对铜绿丽金龟具有高致病力的昆虫病原线虫的筛选

为筛选对铜绿丽金龟Anomala corpulenta幼虫具有生防潜力的昆虫病原线虫品系,测定了9个昆虫病原线虫品系对铜绿丽金龟1龄幼虫的致病力,以及不同施用剂量、环境温度及土壤相对湿度条件对线虫致病力的影响。生测结果表明,樱桃异小杆线虫品系Heterorhabditis beicherriana D26-6对铜绿丽金龟幼虫致病力最高,处理11 d后的校正死亡率达到了98.3%;对线虫D26-6致病力的单因子测定发现,侵染铜绿丽金龟幼虫的最佳剂量为150 IJs/头、最佳温度范围为20~30℃、最佳土壤湿度为18%,有较好的开发应用潜力。

抗、感紫花苜蓿品种对豌豆蚜游离氨基酸的影响

昆虫无法合成其生长发育过程中全部的氨基酸,必须从食物中或其他途径获取,而植物韧皮部氨基酸被认为是蚜虫生产性能的关键限制因素。为明确抗蚜紫花苜蓿品种对豌豆蚜(Acyrthosiphon pisum)游离氨基酸含量的影响,本研究通过液相-质谱联用仪测定了豌豆蚜取食抗、感紫花苜蓿(Medicago sativa)品种(抗蚜品种‘甘农5号’和感蚜品种‘猎人河’)后游离氨基酸的含量及供试植物材料游离氨基酸的含量。结果表明:‘甘农5号’色氨酸含量显著高于‘猎人河’(P<0.05),差异倍数为2.25;豌豆蚜取食‘甘农5号’后天冬氨酸的含量显著高于豌豆蚜取食‘猎人河’后的含量(P<0.05),差异倍数为1.48;豌豆蚜取食‘甘农5号’后脯氨酸、甘氨酸、组氨酸和总氨基酸的含量显著低于豌豆蚜取食‘猎人河’后的含量(P<0.05),差异倍数分别为0.31、0.81、0.61和0.86。说明抗蚜紫花苜蓿品种‘甘农5号’可导致豌豆蚜的游离氨基酸含量发生变化,且可通过影响豌豆蚜的脯氨酸和总氨基酸含量来影响豌豆蚜的生存和发展。研究结果可为豌豆蚜的防治及优质抗蚜苜蓿种质资源的筛选提供一定的理论基础和依据。

单宁酸对豌豆蚜谷胱甘肽-S-转移酶活性与基因表达的影响

本研究通过测定单宁酸(2 g·L^(-1))处理豌豆蚜(Acyrthosiphon pisum) 48 h后体内谷胱甘肽-S-转移酶(GST)活性以及不同组织GST基因转录水平的变化,以明确单宁酸对GST活性以及基因表达的影响。结果表明:豌豆蚜取食单宁酸(2 g·L^(-1)) 48 h后,GST活性下降。相比不处理对照,经单宁酸处理后,豌豆蚜头部有7个GST基因上调表达,其中ApGST104、ApGSTX1上调表达3倍左右;胸部有10个GST基因上调表达,其中ApGSTD6上调表达6.4倍;腹部有10个GST基因上调表达,其中ApGST101、ApGST105上调5倍左右;中肠有9个GST基因上调表达,其中ApPGST105上调表达3.2倍。从结果可以看出,单宁酸对豌豆蚜GST基因的表达产生了影响,部分GST基因显著上调表达(P <0.05),表明GST基因可能在豌豆蚜对单宁酸的代谢中发挥重要的作用。

