COX-2与hMLH1、hMSH2在大肠癌中表达的相关性研究

目的:研究大肠癌及其癌旁正常组织中COX-2、hMLH1、hMSH2的表达情况及其与临床病理参数的关系,并探讨其相关性. 方法:应用COX-2、hMLH1、hMSH2多克隆抗体,采用免疫组化方法(SP法)检测78例大肠癌手术切除标本及其癌旁正常组织中COX-2、hMLH1、hMSH2蛋白的表达情况. 结果:在采用免疫组化方法所检测的78例大肠癌及其癌旁正常组织中,COX-2的阳性表达率分别为74.36%(58/78)、0%,hMLH1的阴性表达率分别为29.49%(23/78)、0%, hMSH2的阴性表达率为28.21%(22/78)、0%. 结论:在大肠癌中,COX-2蛋白表达与hMLH1、hMSH2 蛋白的表达缺乏有相反关系,即COX-2蛋白表达阴性的病例中,大多存在hMLH1或hMSH2蛋白表达缺乏,错配修复酶缺乏主要发生在COX-2蛋白表达阴性的病例中.说明二者可能通过不同的途径参与了结肠癌的发生和发展.

p38MAPK在结肠癌细胞凋亡中的作用及与COX-2的关系

目的探讨结肠癌细胞p38MAPK介导celecoxib(COX-2选择性抑制剂)抗肿瘤的作用及与COX-2的关系。方法用MTT法检测celecoxib对人结肠癌HT-29细胞生长的作用,用Western blot法测定各组细胞COX-2和Phosph-p38MAPK蛋白表达量,采用流式细胞术检测celecoxib和SB203580(p38MAPK特异性抑制剂)作用后HT-29细胞凋亡和细胞周期分布。结果p38MAPK和COX-2蛋白表达量与对照组(0.23±0.12)(0.95±0.14)相比,celecoxib可使p38MAPK蛋白表达水平明显升高(0.62±0.11),而使COX-2蛋白表达水平降低(0.44±0.11);SB203580使p38MAPK(0.12±0.05)及COX-2蛋白(0.23±0.13)表达水平均降低;SB203580和celecoxib共同作用后,p38MAPK表达量介于celecoxib和SB203580作用之间(0.43±0.12),COX-2表达量下降最为显著(0.15±0.10)。celecoxib和celecoxib+SB203580均可显著诱导HT-29细胞凋亡(P<0.01和P<0.05),与对照组(4.31%)相比,其凋亡率分别为40.95%、26.24%。结论在HT-29细胞中,celecoxib可通过活化p38MAPK而诱导结肠癌细胞凋亡,p38MAPK是COX-2的上游激酶,COX-2的表达水平受p38MAPK调控,并且COX-2可能对p38MAPK有负反馈调节作用。celecoxib是通过COX-2及其以外的p38MAPK通路诱导肿瘤细胞凋亡而发挥抗肿瘤作用的。

人细胞毒T淋巴细胞杀伤胃癌细胞及诱发凋亡的实验研究

目的 测定特异性细胞毒 T淋巴细胞 (CTL )对胃癌细胞的体外杀伤活性及观察形态学改变。方法 用分离胃腺癌患者的癌细胞经丝裂霉素 C处理后 ,作为抗原与抗CD3单克隆抗体、重组白细胞介素 - 2刺激患者自体外周血单个核细胞 ,体外诱导 CTL,用 MTT比色法测定 CTL 对自体癌细胞、人胃癌细胞株 (BGC- 82 3和 MGC- 80 3)的体外杀伤活性。将 CTL与 BGC- 82 3共同温育 ,通过透射和扫描电镜观察杀伤靶细胞的形态改变。结果 CTL对自体胃癌细胞有特异性杀伤作用 ,可使靶细胞凋亡或溶解坏死。结论 体外混合细胞培养诱导出的 CTL。

