基于DNA链置换反应的新型固定化酶反应器制备及应用

建立了一种新型的酶固定化方法,采用DNA链置换反应成功地在单链DNA标记的磁性纳米粒子上实现了酶的链置换无损更替。该技术可实现目标酶的再利用,节约了生产成本。制备的固定化胰蛋白酶微反应器具有较好的重复利用性和高酶切效率,重复使用10次后仍可保持原酶活性的86%;利用链置换反应制备的MNPs@DNATrypsin酶切马心肌红蛋白5 min后,即可获得95%±0%(n=3)的氨基酸序列覆盖率,远超过相同条件下自由酶酶切12 h的结果。实验表明,发展的固定化酶技术具有高磁响应性,便于从反应体系中回收固定化酶和重复使用,同时此技术可显著提高酶活性,因此可用于固定各种重要的酶,同时可将其广泛应用于各种酶促反应中。

基于DNA定向固定化技术构建毛细管固定化酶微反应器的研究进展

生物酶影响着物质代谢和质能转换等生命活动,生物体内某些酶的活性变化会导致疾病的发生。发展新型的酶分析方法对深刻理解生物代谢过程、疾病诊断和药物研发等具有重要意义。毛细管电泳(CE)具有分离效率高、分析速度快、操作简单和样品消耗少以及可与多种检测手段联用等优点,在酶分析研究中越来越受到关注。CE酶分析主要包括离线和在线两种模式,其中,固定化酶微反应器与毛细管电泳联用(CE-IMER)的在线酶分析已经成为主要的酶分析方法之一。CE-IMER充分结合了固定化酶和CE的优势,将游离酶固定在毛细管内,不仅可以显著提高酶的稳定性和重复使用性,而且可以实现纳升规模溶液的自动化酶分析,进而显著降低酶分析成本。目前已有大量方法制备IMER用于CE酶分析,然而如何构建性能良好、可再生使用、酶固载量大、自动化程度高的CE-IMER一直是该领域重点研究的问题。DNA定向固定化技术(DDI)可以充分利用DNA分子的碱基互补配对(A-T,C-G),在温和的生理条件下特异性固定生物大分子。由于短链双螺旋DNA分子具有较强的机械刚性和物理化学稳定性,通过DDI将酶固定在载体表面,有利于降低传质阻力,提高酶与底物的接触能力,进而促进酶促分析过程。该文主要综述了利用DDI构建新型IMER在CE酶分析中的应用现状,并对其未来发展进行了展望。

基于企业微信平台和在线教育综合平台的线上教学实践

为实现在新型冠状病毒肺炎疫情防控期间“停课不停教,停课不停学”,以化学类本科专业课程“分离科学与技术”为例,构建了基于企业微信平台和在线教育综合平台的“双平台”线上教学策略,探索了线上教学中体现“以学生为中心”教育理念的教学方法。

精彩的拔河比赛

五年级（下册·苏教版）第二单元修改《拔河》一文修改《拔河》一文,需注意以下几点：1.按照原文批语进行修改;2.将拔河的场面写得具体生动;3.可添加一些小插曲;4.过渡自然。修改作文要点今天上午,老师告诉我们一个好消息：＂下午要举行拔河比赛,我们的对手是六（9）班。＂话音刚落,班上立刻从鸦雀无声变成沸腾无比,

化妆品中米诺地尔的毛细管区带电泳测定法

目的建立化妆品中米诺地尔的毛细管区带电泳(CZE)测定法。方法样品经提取液(甲醇∶2 mmol/L磷酸二氢钠+3 mmol/L磷酸体积比为1∶9)提取后离心,过0.45μm膜后上机。采用未涂敷熔融石英毛细管[75μm×30.2 cm(有效长度:20 cm)];分离缓冲液为20 mmol/L磷酸二氢钠-30 mmol/L磷酸,pH 2.13;分离电压为11 kV;检测波长为278 nm;进样压力为0.5 psi;进样时间为3 s。结果在1~160 mg/L的线性范围内,所得米诺地尔的回归方程为y=151.12x+73.363,r=0.999 95,呈良好的线性关系。该方法的检出限为0.3 mg/L,定量下限为1.0 mg/L,平均回收率在93.4%~95.9%之间,RSD在3.3%~3.7%之间。结论该方法简单、快速、准确,可用于化妆品中米诺地尔含量的检测。

测定植物油酸价国家标准方法引入实验教学的改进与实践

国家标准中采用冷溶剂指示剂滴定法测定油脂酸价,具有实验仪器简单、试剂易得、操作方便的优点。将国家标准方法转化为探究性实验教学内容,有利于激发学生学习兴趣,提高自主学习能力,但是该方法直接应用在实验教学中存在一定的不足之处,因此进行了相应的改进,包括采用常见的常量滴定管代替微量滴定管,降低滴定剂浓度,利用更安全的环己烷作溶剂,通过临近滴定终点前加入去离子水的方式提高滴定终点的稳定性等。在教学实践中采用以学生为主体,以问题为导向的教学模式,培养学生知识整合和综合应用的能力,促进素质型、创新型人才培养。