miR-145调控TGF-β通路在高血压大鼠心肌纤维化中的作用

目的探讨MicroRNA(miR)-145在自发性高血压大鼠(SHR)中的表达及其对心肌纤维化(MF)的影响机制。方法SHR大鼠分为模型组、rAAV9-mimic NC组、rAAV9-miR-145 mimic组、转化生长因子(TGF)-β1组和rAAV9-miR-145 mimic+TGF-β1组,每组12只;另设12只Wistar大鼠为对照组。rAAV9-mimic NC组、rAAV9-miR-145 mimic组和TGF-β1组分别尾静脉注射rAAV9-mimic NC、rAAV9-miR-145 mimic和TGF-β1(1.25μg/kg),rAAV9-miR-145 mimic+TGF-β1组经尾静脉给予rAAV9-miR-145 mimic和TGF-β1,对照组和模型组尾静脉注射生理盐水。于治疗前1 d和治疗第7、14、21天检测血压变化;给药结束后,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清心肌酶[肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)、心肌肌钙蛋白(cTn)I]和血浆血管紧张素(Ang)Ⅱ水平;解剖左心室并称重,计算左心室质量指数(LVMI);苏木素-伊红(HE)染色和Masson染色观察心室组织病理学变化,计算胶原容积分数(CVF);免疫组织化学染色检测心室组织Ⅰ型胶原蛋白(Collagen Ⅰ)和Ⅲ型胶原蛋白(Collagen Ⅲ)的表达;实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测心肌组织miR-145、TGF-β1、Smad2、Smad3和Smad7 mRNA表达;Western印迹检测心肌组织TGF-β1/Smad通路相关蛋白[TGF-β1、Smad2、p-Smad2、Smad3、p-Smad3、Smad7]表达。结果治疗前,各组SHR收缩压均明显高于对照组(P<0.05);治疗后,与模型组相比,rAAV9-miR-145 mimic组在治疗第14、21天时收缩压显著下降(P<0.05)。与对照组相比,模型组血清CK-MB、cTnI和血浆Ang Ⅱ水平、LVMI、CVF、CollagenⅠ和Collagen Ⅲ及TGF-β1、Smad2、Smad3 mRNA表达、TGF-β1蛋白表达、p-Smad2/Smad2和p-Smad3/Smad3比值显著升高,miR-145、Smad7 mRNA和蛋白表达水平显著降低(P<0.05),心肌细胞出现明显的病理损伤,可见炎性细胞浸润和大量蓝色胶原纤维沉积;与模型组相比,rAAV9-miR-145 mimic组血清CK-MB、cTnI和血浆Ang Ⅱ水平、LVMI、CVF、Collagen Ⅰ和Collagen Ⅲ及TGF-β1、Smad2、Smad3 mRNA、TGF-β1蛋白表达、p-Smad2/Smad2和p-Smad3/Smad3比值显著下降,miR-145、Smad7 mRNA和蛋白表达水平显著升高(P<0.05),心肌细胞病理损伤和炎性细胞浸润情况明显改善,蓝色胶原纤维沉积减少;并且在miR-145 mimic干预的基础上,上调TGF-β1的表达,可显著逆转miR-145过表达对TGF-β1/Smad通路和高血压大鼠MF的抑制作用。结论上调miR-145表达可减轻高血压大鼠MF,其机制可能与负调控TGF-β1/Smad通路有关。

Hh信号通路在口腔鳞状细胞癌中的激活及意义

目的:研究口腔鳞状细胞癌中Shh、Ptch、Gli-1在基因及蛋白水平的表达,并探讨其阳性表达与口腔鳞状细胞癌生物学特性之间的关系。方法:采用免疫组织化学方法分别检测40例口腔鳞癌和30例正常口腔黏膜中Shh、Ptch、Gli-1蛋白的表达;RT-PCR法检测10例口腔鳞癌组织及5例正常口腔黏膜组织中Shh、Gli-1和Ptch mRNA的表达。结果:免疫组织化学结果显示,Shh、Ptch和Gli-1蛋白在口腔鳞癌中阳性表达率分别为62.5%、60.0%和65.0%,在正常口腔黏膜中3种蛋白均不表达。非参数统计分析示,Shh及Gli-1的阳性表达与肿瘤的大小、淋巴结转移及临床分期相关(P<0.05),Ptch蛋白的表达与淋巴结转移呈显著正相关(P<0.05)。RT-PCR结果显示,Shh、Ptch、Gli-1mRNA在口腔鳞癌组织中的阳性表达分别为60%、50%、70%,明显高于正常口腔黏膜,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:Hh信号通路在口腔鳞状细胞癌组织中被激活并与口腔鳞癌的发生、发展、转移关系密切。

β_1肾上腺素能受体抗体对小鼠心室肌细胞钾离子通道的作用

目的采用β1肾上腺素能受体抗体(anti-ADRβ1)模拟自身抗体,研究其对小鼠心室肌细胞钾离子通道的作用。方法酶解法分离小鼠心室肌细胞,以不同稀释比例anti-ADRβ1灌流心肌细胞,膜片钳电生理技术记录钾离子通道电流的变化。结果不同稀释比例anti-ADRβ11/500、1/100、1/50的细胞外液灌流5min后,Ito电流密度无明显变化(P>0.05);与正常外液时(4.7±0.24)pA/pF比较,anti-ADRβ11/500时Iss电流密度(3.6±0.18)pA/pF降低,但差异无统计学意义(P>0.05),anti-ADRβ11/100和1/50时Iss电流密度明显降低,分别为(3.5±0.18)pA/pF和(3.1±0.15)pA/pF(P均<0.05),并且具有明显的剂量依赖性。结论β1肾上腺素能受体抗体可以抑制小鼠心肌细胞Iss通道而对Ito无影响,其作用可能类似激动剂样效应,该结论为进一步研究心衰患者β1肾上腺素能受体自身抗体的作用机制提供了实验依据。

沙库巴曲缬沙坦联合盐酸曲美他嗪治疗冠心病合并心力衰竭患者的临床疗效及对其心功能的影响

目的探讨不同方案治疗冠心病合并心力衰竭患者的临床疗效及对其心功能的影响。方法选取滕州市中心人民医院2020年9月至2023年9月收治的86例冠心病合并心力衰竭患者作为研究对象,根据信封法分为联合组和单药组,各43例。单药组采用盐酸曲美他嗪治疗,联合组患者采用沙库巴曲缬沙坦联合盐酸曲美他嗪治疗,比较两组患者的临床疗效并比较两组的心功能指标、6 min步行距离和明尼苏达心力衰竭生活质量问卷(Minnesota living with heart failure questionnaire,MLHFQ)评分和不良反应发生率。结果相比于单药组(81.40%),联合组患者的治疗疗效(95.35%)更好(χ^(2)=6.544,P=0.038);相比于单药组,治疗后联合组患者的左心室射血分数(left ventricular ejection fraction,LVEF)更高,左心室收缩内径(left ventricular end systolic dysfunction,LVESD)和左心室舒张内径(left ventricular end diastolic diameter,LVEDD)水平更低(P<0.05);相比于单药组,治疗后联合组患者的6 min步行距离更长,MLHFQ评分更低(P<0.05);两组的不良反应发生率比较,差异无统计学意义(χ^(2)=0.059,P=0.808)。结论以上两种药物联合治疗冠心病合并心力衰竭疗效确切,可改善患者的心功能,提高生活质量,且安全性高。