液囊空肠导管应用体会

就2年来100例次液囊空肠导管应用体会进行介绍。Ⅰ型管是以鼻胃管作载体，空肠导管前端5cm依附在鼻胃管的槽内，两者合为一体，各自有开口。胃管同普通14号胃管，空肠导管长约115cm。空肠导管有两个外口。一个是空肠导管外口，作为滴注药物或营养物使用；一个是液囊导管的开口，仅作推注液体，让薄膜套胀成液囊使用。以两个橡皮环将鼻胃管与空肠导管套在一起。置管方法与置普通鼻胃管相同。Ⅰ型导管主要适用于食管、胃肠、肝、胆、胰、脾及急腹症等手术，同时需要胃肠减压。术中用3ml生理盐水将液囊充盈，此时两管自然分开，术者捏住液囊将导管送入空肠上段，术后早期行肠内营养。并可防患于未然，术后一旦出现并发症，如吻合口瘘、吻合口水肿、胆瘘、胰瘘等，可借助导管予以肠内营养支持和其它对症治疗。笔者曾对2例贲门癌术后吻合口瘘患者，长达30天和61天经导管行肠内营养支持治疗，直至瘘口完全愈合，避免了再行空肠造瘘术。一般情况下导管保留10～14天。我们认为以Ⅰ型液囊空肠导管取代鼻胃管最适宜，既有胃肠减压效果，又建立空肠通道。空肠导管细软、弹性好、耐腐蚀、创伤小又经济，病人普遍能耐受。Ⅱ型管是去掉鼻胃管的依附，单一空肠导管，也可用金属导丝支撑。主要用于非手术或无需胃肠减压的病人。置入方法同前，确认导管抵达胃腔后，再将导管向胃内输入25～35cm，然后固定，用泛影葡胺3ml充盈液囊，借助液囊体积和重力，在胃肠蠕动作用下或灌注促胃肠蠕动药物，导管可过入空肠。笔者曾用Ⅱ型管作小肠造影时观察，导管进入空肠时间一般15～20min，治疗吻合口瘘、肠外瘘、胆、胰瘘等疾病，置管后液囊管能否顺利进入空肠与其胃肠蠕动功能有关，也有始终停留在胃内。因此，我们建议，手术前以Ⅰ型空肠导管取代鼻胃管，非常必要。目前液囊空肠导管除了外科，其它如烧伤科、神经内外科、精神科、肿瘤放化疗科等凡需要管饲的病人，均可应用。也可用作小肠造影。笔者认为有实用价值，值得推广应用。

胃癌环氧化酶-2、hMLH1及hMSH2微卫星不稳定与基因调控的关系

目的检测临床手术切除43例胃癌及相应正常组织COX-2、hMLH1和hMSH2微卫星不稳定状态MSI及三种基因启动子甲基化情况,并进一步探讨它们与胃癌发生的关系。方法采用聚合酶链反应(PCR)技术检测5个位点的MSI状态;甲基化特异性PCR(Methylation specific PCR,MSP)方法检测胃癌及正常组织COX-2、hMLH1及hMSH2三种基因启动子CpG岛甲基化状态。结果43例胃癌中MSI总检出率为48.84%(21/43),五个位点的MSI检出率无显著差别。COX-2和hMLH1基因启动子CpG岛甲基化在43例胃癌中分别有8例和13例,正常组织中未检测到。hMSH2基因启动子CpG岛在胃癌及正常组织中均未检测到甲基化。在MSI-H组hMLH1基因启动子CpG岛甲基化率显著高于MSS组(P<0.01);而在MSI-H和MSI-L组间以及MSI-L和MSS无差别。MSI-H组中COX-2基因启动子CpG岛甲基化8例,且有7例胃癌同时出现hMLH1和COX-2基因启动子CpG岛甲基化。结论在MSI胃癌(尤其是MSI-H型胃癌)的发生、发展过程中可能同时出现了hMLH1和COX-2基因启动子CpG岛的甲基化(即表型遗传修饰)。MSI胃癌hMLH1基因启动子CpG岛甲基化率高于MSS胃癌,提示检测hMLH1基因启动子CpG岛甲基化对于判断肿瘤类型有一定意义。

冠心病中医脉诊客观化临床研究

使用TD-Ⅲ型智能脉象信息检测仪器进行收集分析临床数据,提供中医脉诊的量化指标,对冠心病患者临床治疗前后脉象的改变进行观察。经统计结果表明:与治疗前相比,治疗后,U角增大并趋于正常值,press增大,t1减小,t5减小,h1值增大。根据其统计结果并进行探讨冠心病的基本病机为本虚标实,虚实夹杂。并且在中医客观化诊疗疾病评价临床疗效方面进行初步试探,为今后中医诊疗的客观化进一步发展做铺垫。

