骨髓间充质干细胞移植治疗脑缺血大鼠的实验研究

目的评价骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植对大鼠脑缺血后肌力、平衡力及空间学习能力的改善作用。方法栓塞大鼠大脑中动脉,制作40只脑缺血2 h再灌注动物模型,再灌注24 h后对移植组(20只)移植异体BMSCs。采用抓绳实验、平衡木行走实验及水迷宫实验,在缺血再灌注后1周、2周、4周和12周时对大鼠肌力、平衡力及空间学习能力进行检测,观察BMSCs移植后脑缺血大鼠神经功能恢复情况。结果脑缺血可导致大鼠肌力、平衡力及空间学习能力下降。缺血后随再灌注时间延长,移植组与对照组大鼠肌力、平衡力及空间学习能力均有一定程度的恢复,而移植组较对照组有明显改善。结论BMSCs移植可较显著地促进脑缺血大鼠肌力、平衡力及空间学习能力的改善。

颅内段椎动脉夹层动脉瘤的血管内治疗

颅内段椎动脉夹层动脉瘤常表现为蛛网膜下腔出血及脑缺血等症状。血管内治疗是首选治疗方式。血管内治疗包括:动脉瘤近端椎动脉闭塞术、血管内孤立术、支架辅助弹簧圈栓塞术、单纯支架植入术、血流转向装置植入术和覆膜支架植入术等。应根据颅内段椎动脉夹层动脉瘤的临床特点选择合理的血管内治疗方式。术后应定期进行脑血管DSA随访,并根据DSA结果决定是否需进一步治疗。

前交通动脉瘤术中破裂的处理(附22例分析)

目的探讨显微手术夹闭前交通动脉瘤时动脉瘤术中破裂的处理。方法回顾性分析116例采用显微外科手术下夹闭前交通动脉瘤,术中22例发生动脉瘤破裂,对术中破裂的处理方式进行分析。结果动脉瘤成功夹闭20例,夹闭失败2例。术后恢复良好15例,未遗留神经功能障碍;轻残5例,生活可基本自理;重残2例。结论前交通动脉瘤术中破裂出血可发生在动脉瘤手术过程中的任何环节;尽早显露并临时阻断载瘤动脉,动脉瘤破裂出血后保持手术视野清晰等,是手术成功的关键。

氯化镧对大鼠脑缺血细胞凋亡保护作用的研究

目的 探讨氯化镧对大鼠脑缺血诱导的细胞凋亡是否具有保护作用。方法 雄性SD大鼠 30只随机分为3组 :( 1)假手术组 ;( 2 )缺血组 ;( 3)氯化镧组。每组各 10只。采用线栓法制备大鼠局灶性脑缺血再灌注模型。Tunel染色观察 3组脑皮质凋亡细胞数 ;二苯胺法测定脑皮质DNA裂解率。结果 Tunel染色显示假手术组仅有散在的 0～ 3个凋亡细胞 ,而缺血组及氯化镧组均可见大量的凋亡细胞 ,但氯化镧组细胞凋亡数 14 0± 13明显低于缺血组 170± 9,有显著性差异 (P <0 .0 1)。缺血组再灌注后缺血区脑皮质DNA裂解率 ( 33.4± 1.3) %明显高于假手术组 ( 2 2 .1± 1.5 ) %及氯化镧组 ( 2 8± 2 .4 ) % ,有显著性差异 (P <0 .0 1)。结论 氯化镧对缺血再灌注诱导的脑皮质细胞凋亡具有一定的抑制作用。

阿魏酸钠诱导骨髓间充质干细胞向神经细胞分化的初步研究

目的 探讨阿魏酸钠诱导大鼠骨髓间充质干细胞向神经细胞分化的可能作用。方法 分离培养大鼠骨髓间充质干细胞 ,采用阿魏酸钠对其进行诱导培养 ,倒置显微镜下观察诱导培养不同时间后细胞的形态变化 ,并应用免疫细胞化学方法鉴定诱导培养后细胞表面神经细胞特异性标志物神经丝蛋白 (NF)及神经元特异性烯醇化酶(NSE)的表达。结果 阿魏酸钠诱导培养 6 h后即可见细胞形态发生明显变化 ,2 4 h后表现为典型的神经细胞样形态 ,NF和 NSE神经细胞特异性标志物呈阳性表达。结论 初步证实阿魏酸钠具有诱导体外培养的大鼠骨髓间充质干细胞向神经细胞分化的作用。