极端高温对截形叶螨体内海藻糖含量及海藻糖转运蛋白基因的影响

【目的】明确高温对截形叶螨(Tetranychus truncatus)海藻糖转运蛋白基因的影响,为有害生物的绿色防控提供理论依据。【方法】根据高温诱导下的截形叶螨转录组数据获取两条海藻糖转运蛋白基因TtTret1-like和TtTret1的CDS序列和蛋白氨基酸序列;利用ExPASy、ProScale、MEGA等分析工具对TtTret1-like和TtTret1进行生物信息学分析;利用实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)技术分析TtTret1-like和TtTret1在截形叶螨不同发育阶段及不同高温(38、42、46、50℃)处理下的表达特性;采用微量法测定不同高温处理下截形叶螨的海藻糖含量;利用RNA干扰(RNAi)技术沉默TtTret1-like和TtTret1,探究其在应对高温中的功能。【结果】生物信息学分析表明,TtTret1-like和TtTret1的CDS全长分别为1389和1569 bp,分别编码463和523个氨基酸,预测的蛋白分子量分别为50189.03和57358.10 Da,等电点分别为8.87、8.70。TtTret1-like和TtTret1均为碱性氨基酸和疏水性氨基酸且同属于不稳定蛋白;二级结构预测为螺旋和卷曲结构;两个海藻糖转运蛋白均具有协同转运蛋白超家族(major facilitator superfamily,MFS)的保守结构域及12个跨膜结构域。氨基酸序列相似性和系统发育分析表明,TtTret1-like和TtTret1与蛛形纲其他物种海藻糖转运蛋白序列的一致性较高,尤其与二斑叶螨(T.urticae)的亲缘关系最近。TtTret1-like在卵期、幼螨期和成螨期的表达量较高;TtTret1在幼螨期高表达。随处理温度的升高,TtTret1-like的表达量大致呈上升趋势,在50℃时表达量最高;而TtTret1的表达量随处理温度的升高先上升后下降,在42℃时表达量达到最高;高温胁迫后截形叶螨体内的海藻糖含量显著升高。沉默TtTret1-like和TtTret148 h后,截形叶螨体内整体海藻糖含量上升,但血淋巴海藻糖含量下降;用50℃高温处理截形叶螨2 h,然后恢复至96 h时,截形叶螨存活率分别为11%和46.67%,显著低于对照组。【结论】截形叶螨TtTret1-like和TtTret1在其抵御高温胁迫过程中具有重要的作用。

多杀菌素纳米水剂防治2种储粮害虫的应用研究

采用拌粮法对已感染锯谷盗和锈赤扁谷盗的稻谷原粮进行处理,以明确多杀菌素新剂型对2种储粮害虫的杀虫效果。实验结果表明,锯谷盗对多杀菌素纳米水剂的敏感性低于锈赤扁谷盗,供试药剂对锯谷盗和锈赤扁谷盗的最高校正死亡率分别为71.70%和90.29%。测定了不同浓度的多杀菌素纳米水剂与甲基嘧啶磷乳油复配防治效果,结果表明,锯谷盗和锈赤扁谷盗的校正死亡率分别在82.90%和97.95%以上,均显著高于单剂使用多杀菌素纳米水剂的防治效果。研究发现多杀菌素纳米水剂的防治效果受昆虫种类、药剂浓度、处理时间和环境温度等因素的影响。在实际应用中,可结合多种影响因素改进应用技术,综合制定防治策略,有效防治储粮害虫。

单宁酸对红色和绿色豌豆蚜酶活性的影响

【目的】明确单宁酸对红色和绿色豌豆蚜酶活性的影响。【方法】设不同浓度单宁酸(1 mg/L、3 mg/L、5 mg/L)分别饲喂两种色型的5 d龄豌豆蚜,处理不同时间后测定豌豆蚜体内超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、羧酸酯酶(CarE)及细胞色素P450s酶(CYP450)活性。【结果】豌豆蚜取食不同浓度单宁酸后,体内4种酶的响应程度不同。红色型豌豆蚜CarE与CYP450酶活性均在24 h处理的单宁酸浓度为3 mg/L时达最大值,分别为(0.029±0.002)μmol/(μg·min)和(0.006±0.0009)μmol/(μg·min),和对照间差异显著(P<0.05);绿色型豌豆蚜SOD与POD酶活性均在72 h处理的单宁酸浓度为3 mg/L时最高,分别达(0.028±0.004)μg/mg和(1.679±0.172)μg/(mg·min),和单宁酸浓度为5 mg/L的处理间差异显著(P<0.05)。【结论】红色和绿色豌豆蚜取食不同浓度单宁酸后,体内SOD、POD、CarE和CYP450酶活性均有不同程度的影响;相同处理时间,同种酶的活性在红绿色型豌豆蚜内的升高或降低程度不同;同种色型豌豆蚜取食不同浓度单宁酸后,体内不同酶的活性变化不同。