P-P38MAPK、COX-2在胃癌细胞株中的表达及二者关系的研究

目的研究磷酸化P38丝裂原活化蛋白激酶(P-P38 mitogen-activated protein kinase,P-P38MAPK)和环氧化酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)在胃癌细胞株中的表达及二者的关系,探讨非甾体类抗炎药(non-steroidalanti-inflammatory drugs,NSAIDs)的抑癌机制。方法体外常规培养胃癌细胞株SGC7901。实验分为空白对照组(CON组)、NS398组(NS组)、SB203580组(SB组)、SB203580和NS398共同作用组(SBNS组)以及溶剂对照组(DMSO组)。用四甲基偶氮唑盐比色法检测药物对SGC7901细胞增殖的抑制作用;应用流式细胞定量检测技术(flow cytometry,FCM)检测SGC7901细胞凋亡和细胞周期;应用FCM和蛋白免疫印迹(Western blot)检测SGC7901细胞中COX-2、P-P38MAPK蛋白的表达。结果各组药物作用于SGC-7901细胞均可诱导细胞凋亡,细胞凋亡率与空白对照组相比差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01);抑制细胞增殖。CO)X-2蛋白表达SB组、NS组和SBNS组明显低于CON组(P<0.01);SBNS组明显低于NS组和SB组(P<0.01或P<0.05)。P-P38MAPK蛋白表达SB组明显低于CON组(P<0.05);而NS组和SBNS组明显高于CON组(P<0.05)。结论胃癌细胞株SGC7901中,P-P38MAPK是COX-2的上游激酶,可上调COX-2的表达,COX-2可能对P-P38MAPK有负反馈调节作用。P-P38MAPK活化后在胃癌细胞株SGC7901中的终效应是促进肿瘤细胞增殖。

散发性结直肠癌中hMSH2与PTEN的表达及临床意义

目的:研究错配修复蛋白hMSH2与PTEN在散发性结直肠癌的表达变化及两者之间的关系,以进一步探讨其临床意义.方法:采用SP免疫组织化学两步法对42例散发性结直肠癌、相应近端癌旁组织(距癌组织3cm)和远端癌旁组织(距癌组织>10cm)及15例正常结直肠组织进行hMSH2与PTEN蛋白表达检测.同时Western blot法检测42例散发性结直肠癌、相应远端对照组织hMSH2与PTEN蛋白表达.分析散发性结直肠癌发病机制及hMSH2与PTEN蛋白表达与临床病理之间的关系.结果:结直肠癌组织中,hMSH2与PTEN蛋白失表达率(阴性率)均低于正常结直肠组织及近端癌旁组织、远端癌旁组织(χ2hM S H2=7.967,χ2PTEN=11.67,均P<0.05).PTEN蛋白表达与肿瘤分化程度呈正相关(rs=0.727,P<0.05),与Dukes分期、侵润深度、淋巴结转移、肝转移均呈负相关(rs=-0.727,-0.718,-0.718,-0.535,均P<0.05).hMSH2蛋白表达与上述临床病理特征未见明显相关.h M S H2与P T E N蛋白表达在散发性结直肠癌中呈正相关(rs=0.679,P<0.05).与远端对照组织相比42例胃癌组织中hMSH2蛋白低表达率为59.52%(25/42),PTEN低表达率为45.24%(19/42).结论:PTEN表达与其临床病理特征相关;在散发性结直肠癌发生、发展过程中错配修复蛋白hMSH2表达缺失伴有PTEN蛋白表达下调.

针刺治疗失眠疗效评价的新思路

针刺治疗失眠疗效确切,但其疗效评价即无统一标准,又缺乏客观化,更不能体现中医疗效评价的特点,其准确度也难以被人们所信服,这也阻碍了针灸学进一步发展。所以为了使针刺在治疗失眠方面更好的被人们认可,也能够使针灸在世界范围内进一步的发展的需要,笔者提出了用针刺治疗失眠前后脉图参数的变化来对其疗效进行客观化评价。针刺的疗效可以通过"气至"与否来判断,而"气至"与否又可以通过脉象的变化来判断,从而可以通过针刺治疗失眠前后脉象的变化,对其疗效做出评价。现在的智能脉象仪的出现,脉图参数的分析,为其疗效的客观化评价提供了技术基础。不仅可以通过针刺治疗失眠前后的脉图改变进行客观化疗效评估,还可以通过对一次针刺治疗前后脉象变化进行客观化疗效预测,其优越性有四点:1可以随时测知失眠患者针刺治疗的效果,预测其疗效,进而可以调整治疗方案,避免耽误患者的病情;2有利于节约医疗资源,更大程度的减轻患者的痛苦;3采用脉图参数作为检测指标,具有客观性,避免医生和患者的主观感觉产生分歧,保证其疗效检测的准确性;4此为无创性检测。