骨髓间充质干细胞移植对大鼠脑缺血区血管新生及神经前体细胞增殖的影响

目的:探讨骨髓间充质干细胞(MSC)移植促进大鼠脑缺血后神经功能恢复的可能机制。方法:用线栓法复制大鼠脑缺血再灌注动物模型,分缺血对照组和移植治疗组(经颈动脉移植体外培养异体MSC)。采用免疫组织化学染色及原位杂交技术观察缺血区脑组织的新生血管、细胞增殖及巢蛋白表达的变化。结果:(1)移植组比对照组缺血区皮层微血管密度(MVD)明显增高,血管内皮生长因子(VEGF)mRNA阳性信号明显增强。(2)缺血区顶叶皮层、尾壳核、室管膜、室管膜下区均可见大量Nestin阳性细胞及BrdU阳性细胞,各时间段移植组两种阳性细胞数均比对照组显著增多。结论:MSC可能通过改善缺血区血运及促进缺血区神经前体细胞再生达到修复缺血区损伤组织,从而改善脑缺血大鼠神经功能。

自体骨髓间充质干细胞移植治疗中枢神经系统损伤性疾病(附五例报告)

目的：探讨自体骨髓间充质干细胞移植治疗中枢神经系统损伤后神经功能障碍的有效性和安全性。方法：2004年10月-2005年5月,应用自体骨髓间充质干细胞移植治疗5例中枢神经系统损伤后神经功能障碍患者（脑卒中患者3例,脑外伤术后患者2例）。手术首先抽取自体骨髓细胞悬液,在体外经过分离培养后,制成骨髓间充质干细胞悬液,通过静脉输注方式移植脑内。结果：移植治疗后所有患者均未见不良反应。出院半年后随访,最长随访时间达2年。5例患者神经功能缺损症状较移植前均有很大程度的改善,其中2例神志不清患者神志恢复,可按吩咐动作;4例患者肌力提高1-3个级别;失语症状均得到一定改善。结论：自体骨髓间充质干细胞移植治疗中枢神经系统损伤后神经功能缺损疾病是一种简单、安全、有效的方法,值得进一步开展临床观察和验证。

脑缺血预处理后Caspase-8蛋白的表达与神经元的保护作用

目的:探讨脑缺血预处理后凋亡相关基因Caspase-8蛋白表达与神经元保护作用的关系。方法:雄性Wistar大鼠70只,随机分为对照组(10只)、预处理组(10只)、缺血预处理组(25只)和缺血组(25只)。四血管阻断法复制全脑缺血模型,尼氏和TUNEL染色法观察脑皮质及海马CA1区神经元数和凋亡细胞数,免疫组化方法检测Caspase-8蛋白在缺血预处理后表达变化情况。结果:①缺血7d时,缺血预处理组皮质及海马CA1区神经元数无显著变化犤(268±8.5)个/视野犦,缺血组神经元数则显著减少犤(135.0±5.6)个/视野犦。②缺血预处理组Caspase-8蛋白缺血12h表达升高犤(125.6±9.0)个/视野犦,24h达高峰犤(167.0±8.1)个/视野犦;缺血组caspase-8蛋白缺血6h表达升高犤(154.2±18.4)个/视野犦,12h达高峰犤(222.8±17.1)个/视野犦;各对应时点缺血组Caspase-8蛋白阳性表达细胞较缺血预处理组明显增多。③缺血预处理组和缺血组均在缺血12h皮质及海马CA1区凋亡细胞数开始增多犤(15.5±2.1),(39.8±3.9)个/视野犦,缺血48h凋亡细胞数达高峰犤(68.3±13.6),(328.4±24.0)个/视野犦,但缺血组凋亡细胞数较缺血预处理组显著增多。结论:全脑缺血可能通过诱导Caspase-8蛋白的表达增多,启动细胞凋亡,导致缺血后神经元凋亡的发生。