截形叶螨抗哒螨灵品系和敏感品系体内解毒酶活性的变化

【目的】通过对截形叶螨Tetranychus truncatus Ehara抗哒螨灵品系体内解毒酶活性分析和增效剂与哒螨灵混用的增效作用测定,明确截形叶螨对哒螨灵的抗性动态及抗性机理,获得抗性治理的途径。【方法】采用室内生测法培育截形叶螨抗哒螨灵品系,微量滴度酶标板测定抗性和敏感品系体内解毒酶比活性、米氏常数(Km)及最大反应速度(Vmax),再用增效醚(PBO)、顺丁烯二酸二乙酯(DEM)和磷酸三甲苯酯(TPP)进行增效作用测定。【结果】室内筛选的截形叶螨对哒螨灵产生了抗性,筛选至49代,抗性倍数达到955.25;PBO,TPP和DEM对哒螨灵药剂有不同程度的增效作用,相对增效系数分别为95.97%,85.14%和97.37%;抗哒螨灵品系体内的羧酸酯酶(CarE)、谷胱甘肽转移酶(GSTs)、多功能氧化酶(MFO)活性较敏感品系显著性提高(P<0.05),酸性磷酸酯酶(ACP)和碱性磷酸酯酶(ALP)的活性与敏感品系差异不大(P>0.05);抗性品系中的CarE,GSTs和MFO 3种解毒酶的米氏常数(Km)下降,最大反应速度(Vmax)高于敏感品系。【结论】截形叶螨对哒螨灵产生抗性可能与其体内CarE,GSTs和MFO 3种解毒酶与底物的亲和力提高和代谢能力增强有关;3种增效剂(PBO,TPP和DEM)与哒螨灵混用能提高对截形叶螨的毒杀效果。

顶孢霉Ahy1营养条件的初步研究

顶孢霉(Acremonium hansfordii)在PDA、淀粉琼脂、查彼氏、萨氏培养基和萨氏蛋黄培养基上培养,萨氏培养基和萨氏蛋黄培养基有利于菌落生长和产孢,菌落直径和产孢量显著高于其他处理,分别为7.77 cm和7.07 cm,19.02×103、25.87×103个孢子;葡萄糖、果糖、蔗糖、淀粉、甘露醇、肌醇、甘油、麦芽糖8种碳源中葡萄糖、蔗糖有利于菌落的生长和产孢,菌落直径分别为7.73 cm和7.60 cm,产孢量分别为25.96×103、25.79×103个,显著高于其他处理;蛋白胨、硝酸钠、硝酸钾、氯化铵、硝酸铵、尿素6种氮源中,蛋白胨有利于菌落的生长和产孢,菌落直径为7.60 cm,产孢量为25.91×103个,显著高于其他处理。

1.6%瑞香狼毒素水乳剂对4种蔬菜害虫的作用方式比较

采用叶片夹毒法、微量点滴法和玻片浸渍法等方法测定了1.6%瑞香狼毒素水乳剂对菜青虫、小菜蛾、豌豆蚜和截形叶螨的杀虫效果。结果表明:处理24h后,在触杀活性试验中,1.6%瑞香狼毒素水乳剂对试虫的毒力大小为菜青虫>小菜蛾>豌豆蚜>截形叶螨;在内吸活性试验中,1.6%瑞香狼毒素水乳剂对截形叶螨和豌豆蚜的LC50分别为149.22mg/L和101.76mg/L,均小于触杀作用下的219.10mg/L和165.25mg/L,表明1.6%瑞香狼毒素水乳剂对豌豆蚜和截形叶螨内吸毒性明显优于触杀作用;在胃毒活性试验中,1.6%瑞香狼毒素水乳剂对菜青虫和小菜蛾的LC50分别为342.82mg/L和407.34mg/L,而触杀作用下的LC50为58.61mg/L和75.30mg/L,表明该药剂对菜青虫和小菜蛾有较强的触杀作用和一定的胃毒作用。