PPH术治疗脱垂性内痔18例报告

目的 :探讨 PPH痔环切术的实用性和安全性。方法 :采用 PPH对 1 8例 ～ 度环形内痔进行手术治疗 ,并与传统手术方式进行比较。结果 :PPH组手术时间平均 1 8min,术后平均住院 3d,并发症减少。结论 :与传统手术方法比较具有安全、有效、手术时间短、并发症少、恢复快等特点 。

腹腔镜与开腹直肠癌保肛手术的临床对比研究

目的探讨腹腔镜直肠癌保肛手术的可行性、安全性及优越性。方法将2004年12月～2006年3月收治的可以行保肛手术直肠癌患者60例,随机分腹腔镜组和传统开腹组进行手术,对其临床资料进行比较分析。结果腹腔镜组29例,开腹手术28例。腹腔镜组术中出血量、手术切口长度、术后疼痛评分VAS、恢复肠道功能的时间和下床活动时间[(69±48)mL、(5.1±1.5)cm、(5.3±2.1)、(31±11)h和(2.5±1.2)d)]明显低于开腹手术组[(172±67)mL、(19.8±4.7)cm、(9.2±2.9)、(82±13)h和(7.2±2.8)d],腹腔镜组手术时间(172±36)min明显长于开腹手术组(142±47)min,两组之间差异均存在显著性,P<0.01。两组在肠段切除长度、肿块距下切缘距离和淋巴结清扫范围方面比较,差异无显著性,P>0.05。开腹手术组术中肉眼血尿、术后切口感染发生机会多于腹腔镜组,两组吻合口瘘的发生率基本相同。结论腹腔镜直肠癌根治手术创伤小,恢复快,安全可靠,对于能够按照TME原则进行手术保肛的直肠癌患者,能够取得与开腹手术同样的肿瘤根治性效果。

无钉合完全腹膜外腹腔镜疝修补术(附32例次报告)

目的探讨无钉合完全腹膜外腹腔镜疝修补术(TEP)的可行性和安全性。方法自2007年1～6月在全身麻醉下行无钉合完全腹膜外腹腔镜疝修补术共32例次(26例患者),其中双侧腹股沟疝6例,斜疝25例,直疝7例。结果手术全部成功,平均手术时间(76.8±23.8)min,平均术中出血量(8.3±4.6)mL,术后平均住院时间(2.7±1.2)d,恢复日常活动时间(5.2±1.3)d,术中腹膜破裂4例,术后阴囊血肿1例,无其他手术并发症。随访时间1～5个月,未见复发及腹股沟区慢性疼痛等并发症。结论无钉合TEP是一种可行、安全、有效的无张力疝修补技术,能明显降低手术费用并获得最佳卫生经济学效益,可减少腹股沟区慢性疼痛症状的发生。

腹腔镜辅助与开腹手术治疗进展期胃癌的对比研究

目的探讨腹腔镜手术治疗进展期胃癌的价值。方法回顾性分析2009年3月～2012年4月86例进展期胃癌的临床资料,其中40例腹腔镜辅助手术,46例开腹手术。比较两组手术时间、出血量、清扫淋巴结数、术后排气时间、术后并发症、住院时间及住院费用等。结果 2组手术时间、清扫淋巴结数、住院费用差异无显著性。与开腹组相比,腹腔镜组出血少[(226.6±49.5)ml vs.(305.3±29.3)ml,t=-9.107,P=0.000],术后排气早[(2.2±0.8)d vs.(3.4±0.9)d,t=-6.476,P=0.000],术后并发症少[0(0/40)vs.15%(7/46),P=0.013],住院时间短[(9.1±1.6)d vs.(12.5±1.6)d,t=-9.987,P=0.000]。结论腹腔镜辅助治疗进展期胃癌具有创伤小、出血少、恢复快等优点,近期优势较开腹手术明显。

