回毒银花散中各药及药物不同配比对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的作用研究

目的研究《外科正宗》中回毒银花散对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin⁃resistant Staphylococcus aureus,MRSA)的抑菌能力以及毒力因子α-溶血素(α⁃hemolysin,Hla)活性和生物被膜形成的抑制作用,同时探究回毒银花散最佳配比为古方新用提供实验支撑。方法通过最低抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)、最低杀菌浓度(minimum bactericidal concentration,MBC)、纸片扩散法(K⁃B法)分析回毒银花散及组方中各味药对MRSA菌株USA300的抑制效果,溶血实验、Hla中和实验、Hla寡聚实验、免疫印记(Western blot)实验验证药物以何种形式抑制毒力因子Hla的活性,生物被膜形成实验评价回毒银花散对生物被膜的抑制效果,最后正交实验探究回毒银花散的最佳配比。结果回毒银花散抑制MRSA菌株,MIC_(90)为64 mg/mL,MBC为256 mg/mL,抑菌圈直径为(7.50±0.50)mm。回毒银花散还通过抑制Hla的释放抑制Hla的活性,最小有效浓度(minimum effective concentration,MEC)为16 mg/mL,抑制生物被膜形成的MEC为8 mg/mL。回毒银花散中金银花、黄芪只影响MRSA溶血活性以及生物被膜形成但不抑制细菌的生长,两药溶血活性MEC以及生物被膜形成MEC均为32 mg/mL;甘草抑菌能力较强,MIC_(90)为8 mg/mL,生物被膜MEC为1 mg/mL,在亚抑菌浓度下未表现出抑制溶血活性。最后正交实验显示,当回毒银花散中金银花、黄芪、甘草比例为1∶2∶4时,MIC_(90)为16 mg/mL,溶血活性MEC为8 mg/mL,生物膜形成MEC为4 mg/mL,均为9组中最低。结论回毒银花散在亚抑菌浓度下可影响MRSA的溶血活性以及生物被膜形成,其中金银花、黄芪、甘草的最佳比例为1∶2∶4。

预防医学课程培育爱国主义与人文情怀的路径研究

分析预防医学课程培育爱国主义与人文情怀的路径,从爱国主义与人文情怀教育融入预防医学课程教学的重要性、原则、设计策略、实施步骤、存在的问题及面临的挑战等多方面进行有益探索,以期更好地完成立德树人根本任务。

山慈菇多糖的免疫调节作用及对小鼠骨肉瘤细胞S180体内生长抑制作用

目的:探讨山慈菇多糖的免疫调节作用及对小鼠骨肉瘤细胞S180的抑制作用。方法:噻唑蓝法及吞噬中性红法测定小鼠脾淋巴细胞增殖能力及脾巨噬细胞活性;体内肿瘤抑制实验检测山慈菇多糖对S180荷瘤小鼠肿瘤生长、脾脏指数和胸腺指数的影响;流式细胞术及酶联免疫吸附测定法检测山慈菇多糖对S180荷瘤小鼠T淋巴细胞亚群及血清细胞因子水平的影响。结果:山慈菇多糖可以增强淋巴细胞增殖能力和巨噬细胞活性;同时,山慈菇多糖也可以抑制S180荷瘤小鼠肿瘤生长,增加小鼠脾脏指数和胸腺指数;此外,山慈菇多糖还可以增加荷瘤小鼠CD4+、CD8+T细胞浓度,提高CD4+/CD8+比值及白细胞介素-2、肿瘤坏死因子-α、干扰素-γ水平。结论:山慈菇多糖具有明显的肿瘤抑制作用,其对肿瘤细胞生长的抑制作用与提高免疫能力有关。

人参皂苷CK对MCF-7细胞增殖、凋亡、上皮间质转化、PI3K/Akt信号通路的影响

目的探讨人参皂苷CK对人乳腺癌MCF-7细胞增殖、凋亡、上皮间质转化、PI3K/Akt信号通路的影响。方法 MCF-7细胞经不同浓度的人参皂苷CK处理后,MTT法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,real-time q PCR法检测E-钙黏蛋白、N-钙黏蛋白、波形蛋白mRNA表达,Western blot法检测p-PI3K、p-Akt蛋白表达。结果与对照组比较,10μmol/L人参皂苷CK处理72 h,20、40、80μmol/L人参皂苷CK处理24、48、72 h后,对细胞增殖的抑制率显著增加(P<0.05);20、40、80μmol/L人参皂苷CK处理48 h后,细胞凋亡率和E-钙黏蛋白mRNA表达显著增加(P<0.05);20、40、80μmol/L人参皂苷CK处理48 h后,N-钙黏蛋白、波形蛋白mRNA表达,以及p-PI3K、p-Akt蛋白表达显著降低(P<0.05)。结论人参皂苷CK可抑制MCF-7细胞增殖、上皮间质转化,并诱导细胞凋亡,这可能与抑制PI3K/Akt信号通路相关。