“农业昆虫学”课程特色活动教学体系的构建与实施

当前,创新型人才的缺乏已成为制约我国农业高质量发展的瓶颈。涉农高校担负着培养乡村振兴合格人才的历史重任,而专业课程教学在人才培养方面发挥着基础与核心的作用。“农业昆虫学”是植物保护专业的核心专业课程。笔者在教学过程中基于“如何培养学生创新能力”这一问题,紧跟时代背景与专业特点构建了特色活动教学体系,通过丰富的教学形式与沉浸式的参与方式拓展创新实践平台,并以服务未来发展的课程价值激发学生参与积极性。本文介绍了特色活动教学体系的设计、实施及考核方式,并就初步教学成效及未来发展方向进行了分析,以期为其他专业课程教学改革提供参考。

几种病原真菌对二点叶螨、桃蚜的侵染能力研究

从兰州市刘家堡乡自然感病的菜豆蚜尸上,经分离、纯化、筛选得到5种病原真菌,即新接霉属、干尸霉属、虫瘴霉属、虫疠霉属、匍柄霉属。以室内盆栽菜豆上饲养供试桃蚜、二点叶螨为供试生物,测定了几种病原真菌的侵染力。结果表明:匍柄霉属、新接霉属、虫瘴霉属、虫疠霉属对桃蚜有较高的侵染力,接种第7 d后校正死亡率分别为74.0%、70.0%、64.0%、62.0%;对二点叶螨雌成螨的侵染力相对较低,干尸霉属、新接霉属、虫瘴霉属、匍柄霉属接种第7 d后校正死亡率分别为48%、45.9%、42.7%和38.8%。几种病原真菌孢子悬浮液处理二点叶螨螨卵后,可延长螨卵的发育历期,降低螨卵孵化率。

截形叶螨抗哒螨灵种群抗性遗传方式的研究

通过对室内选育出的截形叶螨敏感品系和抗哒螨灵品系的杂交和回交试验表明:所测得的截形叶螨正交F1SR(SS♀×RR♂)和反交F1RS(RR♀×SS♂)代的显性度DSR和DRS分别为0.40和0.60,表明抗性由不完全显性基因控制;两个D值(DRS和DSR)95%置信限有重叠,并且经t检验,两个D值不存在显著差异(P>0.05),证明截形叶螨对哒螨灵的抗性遗传为常染色体控制;回交F2代(BC1RS和BC1SR)的实际死亡率和期望值经χ2检验,无显著性差异(χ2=9.72,df=9,P>0.05),表明抗性遗传由单基因控制。

截形叶螨发育速率与温度关系模拟及对哒螨灵的抗性风险评估

为明确温度对截形叶螨抗哒螨灵种群(Py-R)和敏感种群(SS)风险发育速率的影响和评估截形叶螨对哒螨灵药剂的抗性风险,本试验在16℃、20℃、24℃、28℃、32℃和36℃6个温度梯度下,用王-兰-丁模型拟合了两个种群的世代发育速率与温度的关系曲线,并采用了数量遗传学中的域性状分析法,估算了截形叶螨对哒螨灵的现实遗传力并预测了不同选择压力下截形叶螨对哒螨灵的抗性风险。研究结果表明,根据拟合的王-兰-丁模型推导,截形叶螨敏感种群SS世代发育的最低、最高临界温度分别为10.05℃和39.24℃,抗性种群Py-R发育最低、最高临界温度分别为13.45℃和41.89℃;抗性种群各螨态的最高临界温度值均显著大于敏感种群,表明截形叶螨抗哒螨灵种群对高温的忍耐程度和适应能力大于敏感种群。估算出的截形叶螨对哒螨灵的抗性现实遗传力(h^2)为0.11,且抗性筛选前期和中期的h^2值为0.12和0.18,大于筛选后期h2值(0.08),在筛选末期,h^2值又回升到0.14。在室内选择条件(h^2=0.11)下,选择压力即杀死率为50%~90%时,预计抗性增长10倍,仅需10~23代;而在田间选择压力(h2=0.05)下,同样条件下,抗性增长也只需21~46代。因此,截形叶螨对哒螨灵存在一定的抗性风险,可与其他不具交互抗性的杀虫剂之间进行轮用,并降低选择压来延缓抗药性的产生。