人骨髓间充质干细胞的体外培养及向神经细胞的分化研究

目的探讨人骨髓间充质干细胞(hMSC)的体外培养生长特性及向神经细胞分化的诱导条件。方法采用密度梯度离心方法分离hMSC,体外扩增生长传代培养,倒置于显微镜下观察其生长特性。采用阿魏酸钠对传至3～6代的hMSC进行诱导培养,并以β-巯基乙醇作为对照,观察诱导培养不同时间后细胞的形态变化,应用免疫细胞化学方法鉴定诱导培养后细胞表面神经细胞特异性标志物神经丝蛋白(NF)及神经元特异性烯醇化酶(NSE)的表达。结果hMSC在体外培养条件下,能保持旺盛的增殖能力,阿魏酸钠诱导培养后6 h即可见细胞形态发生明显变化,24h后表现为典型的神经细胞样形态,NF和NSE呈阳性表达。结论hMSC在体外具有自我更新能力及多分化潜能;阿魏酸钠具有诱导体外培养的hMSC向神经细胞分化的作用。

阿魏酸钠对缺血预处理后大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用(英文)

背景:缺血性脑损伤后,如何减少神经细胞的死亡促进神经功能的恢复?脑缺血预处理在一定程度上可减轻再次缺血导致的缺血性脑损伤。阿魏酸钠亦被证实能减少脑缺血后的神经元凋亡的发生。而阿魏酸钠是否能增强脑缺血预处理的神经保护作用?目的:探讨阿魏酸钠联合缺血预处理对脑缺血再灌注损伤的保护作用。设计:随机对照动物实验。单位:江西医学院第二附属医院神经外科,江西医学院生理教研室,江西医学院泌尿外科研究所。材料:实验于2001-05/2002-04在江西医学院第二附属医院神经外科实验室完成。雄性Wistar大鼠85只,体质量250～300g。方法:大鼠随机分为四组:①非缺血对照组(10只):仅结扎双侧椎动脉而不夹闭双侧颈总动脉。②缺血对照组(25只):结扎双侧椎动脉48h,夹闭颈总动脉10min。③缺血预处理组(25只):结扎双侧椎动脉48h,夹闭颈总动脉2min后24h再次夹闭颈总动脉10min。④阿魏酸钠联合缺血预处理组(25只):缺血预处理后,再次夹闭颈总动脉前30min,尾静脉注射阿魏酸钠(200mg/kg)。非缺血对照组分为再灌注后2,7d二个亚组(各5只);缺血对照组、缺血预处理组及阿魏酸钠联合缺血预处理组又分为再灌注后6,12,24h,2,7d五个亚组(各5只)。各组在相应时点将大鼠断头取脑,于视交叉后2.2mm切取冠状脑片,观察阿魏酸钠联合缺血预处理在脑缺血再灌注时对皮层和海马CA1区神经元数及凋亡细胞数的影响。主要观察指标:皮层和海马CA1区神经元数及凋亡细胞数。结果:实验大鼠85只均进入结果分析。①大脑皮层及海马CA1神经元计数:缺血7d时,缺血预处理组和阿魏酸钠+缺血预处理组高于缺血对照组(268±8.5,244±12.5,135±5.6,P<0.01)。②大脑皮层及海马CA1区TUNEL阳性细胞计数:阿魏酸钠+缺血预处理组低于缺血预处理组和缺血对照组(12h:1.2±0.8,15.5±2.1,39.8±3.9;24h:1.8±1.6,39.3±11.8,191.3±19.1;2d:2.8±1.2,68.3±13.6,328.4±24.0,P<0.01);缺血预处理组低于缺血对照组(P<0.01)。结论:缺血预处理可减少缺血区神经元凋亡细胞数,阿魏酸钠联合缺血预处理可以进一步加强此效应,对脑缺血再灌注损伤起保护作用。

颅内动脉溶栓联合支架取栓治疗急性脑梗死2例报道

脑梗死是神经科临床上最常见的疾病之一,由于目前缺乏理想的治疗方法,致残率和病死率都很高[1]。笔者在2014年初对1例基底动脉闭塞及1例右侧大脑中动脉闭塞患者施行了动脉溶栓联合Solitaire支架取栓治疗,取得了良好的临床效果,现报道如下。

自体骨髓细胞移植对大鼠局灶性脑缺血区新生血管形成的作用(英文)