小柴胡汤和当归芍药散单方及合用对免疫性肝损伤的保护作用

目的考察小柴胡汤和当归芍药散单方及合用对免疫性肝损伤的保护作用。方法昆明小鼠72只随机分为6组,空白组、模型组、小柴胡汤组(6.63 g/kg)、当归芍药散组(11.31 g/kg)、小柴胡汤合当归芍药散(柴归汤)组(17.94 g/kg)和阳性药(联苯双脂合甘草酸二铵)组(0.2μg/g,0.3μg/g)。除空白组外,其余各组采用刀豆蛋白A(Con A)尾静脉注射制造免疫性肝损伤模型,各组采取相应干预7天。采用动物半自动生化分析仪检测ALT、AST、ALB和TP水平;HE染色观察肝组织病理切片;比色法检测肝组织SOD活性、MDA和GSH含量;ELISA法检测TNF-α、IL-1和IL-6;Western blotting法检测Bcl-2、Bax和Caspase-3蛋白表达;APAAP法检测T淋巴细胞亚群。结果与模型组比较,小柴胡汤组可降低ALT和AST水平,减少IL-1,降低MDA含量,显著降低Bcl-2蛋白表达;当归芍药散组可降低ALT水平,降低血清TNF-α、IL-1和IL-6炎症因子,并降低Bcl-2蛋白含量;小柴胡汤合当归芍药散对上述指标均有显著保护作用,对各指标改善优于单方,且能显著改善血清CD4^+/CD8^+比值。结论小柴胡汤和当归芍药散均能够保护刀豆蛋白A所致免疫性肝损伤,两方合用优于单方,其机制与提高抗氧化、抗凋亡能力及调节免疫失调多方面作用有关。

人参糖蛋白降低Aβ_(25-35)诱导SH-SY5Y细胞凋亡中一氧化氮释放的保护作用

目的确定人参糖蛋白的基本化学构成,探讨人参糖蛋白抗β-淀粉样蛋白(Aβ25-35)引起的神经炎症和神经保护作用。方法采用超滤、葡聚糖凝胶等方法分离纯化得到人参糖蛋白(Pg Gp),采用苯酚-硫酸法测定总糖含量,Lowry法测定蛋白含量,高效液相色谱法测定纯度和分子量分布。利用MTT法考察Pg Gp(5,25,125μg/m L)对细胞存活率的影响;Griess法测定Pg Gp对Aβ25-35诱导的SH-SY5Y细胞一氧化氮释放的影响。结果Pg Gp总糖含量为25.9%,蛋白含量为73.4%,分子量分布在200~50 000 Da。Pg Gp在不影响细胞存活率情况下,中、高剂量组与模型组比较,表现出保护Aβ25-35诱导的SH-SY5Y释放NO的能力(P<0.05,P<0.01)。结论人参糖蛋白可降低Aβ25-35诱导SH-SY5Y细胞一氧化氮释放量,从而具有保护神经细胞的作用。

微课结合PBL教学法在药理学教学中的应用效果观察

目的研究微课结合以问题为导向的教学方法(PBL)在药理学教学中的应用效果。方法选取2015年9月我校收录中西医临床专业学生112名作为研究对象,根据班级不同分为观察组(n=56)和对照组(n=56)。对照组采用传统教学方法教学,观察组采用微课结合PBL教学法教学。对比两组教学成绩、教学效果满意度及学生对教学方法评价结果。结果观察组考试成绩、学习兴趣、表达能力、知识理解、自主学习评分高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);观察组考试成绩为(91.83±5.76)分,高于对照组(85.81±4.28)分,差异有统计学意义(t=6.278,P=0.000);观察组教学效果满意度为91.07%(51/56),高于对照组39.29%(22/56),差异有统计学意义(P<0.05)。结论微课结合PBL教学法应用于药理学教学中能有效提高学生成绩,有助于培养其表达能力、知识理解等综合素质,改进教学质量,值得推广应用。