温度对截形叶螨抗哒螨灵种群和敏感种群发育与繁殖的影响

为明确温度对截形叶螨抗哒螨灵种群和敏感种群的发育和繁殖的影响,本试验设置了16℃、20℃、24℃、28℃、32℃和36℃6个温度梯度,在光照16 h,相对湿度为60%±5%条件下,系统观察了敏感和抗哒螨灵实验种群在不同温度条件下的各螨态发育历期、平均寿命和产卵量情况,并根据计算出的生命参数净生殖率（R0）评价了抗性种群和敏感种群的生物相对适合度。结果表明：截形叶螨的抗性种群和敏感种群在设定的温度范围内均能完成世代发育,并且两个种群的发育历期和平均寿命均随温度的升高而缩短,如抗性种群和敏感种群在16~36℃范围内世代历期分别缩短了20.0 d和.18.7 d。在16~28℃下,即低温和适温条件下,抗性种群的各螨态发育历期、平均寿命和生殖力低于敏感种群;而在高温36℃下,除成螨期和若螨期外,与敏感种群相比,抗性种群的世代历期、平均寿命和产卵期明显延长,且平均每雌总产卵量为17.15粒,高于敏感种群（16.64粒）。以生命参数净生殖率（R0）来评价抗性种群和敏感种群的生物相对适合度,结果显示在16~28℃范围内,相对适合度Rf〈1,表明截形叶螨抗哒螨灵种群生物适合度下降,存在一定程度的生殖不利性;但在高温32℃和36℃下,Rf〉1（Rf=1.18和1.19）,具有生物适合度优势。说明截形叶螨经哒螨灵长期淘汰选择产生抗性后,对高温的适应能力增强,其存活能力和生殖力优于敏感种群。

《资源昆虫学》课程教学方法探索

《资源昆虫学》是我国农业高等院校植物保护专业本科生的选修课程,针对本科生大四第一学期开设《资源昆虫学》的实际情况,剖析了该课程教学中存在的问题,结合毕业生的就业和专业情况,从教学内容、形式和考核方式等方面进行了研究及探索,以提高学生学习兴趣和出勤率,拓展学生的知识面,增强学生的综合素质。

建立新型高校师生关系的探析

师生关系是学校关系的基础与核心。从某种角度而言,师生关系会影响学校的教学关系和教育质量。因此,建立健全符合时代要求的新型师生关系是当前教育界一项重要任务。社会环境日新月异,培养出有能力"慎思、明辨、笃行"的下一代,才是国家之幸。

浅谈高职教育中的实践教学问题

在社会经济下行,社会就业形势严峻的情况下,高职毕业生依旧凭借具备一定理论知识、实践操作能力强的优势在就业大军中被受企业青睐。实践教学在高职教育中十分重要,实践教学可以使学生将理论知识转化为实践,提前熟知职业规范、职业特性,提高学生的操作能力以及工作适应能力,从而使学生将来在工作中可以迅速将所学技能转化为生产力,缩短企业培训成本和时间,这正是高职毕业生在就业市场与其他类高校毕业生竞争的优势来源。

非植保专业昆虫学课程教学方法探索

针对非植物保护专业学生的实际情况,剖析了该课程教学中存在的问题,结合学生已学专业情况,从教学内容、形式和考核方式等方面进行了研究及探索,以激发学生学习兴趣,提高学生的动手能力,并取得较好的教学效果.