背景:骨髓细胞移植是一种简单而有效的促进新生血管生长的治疗手段。同样新生血管的形成和血液循环的再建立,对于脑缺血区域受损而未死亡神经元的修复以及为植入的组织与细胞的成活和分化提供必要的环境条件均具有重要意义。而自体骨髓细胞移植是否会促进脑缺血区新生血管的形成进行血运重建目前尚不清楚。目的:探讨经颈动脉移植自体骨髓细胞对脑缺血区新生血管形成的影响。设计:以实验动物为研究对象,随机对照的验证性研究。单位:一所大学医院的神经外科和泌尿外科研究所。材料:实验于2002-09/2003-04在江西医学院第二附属医院神经外科实验室,江西医学院泌尿外科研究所完成。选择雄性SD大鼠10只,体质量250～300g,清洁级。干预:复制局灶性脑缺血大鼠模型,经颈动脉注入自体骨髓细胞。动物随机分为实验组5只,经颈动脉注入自体骨髓细胞,对照组5只注入生理盐水。通过免疫组织化学染色方法进行微血管计数,观察脑缺血区血管增生状况。主要观察指标:微血管密度。F8因子免疫组化染色。结果:自体骨髓细胞移植后大鼠在皮质缺血区的微血管密度为(159.15±40.4)血管数/mm2,明显较对照组大鼠(81.70±32.18)血管数/mm2多,差异有显著性意义(P<0.05)。骨髓细胞移植组皮质缺血区可见很多散在的单个内皮细胞。

大面积脑梗死患者不同治疗方法分析比较

目的比较大面积脑梗死内科保守治疗和去骨瓣减压治疗的疗效,探讨去骨瓣减压治疗大面积脑梗死的手术时机及影响预后的因素。方法选择71例大面积脑梗死伴脑疝患者,根据患者手术时机、治疗方法的不同,将患者分为Ⅰ组(晚期手术治疗组,21例)、Ⅱ组(早期手术治疗组,29例)和Ⅲ组(保守治疗组,21例),以BI评分评定各组临床效果,观察1个月后各组病死率、6个月后各组神经功能缺损程度评分。结果Ⅰ组和Ⅱ组病死率明显低于Ⅲ组(P均<0.01),Ⅰ组和Ⅱ组病死率比较无显著性差异。Ⅰ组和Ⅲ组6个月时神经功能缺损程度比较无显著性差异,而Ⅱ组和Ⅰ组6个月时神经功能缺损程度比较存在显著性差异(P<0.05)。结论去骨瓣减压术可明显降低大面积脑梗死伴脑疝患者病死率,早期手术治疗可显著改善患者的临床神经功能。

显微手术治疗面肌痉挛合并三叉神经痛3例分析

目的探讨显微血管减压手术(MVD)治疗面肌痉挛合并三叉神经痛的临床效果。方法回顾性分析3例面肌痉挛合并三叉神经痛患者的诊治情况及术后疗效。结果 3例患者MRI检查及术中均见血管对面神经和三叉神经的压迫,给予微血管减压后,症状在术后3月内完全消失。无面肌瘫痪、听力下降及脑脊液漏等并发症发生。结论 MVD是治疗面肌痉挛合并三叉神经痛的有效治疗方法。术前MRI检查可明确诊断并指导手术。

显微血管减压术治疗颅神经疾病63例疗效观察

目的探讨显微血管减压术治疗颅神经疾病的疗效及安全性。方法 63例颅神经疾病患者均采用显微血管减压术治疗。结果 63例患者中,39例(61.9%)术后症状立即消失,延迟恢复16例(25.4%),症状减轻7例,无效1例。术后出现听力下降1例,暂时性面瘫3例,一过性头晕、耳鸣6例。62例患者术后随访1～18个月,平均7.3个月,症状消失55例(87.3%),症状减轻7例(11.1%)。结论显微血管减压术是治疗颅神经疾病尤其是面肌痉挛最有效的方法,熟练的显微外科技术以及术中正确识别责任血管、充分的减压是提高手术疗效、减少症状复发的关键。

垂体腺瘤显微手术入路选择探讨

目的探讨垂体腺瘤不同显微手术入路的优缺点,以便临床更合理有效地选用手术治疗方式。方法回顾性分析2000年1月至2008年7月经CT、MRI及内分泌检查确诊的124例垂体腺瘤患者的临床资料。这124例患者均经手术治疗,其中经颅入路手术切除肿瘤29例,经单鼻孔-蝶窦入路手术切除肿瘤91例,4例分期采取了上述两种入路手术切除。结果经颅入路手术全切除肿瘤19例,次全切除和大部分切除肿瘤10例;复发6例,死亡1例。经单鼻孔-蝶窦入路手术全切除肿瘤74例,次全切除和部分切除肿瘤17例;复发2例,无死亡病例。分期手术4例,全切1例,次全切除1例,大部分切除2例。结论经单鼻孔-蝶窦入路手术可作为各类中小型腺瘤和多数大型腺瘤首选的治疗手段;对于大型垂体腺瘤,肿瘤向鞍上和颈内动脉两侧膨胀生长者采用经颅和/或二期经单鼻孔-蝶窦入路手术治疗可有效提高肿瘤切除率,减少手术并发症的发生。