早期胃癌组织中上皮钙粘蛋白表达与淋巴结微转移及临床病理的关系

背景与目的:早期胃癌淋巴结微转移问题日益受到关注,胞浆角蛋白(cytokeratin,CK)染色是识别上皮源性恶性肿瘤细胞的重要方法,本研究拟探讨早期胃癌原发灶上皮钙粘蛋白(epithelial cadherin,E-cad)的表达情况与淋巴结内出现微转移之间的关系及临床意义。方法:用免疫组织化学染色的方法对162例早期胃癌患者的4522枚淋巴结进行苏木精-伊红(HE)和胞浆角蛋白(cytokeratin,CK)染色,并对其中135例患者的原发灶切片进行E-cad染色,结合临床病理资料和随访结果进行分析。结果:HE染色发现的淋巴结转移率为6.8%(11/162),而CK染色发现的淋巴结转移率为26.5%(43/162),二者差异有统计学意义(P<0.001)。在151例HE染色未见淋巴结转移的患者中通过CK染色发现了32例(21.2%)有淋巴结微转移,且淋巴结微转移多见于原发灶直径大于1.0cm,组织分化不良,肿瘤浸润较深的(如浸及粘膜下层),淋巴管和血管受累,以及E-cad低表达标本(P<0.05)。原发灶E-cad的低表达率为57.0%(77/135),与淋巴结出现微转移有密切关系,有淋巴结微转移患者的5年生存率比没有微转移者明显低(P<0.01)。结论:肿瘤直径大于1.0cm,组织分化不良,较深的浸润,淋巴管或血管受累,以及E-cad低表达是早期胃癌患者出现淋巴结转移的高危因素。

改良完全腹膜外腹腔镜疝修补术31例报告

目的评价改良的完全腹膜外腹腔镜疝修补(totally extraperitoneal laparoscopic hernia repair,TEP)手术方法的可行性和安全性。方法2007年1月~8月,在全麻下行改良TEP31例。用一次性吸引器头的塑料外套管对手术区域的腹膜前间隙进行初步分离,再将国产单腔气囊导管小心置入腹膜外间隙,充气扩张建立腹膜外间隙。术中不固定补片。结果手术全部成功,手术时间(69.8±21.8)min,术中出血量(7.6±4.2)ml,术后住院时间(2.6±1.3)d。术中腹膜破裂5例,术后阴囊积液2例,无其他手术并发症。31例随访1~7个月,(4.2±2.4)月,未见复发及腹股沟区慢性疼痛等并发症。结论改良TEP是一种安全可行的无张力疝修补技术,腹股沟区慢性疼痛症状少。

5-氟尿嘧啶术前化疗对胃癌细胞凋亡和增殖的影响

目的:观察应用5-氟尿嘧啶术前化疗对胃癌细胞凋亡和增殖的影响。方法:30例进展期胃癌患者术前应用5-氟尿嘧啶,周围静脉给药,750mg/d,连用5d后手术。对比分析术前胃镜活检及术后切取肿瘤组织细胞凋亡和增殖情况,分别应用TUNEL标记和免疫组化方法。结果:化疗后胃癌细胞凋亡总指数为(10·1±5·3)%,较化疗前凋亡总指数(6·9±3·0)%显著增高,P=0·026。高中分化腺癌组、肿瘤直径<4cm组、未浸及浆膜层组化疗前后凋亡指数差异明显。化疗后增殖总指数为(48·7±13·4)%,较化疗前增殖总指数(58·4±14·8)%显著降低,P=0·0035。化疗前后各组均差异有统计学意义。结论:5-氟尿嘧啶术前静脉化疗可诱导胃癌细胞凋亡,并有效抑制胃癌细胞增殖。5-氟尿嘧啶对分化程度高的胃癌诱导凋亡作用明显。

腹腔镜手术治疗机械性肠梗阻的应用价值

目的:探讨腹腔镜在机械性肠梗阻手术治疗中的可行性与安全性.方法:应用腹腔镜技术为机械性肠梗阻30例患者实施了手术治疗,包括肠粘连18例、肠管内疝1例、肠扭转1例、小肠憩室导致肠套叠1例、小肠间质瘤3例、小肠癌1例、肠道炎症3例和结肠癌2例.结果:28例患者在腹腔镜下完成手术,其中完全腹腔镜手术17例,腹腔镜辅助手术11例.其余2例患者因腹腔内粘连严重中转开腹.成功进行腹腔镜手术的时间30-200 min,患者术后疼痛轻、肠道功能恢复快、术后排气时间1-2 d,无手术并发症的发生.平均术后住院时间5 d,经过4-32 mo随访,均无肠梗阻症状的发生.结论:腹腔镜技术治疗机械性肠梗阻是一种比较安全且有效的手术方法,能够减少术后腹腔内再粘连的形成.