不同苜蓿品种对牛角花齿蓟马的耐害性研究

评价8个苜蓿品种在牛角花齿蓟马(Odontothrips lotiHaliday)不同密度成虫为害后的抗性表现,并从株高、分枝数及产量损失率3个方面测定,以揭示各品种对蓟马的耐害性以及苜蓿抗蓟马研究的最适接虫量。结果表明:随着虫口密度的增大,各苜蓿品种植株的为害指数明显上升,M8和HA-3苜蓿均表现为抗牛角花齿蓟马,Ja苜蓿表现为高感蓟马,其他苜蓿品种处于中等水平;产量损失率M8、HA-3最低,Ja最高,在株高和分枝方面呈现相同规律;研究表明M8、HA-3苜蓿对牛角花齿蓟马的耐害性最高,Ja苜蓿的耐害性最差。

二斑叶螨多重抗性品系解毒酶基因表达模式解析

【目的】二斑叶螨(Tetranychus urticae)是一种重要的农业害螨,由于个体小、繁殖快等特点,极易产生抗药性,论文从生理生化和分子水平探讨二斑叶螨m RNA水平相对表达量的变化,旨在明确二斑叶螨对混剂的多重抗性机制,为该螨的综合治理提供依据。【方法】在温度(25±l)℃,相对湿度60%±5%,光周期L﹕D=16 h﹕8 h的室内条件下,于盆栽豇豆苗上饲养不接触任何药剂的二斑叶螨敏感品系(SS)和用螺螨酯、甲氰菊酯、阿维菌素以其单剂的致死中浓度(LC50)为汰选浓度混合连续汰选的多重抗性品系(Mp-R);Mp-R品系用药4—5次待其种群扩增后,参照FAO推荐的叶片残毒法进行室内毒力测定一次,计算其LC50,求出抗性倍数(RR),并记为一个汰选周期;连续汰选3个周期后,逐渐增加汰选浓度,用Polo Plus软件求其毒力回归方程、LC50、抗性指数及卡方值;采用生化分析法测定选育50代的二斑叶螨SS与Mp-R品系卵、幼螨、若螨、雄成螨、雌成螨的谷胱甘肽S转移酶(GSTs)、羧酸酯酶(Car Es)、多功能氧化酶(MFOs)的活性,以ELFn为内参基因,采用RT-q PCR技术以比较Ct值的方法计算二斑叶螨Mp-R品系中10个与抗性相关的解毒酶基因的表达量。【结果】在室内经50代抗性选育,二斑叶螨对阿维菌素、甲氰菊酯及螺螨酯的LC50分别达到1 103.55、5 993.33和2 345.62 mg?L-1,抗性倍数分别为603.03、167.65和51.77倍。卵中Mp-R品系MFOs比活力显著高于SS品系,GSTs、Car Es比活力差异不显著;其他发育阶段Mp-R品系的GSTs、Car Es比活力显著高于SS品系,MFOs比活力则差异不显著;Mp-R品系雌成螨的GSTs、Car Es比活力显著高于其他发育阶段,卵的MFOs比活力显著高于其他发育阶段。与敏感品系相比,二斑叶螨Tu GSTd05、Tu GSTd06与Tu GSTd09基因表达量在Mp-R品系各发育阶段显著上调1.80倍以上,Tu GSTd01表达量在若螨期显著上调1.63倍,其他发育阶段差异不显著;CYP392E10表达量在卵中极显著上调5.87倍,幼螨、若螨阶段显著上调2.15倍和2.09倍,成螨阶段表达量差异不显著;CYP392A6在卵、幼螨与若螨阶段表达量均显著上调1.89、1.64和1.59倍,在成螨阶段表达量差异不显著。CYP392A16在各发育阶段均极显著上调,卵中上调6.97倍,幼螨中上调8.20倍,若螨中上调8.88倍,雄成螨上调7.34倍,雌成螨上调8.59倍。CYP392D 8在卵、幼螨和雄、雌成螨中表达量均显著上调2.18、2.00、2.03和2.41倍,在若螨阶段表达量差异不显著;Tu CCE35在若螨及雄、雌成螨中表达量显著上调1.58、1.86和2.65倍;Tu CCE36在卵和雄、雌成螨中表达量显著上调1.73、1.89和2.14倍。【结论】与敏感品系相比,二斑叶螨Mp-R品系10个与抗性相关的解毒酶基因表达量在其不同发育阶段均有不同程度的变化。CYP392A16表达量在各发育阶段上调较大,可能参与了二斑叶螨多重抗性的形成;其余基因表达量均未见大幅度上调,这些基因是否参与了对3种药剂的代谢还需进一步验证。