TBL教学模式在非预防医学专业《预防医学》教学中的实践性研究

目的:探讨以团队为基础的(TBL)教学模式在非预防医学专业《预防医学》教学中的实践效果。方法:选取我校2016级临床本科1、2班学生作为实验对象,各45名,以《预防医学》课程为例,抽签法分为实验组(采用TBL教学模式)和对照组(采用传统教学模式),对比两组学生教学满意度、理论成绩、操作能力及总体成绩优良率。结果:实验组学生教学满意度、理论成绩、操作能力评分高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);实验组总体成绩优良率95.56%,高于对照组77.78%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:非预防医学专业采取TBL教学模式进行《预防医学》教学,可提高学生教学满意度与总体成绩优良率,提高理论与实践能力。

Prezi在药理学教学中的应用初探

Prezi是一种基于云端的可视化工具软件,通过缩放、平移、变焦等方式立体地呈现演示内容,颠覆了传统幻灯片的线性演示方式。针对药理学的学科特点及教学过程中存在的问题,结合思维导图工具Prezi的特点,本文分析其在药理学教学过程中的独特优势,并以"解热镇痛抗炎药"为例将其应用到实际教学中,为丰富教学模式和推进课堂教学改革提供借鉴。

“双一流”建设背景下临床医学专业学生自主学习模式探索

文章首先阐述了“双一流”建设背景下临床医学专业学生自主学习现状,然后概述了“双一流”建设背景下自主学习模式的构建和实施,最后对“双一流”建设背景下临床医学专业学生自主学习实践成效进行了细致介绍。希望通过文章阐述能够为临床医学专业学生自主学习模式探索提供可行性参考。

人参三肽对脂多糖诱导小胶质细胞一氧化氮释放的保护作用

本研究考察了人参三肽(PGP3)对脂多糖(LPS)诱导BV-2小胶质细胞炎症的抑制作用。利用MTT法观察人参三肽(0.1,1,10,100μM)对细胞存活率的影响;Griess法检测一氧化氮(NO)的释放;酶联免疫法检测TNF-α的水平;并利用试剂盒检测了超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)的水平。结果发现人参三肽在不影响细胞存活率的情况下,减少了活化小胶质细胞N0和TNF-α的释放,并提高了抗氧化水平。提示人参三肽可能通过提高抗氧化能力抑制LPS诱导的BV一2小胶质细胞NO释放,发挥抗炎作用。本研究为进一步开发人参治疗神经退行性疾病提供理论依据。

5'-α、β-亚甲基-二磷酸腺苷对阿尔茨海默病小鼠学习记忆能力及脑透析液中腺苷水平的影响

目的探讨5'核苷酸酶(CD73)抑制剂5'-α,β-亚甲基-二磷酸腺苷(APCP)对Aβ_(1~42)诱导的阿尔茨海默病(AD)小鼠空间学习记忆能力和海马细胞外液腺苷的影响。方法 50只小鼠随机分为空白组、模型组、APCP低剂量组(1 mg/kg)、中剂量组(3 mg/kg)及高剂量组(10 mg/kg)。侧脑室注射Aβ_(1~42)制备AD模型。采用自发活动、Y迷宫测定、筑巢实验Morris水迷宫考察学习记忆和工作记忆能力;在体脑微透析结合高效液相检测细胞外液腺苷含量。结果 CD73抑制剂APCP能够显著提高AD小鼠工作学习记忆能力并提高小鼠的中枢兴奋性;AD小鼠海马腺苷水平显著高于空白组,单次和长期给APCP均能显著降低海马细胞外腺苷含量(均P<0.05)。结论 CD73抑制剂APCP改善AD小鼠学习记忆能力与减少海马细胞外腺苷含量有关。

芪归补血颗粒对环磷酰胺致小鼠免疫功能降低的影响

目的:考察芪归补血颗粒对环磷酰胺对小鼠免疫缺陷的影响及初步机制研究。方法:腹腔注射环磷酰胺复制化疗后气血两虚证小鼠模型,予芪归补血颗粒7 d后,检测各组体质量变化率、脾脏和胸腺指数,HE染色法制作脾脏病理切片,酶联免疫法检测脾脏组织中IL-2、IFN-γ、TNF-α、SOD、CAT、GSH、MDA水平。结果:与模型组比较,芪归补血颗粒中、高剂量组小鼠体质量变化率、胸腺指数、脾脏指数及脾脏组织IFN-γ、SOD、CAT、GSH水平显著升高,脾脏组织TNF-α、MDA水平及NOX4蛋白表达显著降低(P<0.05)。结论:芪归补血颗粒能提高免疫缺陷小鼠的免疫器官指数,增强机体抗氧化能力,调节细胞因子水平,改善环磷酰胺致免疫缺陷小鼠的免疫功能。

