低于退化期血管瘤(0.28±0.11比0.41±0.11,t=2.692,P<0.01)。CKK-8检测结果显示,si-NEAT1组细胞活性低于si-NC组(0.86±0.05比1.11±0.03,t=7.794,P<0.01);OE-NEAT1组细胞活性高于OE-NC组(1.33±0.01比1.11±0.05,t=8.072,P<0.05)。Si-NEAT1组miR-194-5p表达水平高于si-NC组(2.88±0.33比1.14±0.47,t=5.206,P<0.01);OE-NEAT1组miR-194-5p表达水平低于OE-NC组(0.43±0.06比1.24±0.11,t=10.830,P<0.01)。双荧光素酶报告基因实验结果显示miR-194-5p和NEAT1-WT共转染组荧光素酶活性高于miR-NC和NEAT1-WT共转染组(0.35±0.05比0.65±0.04,t=5.273,P<0.01)。OE-NEAT1+普萘洛尔组细胞EdU染色阳性细胞率显著低于OE-NEAT1组和OE-NC组(35.97±1.09比69.66±2.85、51.89±1.09,F=65.100,P<0.01),OE-NEAT1+普萘洛尔组NEAT1、miR-194-5p表达量均与OE-NEAT1组比较,差异有统计学意义(1.63±0.30比3.94±0.50,t=6.851,P<0.01;0.86±0.26比0.37±0.03,t=3.213,P<0.05)。结论普萘洛尔可通过NEAT1靶向miR-194-5p调节HemECs增殖,NEAT1可能作为婴幼儿血管瘤分子治疗的潜在靶点。

TSP-1和NF—κB信号通路在普萘洛尔对血管瘤内皮细胞抑制机制中的作用

目的探讨凝血酶敏感蛋白-1（thrombospondin-1，TSP-1）和核因子κB（nuclear factor-kappaB，NF-κB）信号通路在普萘洛尔对血管瘤内皮细胞抑制机制中的作用，完善普萘洛尔治疗血管瘤机制，为其临床治疗提供新靶点。方法手术获取增生期血管瘤标本，孵育消化制成细胞悬液，流式细胞仪分选出CD31阳性血管瘤内皮细胞传代培养。加入不同浓度普萘洛尔（0、25、50、100、150、200、250μmol／L）溶液，培养24h、48h及72h后，分别加入CCK-8培养液和BrdU标记液，酶标仪检测450nm处吸光度判定细胞活性和增殖情况；Westernblot检测普萘洛尔干预前后TSP-1及NF-κB通路蛋白表达情况；细胞荧光双标后，激光共聚焦显微镜观察干预前后TSP-1和NF-κB通路激活失活情况。所有数据应用SPSS13．0统计软件进行分析。结果流式细胞仪分选CD31阳性细胞率达98．0％。加入普萘洛尔后，随着培养时间延长，细胞活性和增殖状态受抑越明显。普萘洛尔浓度达100-150μmol／L时，细胞活性和增殖开始明显受抑，和对照组相比差异有统计学意义（P〈0．05），以72h时为著；TSP-1及其受体CD36表达量随着普萘洛尔浓度的增加逐渐增多，而NF-κBp65及p-IκBα、p-IKKβ表达量开始逐渐减少（P〈0．05）。两个通路存在负向调控，TSP-1逐渐激活时，NF-κBp65逐渐失活。结论普萘洛尔可能通过促进TSP-1诱导的血管生成抑制和／或阻断NF-κB介导的促血管生成来治疗婴幼儿血管瘤，两个通路存在负向调控作用。