介入栓塞与开颅夹闭治疗脉络膜前动脉瘤的效果比较及预后影响因素分析

目的比较血管内介入栓塞与开颅夹闭治疗脉络膜前动脉动脉瘤的临床效果,分析脉络膜前动脉动脉瘤预后相关影响因素。方法对南昌大学第二附属医院2014年1月至2019年1月收治的98例脉络膜前动脉动脉瘤患者的临床资料进行回顾性分析,其中采用血管内介入栓塞治疗72例(A组),采用开颅夹闭治疗26例(B组)。采用改良RanKin量表评价2组的预后,采用Raymond分级评估2组动脉瘤闭塞情况,观察2组术后缺血并发症发生情况;采用单因素分析脉络膜前动脉动脉瘤预后相关影响因素。结果A组预后良好66例(91.7%)、动脉瘤完全闭塞65例(90.3%)、术后发生缺血并发症10例(13.9%),B组分别为23例(88.5%)、25例(96.2%)、5例(19.2%),2组预后良好率、动脉瘤完全闭塞率、术后缺血并发症发生率比较差异均无统计学意义(均P>0.05)。单因素分析结果显示,动脉瘤大小是脉络膜前动脉动脉瘤预后的影响因素(χ^2=5.624,P=0.018)。结论介入栓塞和开颅夹闭治疗脉络膜前动脉动脉瘤均能取得满意疗效,动脉瘤大小是其预后影响因素。术前充分评估及个性化治疗对于提高预后良好率有重要意义。

脑内窥镜辅助下单鼻孔入路经蝶窦切除垂体腺瘤手术体会

目的探讨内窥镜辅助下经蝶窦单鼻孔入路垂体腺瘤切除手术的可行性、优缺点、手术适应证和临床应用价值。方法采用MRI明确诊断,运用直径4mm的0°、30°内窥镜监视下经单鼻孔蝶窦入路对38例垂体腺瘤进行手术切除。结果29例垂体腺瘤得到完全切除,6例近全切除,3例部分切除。26例术前视力损害的患者中,25例术后均有不同程度的恢复,1例无改变。术后1例出现永久性尿崩伴垂体功能低下者需药物治疗。术后未见脑脊液鼻漏、颅内感染等并发症发生。结论内窥镜辅助下经蝶窦单鼻孔入路垂体腺瘤切除手术是一个简便、安全、微创的新技术,只要正确掌握手术适应证,就可以获得满意的治疗效果。

巨大嗅沟脑膜瘤的显微外科治疗(附17例报告)

目的探讨巨大嗅沟脑膜瘤的手术治疗效果。方法分析我院神经外科自2000年2月～2005年2月利用显微外科技术切除17例巨大嗅沟脑膜瘤的临床资料。结果肿瘤全切除(SimpsonⅠ、Ⅱ级切除)15例,占88.2%;次全切除(SimpsonⅢ级切除)2例,无手术死亡病例。术后随访14例,平均20个月。11例恢复了正常生活,3例生活能自理。MRI随访12例均无复发。结论利用显微外科技术,选择合适的手术入路,对肿瘤进行分块切除治疗巨大嗅沟脑膜瘤疗效满意。

β-巯基乙醇诱导成年鼠骨髓基质细胞向神经细胞分化的研究

目的 :探讨β 巯基乙醇诱导成年大鼠骨髓基质细胞成神经细胞的可能性。为神经再生和诱导剂的筛选提供一种新的参考方法。方法 :从大鼠骨髓中分离出骨髓基质细胞并培养传至 3- 5代 ,诱导前 2 4h用含 1mmol /l的β 巯基乙醇及含 2 0 %的DMEM培养液培养 ,再以含 5mmol /lβ 巯基乙醇的无血清DMEM培养液作诱导 ,用免疫细胞化学方法鉴定神经细胞特异性标志物NF、NSE及GFAP的表达。结果 :诱导后 1h ,部分细胞发生形态学上的改变 ,6h后大部分细胞不仅在形态上表现为神经元样特征 ,而且NF、NSE等特异性抗体呈阳性表达 ,而GFAP抗体表达呈阴性。结论 :β