人参多糖对乙醇依赖小鼠戒断行为及血浆ACTH和皮质醇的影响

目的探究人参多糖(Ginseng polysaccharides,GSP)对乙醇依赖小鼠戒断行为及血浆促肾上腺皮质激素(Adrenocorticotropic hormone,ACTH)和皮质醇水平的影响。方法将昆明种小鼠100只,随机分为5组,空白组腹腔注射生理盐水,模型组和GSP 3个剂量组(100、200、400 mg/kg)腹腔注射2.5 g/kg乙醇(20%,v/v),连续15 d,并于最后一次给予乙醇后24 h进行明暗箱实验、高架十字迷宫实验和乙醇戒断症状评分。采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血浆中ACTH和皮质醇含量。结果中、高剂量GSP显著提高乙醇依赖戒断小鼠在明暗室中穿梭次数和在明室内停留时间以及进入开臂次数比和在开臂停留时间比。此外,GSP中、高剂量组小鼠戒断症状评分低于模型组。ELISA结果显示,GSP能显著降低血浆皮质醇含量,增加ACTH含量。结论GSP可能通过调节ACTH和皮质醇的含量改善乙醇戒断引起的焦虑相关行为。

以案例为基础的教学方法在生理学教学中的应用效果

目的本研究以案例为基础的教学方法在生理学教学中的应用效果。方法选取我校2016级临床医学专业学生106名,分为观察组(n=53)和对照组(n=53)。对照组采用常规教学方法,观察组采用以案例为基础的教学方法。比较两组教学成绩、教学效果、教学满意度。结果观察组教学成绩优良率77.36%(41/53)高于对照组56.60%(30/53),差异有统计学意义(P<0.05);观察组表达能力、学习兴趣、自主学习能力、创新思维、分析解决问题能力评分高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论以案例为基础的教学方法应用于生理学教学中效果显著,能有效提高教学成绩及教学满意度。

酸枣仁皂苷A对小鼠前额叶皮层腺苷释放及核苷转运体的影响

目的研究酸枣仁皂苷A(JuA)(40、80 mg/kg)对小鼠前额叶皮层腺苷释放的影响。方法采用在体脑微透析观测JuA对前额皮质细胞外腺苷含量的影响,并同时观察小鼠的自主活动;Western blot考察JuA对平衡型核苷转运蛋白(ENT)和浓度型核苷转运蛋白(CNT)2种蛋白质表达。结果 JuA腹腔注射能在90 min内剂量依赖性地增加小鼠前额叶皮层细胞外腺苷含量,并降低其自主活动。对CNT1和ENT1蛋白表达无显著性影响。结论 JuA可以促进小鼠前额叶皮层腺苷的释放,但可能与核苷酸转运蛋白无关。

黄连多糖通过抑制氧化应激和炎症反应减轻糖尿病大鼠肾损伤的实验研究

目的研究黄连多糖对糖尿病大鼠肾损伤的保护作用及潜在机制。方法采用腹腔一次性注射STZ(60 mg/kg)建立糖尿病大鼠模型,将建模成功的SD大鼠随机分为模型组、d黄连多糖高(300 mg/kg/d)、低(100 mg/kg/d)剂量组及氯沙坦钾组(30 mg/kg/d),每组10只;另选取SD大鼠10只作为正常组。灌胃给药,1次/d;8周后,检测黄连多糖对糖尿病大鼠体质量、肾质量体质量比、BUN、Scr、24 h尿蛋白、肾组织病理形态、SOD、CAT、GSH-Px、MDA、IL-6、hs-CRP及TNF-α表达的影响。结果与模型组比较,黄连多糖组大鼠体质量显著增加,而肾质量体质量比明显减小;同时,黄连多糖组大鼠BUN、Scr水平及24 h尿蛋白显著降低,且肾组织病理形态明显减轻;黄连多糖还可以提高肾组织SOD、CAT、GSH-Px活性,降低肾组织MDA含量及血清IL-6、hs-CRP和TNF-α含量。结论黄连多糖具有减轻糖尿病大鼠肾损伤的作用,该作用与抑制氧化应激及炎症反应有关。

大黄素通过调节体外扩增NK细胞杀伤肺癌A549细胞的实验研究

为了探讨大黄素增强体外扩增NK细胞抗肺癌A549细胞杀伤效力的相关机制,体外培养A549肺癌细胞系和体外扩增NK细胞,将大黄素分对照组、低、中、高浓度组(0、1、12. 5、25μg/m L),通过MTT检测不同浓度大黄素在不同作用时间对A549细胞生长的抑制作用;通过钙黄绿素释放实验检测经不同浓度大黄素处理的NK细胞对A549细胞的杀伤效力;通过流式细胞仪检测经不同浓度大黄素处理的NK细胞特异性配体MIC A/B、HLA-ABC的表达。结果显示,大黄素能有效抑制A549细胞生长,增强NK细胞对A549细胞的杀伤效力,上调NK细胞活化性受体相关配体MIC A/B的表达,下调NK细胞抑制性受体相关配体HLA-ABC表达。因此,大黄素可以通过调节MIC A/B、HLA-ABC分子表达,增强体外扩增NK细胞对A549细胞的杀伤效力,为中药单体调节免疫细胞抗肿瘤在临床应用方面提供实验室依据。

人参皂苷CK对Aβ致阿尔茨海默病小鼠认知功能障碍和海马NLRP3炎症小体的影响

目的:考察人参皂苷CK对Aβ致阿尔茨海默病小鼠认知功能障碍和海马NLRP3炎症小体的影响。方法:侧脑室注射Aβ复制阿尔茨海默小鼠模型,连续给予人参皂苷CK,检测小鼠跳台实验和Morris水迷宫的行为学变化,Elisa法检测氧化应激指标SOD、MDA、CAT、GSH水平及炎症因子IL-1、IFN-γ、TNF-α水平。Western blot法检测海马NLRP3和cleared Caspase-1蛋白表达。结果:与模型组比较,高剂量人参皂苷CK能显著延长跳台潜伏期和减少触电次数,中、高剂量人参皂苷CK能显著降低Morris水迷宫第5天的跳台潜伏期,显著增加跨越平台次数;显著升高海马SOD、CAT、GSH、IFN-γ水平,并显著降低海马MDA、TNF-α水平及NLRP3、cleaved Caspase-1蛋白表达。结论:人参皂苷CK能改善阿尔茨海默小鼠的跳台实验和Morris水迷宫的行为学表现,并可显著降低海马内NLRP3炎症小体的激活和下游炎症因子的释放。

人参多糖对乙醇诱导的行为敏化小鼠行为学及前额叶皮层ERK/c-fos通路的影响

目的研究人参多糖(ginseng polysaccharides,GSP)对乙醇诱导的行为敏化的影响及可能机制。方法KM小鼠80只随机分为五组,空白组、模型组、GSP低剂量组(100 mg/kg)、GSP中剂量组(200 mg/kg)和GSP高剂量组(400 mg/kg)。除空白组外,其余各组可自由摄取水或乙醇,乙醇浓度随时间逐渐递增(3%~12%,每4天递增3%),经过4 d转化期后给予初始剂量3%乙醇激发,以此建立主动摄取乙醇的行为敏化模型。实验周期内每天测量各组乙醇消耗量和自主活动;转化期进行开场实验;表达期测定行为敏化的表达。酶联免疫吸附法(ELISA)检测前额叶皮层MDA含量及SOD和CAT活力。蛋白免疫印迹法(Western blot)检测前额叶皮层ERK、pERK和c-fos蛋白表达。实时荧光定量PCR(Real-time PCR)检测前额叶皮层p-ERK、C-FOS的mRNA表达。结果GSP三个剂量显著降低形成期内9%和12%乙醇引起的自主活动增加,并显著抑制初始剂量3%酒精激发(第25天)诱导的自主活动增加和乙醇摄入。GSP中、高剂量能够显著减少开场实验的爬格数和站立次数。GSP可显著抑制乙醇诱导的前额叶皮层MDA水平的增加,并提高SOD和CAT的活性。Western blot和Real-time PCR实验结果表明GSP能够下调前额叶皮层p-ERK和c-fos蛋白和mRNA的过度表达。结论GSP对乙醇诱导的小鼠行为敏化和乙醇摄取有抑制作用,这种作用可能通过干预ERK/c-fos通路。